体内药物分析总结.docx

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体内药物分析总结

1.为什么要加入叔丁基甲醚？

答：

加入叔丁基甲醚的作用是从尿液中萃取出类固醇。

2.气相色谱法不适用于哪些样品的分析？

答：

气相色谱法不适于高沸点、高温易分解的组分分析。

3.克伦特罗的危害

β2受体激动时可抑制淋巴细胞的增殖，抑制淋巴因子和抗体的形成，抑制诱发的血小板激活；盐酸克伦特罗可使血糖升高，胰岛素分泌增加，引起厌食

β2受体兴奋能引起血乳酸、丙酮酸升高，并可出现酮体，引起代谢紊乱

骨骼肌慢收缩纤维上的β2受体，使之加速收缩，表现为手不能握住，走路困难，面颈部骨骼肌震颤

克伦特罗可激动骨骼肌细胞膜上Na/K+/ATP酶，促使K+进入细胞，血液中K+浓度下降，诱发心律失常

4.液相色谱适宜的分析对象是（B）

A低沸点小分子有机化合物

B高沸点大分子有机化合物

C所有有机化合物

D所有化合物

5、用紫外测定吡哌酸实验中加入氢氧化钠溶液有何目的？

答：

要控制好溶液的酸碱度

6、直接紫外分光光度法对溶剂有何要求？

答：

由于溶剂与溶质分子间形成氢键、偶极化等的影响，可以使溶质吸收波长发生位移。

通常极性溶剂比非极性溶剂的影响大，在选择溶剂时应予以注意。

测定供试品前，应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否有吸收峰，是否影响供试品测定。

每次测定时应采用同一厂家、同一批号的试剂配制混合均匀的同一批溶剂。

7.放射性免疫分析法优点是灵敏、特异、简便易行、用样量少

8.RIA法的影响因素是什么？

pH和离子强度

反应温度温度一般为37℃，也有45℃，室温，4℃冰箱；

反应时间操作中的注意事项：

戴手套、防护镜等，将试剂盒从冰箱中取出，室温下放置30min方可使用。

1.体内药物分析的概念名

一门研究生物机体中药物及其代谢物和内源性物质的质与量变化规律的分析方法学。

2.体内药物分析的对象填、选

生物体内药物到达之外及其对该处带来的影响

3.体内药物分析的任务简

（1）进行分析技术、分析方法学研究，提供最佳分析条件。

（2）为药物体内研究提供数据

（3）服务于临床治疗药物监测，参与指导临床用药科学

（4）内源性物质的测定和研究

（5）滥用药物的检测

4.体内药物分析的特点简、选

（1）、样品量少，不易重新获得。

（2）、样品复杂，干扰杂质多。

（3）、药物浓度往往较低，对分析方法的灵敏度及专属性要求较高。

（4）、供临床用药监护的检测分析方法，要求简单、快速、准确以便迅速为临床提供设计合理的用药方案及中毒解救措施。

（5）、实验室应拥有可进行复杂样品分析的设备。

（6）、工作量大：

个体差异；数据量大。

5.体内药物分析样品的种类和储存填

（1）、血样

（2）、尿液

（3）、唾液

（4）、其它样品

6.血浆（plasma）：

名全血加入抗凝剂（最常用的为肝素），离心（2500—3000r/min,5-10min）得到的上层清液。

7.血清（serum）：

名取血后，不加入抗凝剂，待血液静置0.5—1h后，除去血饼，残余液体离心后得到的上层清液。

8.血样的使用与保存选

采取血样后，应及时分离血浆或血清，并立即进行分析。

如不能立即测定时，应完全密塞后保存，短期冷藏（4℃），长期冷冻（-20℃）保存。

切忌反复冻存！

注意事项：

测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血清中的药物浓度，而不是指含有血细胞的全血中的药物浓度。

一般认为，当药物在体内达到稳定状态时，血浆中药物浓度与药物在作用点的浓度紧密相关，即血浆中的药物浓度反映了药物在体内（靶器官）的状况，因而血浆浓度可作为作用部位药物浓度的可靠指标。

血样主要用于药物代谢动力学、生物利用度、临床治疗药物浓度监测等研究与实际工作中。

9.尿液选

尿样的使用与保存

采集的尿样应立即侧定。

若收集24h的尿液不能立即测定时，应加入防腐剂置冰箱中保存。

常用防腐剂有：

甲苯和氯仿，短时冷藏；长时冷冻。

优点：

1）容易获得，样品量大。

2）健康人尿液中不含蛋白质，不需进行去除蛋白质处理。

缺点:

1）尿液中药物浓度的改变不能直接反应血药浓度，即与血药浓度相关性差。

2）受试者的肾功能正常与否直接影响药物的排泄，因而肾功能不良者不宜采用尿样。

3）婴儿的排尿时间难于掌握。

4）尿液不易采集完全。

10.唾液选

目的与用途：

临床药物监测（与血药浓度相关性好）

优点：

1）可以不受时间和地点的限制，很容易地反复采集，采集时无痛苦无危险；

2）有些唾液中药物浓度可以反映血浆中游离型药物浓度。

缺点:

1）唾液中药物浓度与血浆中药物浓度的比值只有少数药物是恒定值；

2）有些与蛋白结合率较高的药物，药物在唾液中的浓度比血浆浓度低得多，需要高灵敏度的分析方法才能检测。

11.生物样品预处理的目的（为什么进行生物样品预处理）简

1）.测定药物的总浓度

2）.生物样品介质组成复杂，干扰多，而药物组分是微量的，必须先经过预处理，使纯化、富集。

3）.为了适应和符合分析方法的要求

4）.为了防止仪器被污染，提高测定准确度

12.生物样品预处理的方法简

1）、去除蛋白质

性质有机化合物溶解度

方法方法一：

调整蛋白质的溶解度使之沉淀

（1）加入与水相混溶的有机溶剂。

如乙腈、甲醛、乙醇、丙酮、四氢呋喃等。

（2）盐析，加入中性盐，改变溶液离子强度。

常用的中性盐有：

饱和硫酸铵、硫酸钠等。

（3）加入强酸。

蛋白质与强酸形成不容性的盐，进而析出。

常用酸有：

6%高氯酸、10%三氯醋酸、5%偏磷酸等。

（4）加入含锌盐和铜盐的沉淀剂。

当pH大于pI时，金属阳离子与蛋白质形成不溶性盐沉淀。

常用的沉淀剂有：

CuSO4-Na2WO4、ZnSO4-NaOH等。

性质生物大分子

方法方法二：

超滤法（膜过滤法）

对于不同蛋白质，选择不同截留分子量的超滤膜。

性质聚合物：

肽键

方法方法三：

酶水解法

最常用的酶：

蛋白质水解酶中的枯草菌溶素（pH7.0—11.0，50—60oC）。

优点：

操作简单，回收率高！

性质有活性、易变性！

方法方法四：

加热法（膜过滤法）

2）、缀合物名

药物及其代谢物与内源性物质结合形成的产物叫做缀合物（conjugate）

3）、分离纯化与浓缩填、选

液液萃取法（liquid-liquidextraction,LLE）

液液萃取剂的选择常用的萃取剂：

1、依据相似相容进行选择不溶于水正乙烷

2、沸点低环乙烷

3、毒性小四氯化碳

4、不易乳化苯

5、化学稳定性好甲苯

6、不影响紫外检测异丙醚

乙醚

醋酸戊酯

三氯甲烷

1,2-二氯甲烷

甲基异丁基酮

乙酸乙酯

正丁醇

固相萃取法（solidphaseextraction,SPE）

4）、样品衍生化方法选

柱前、柱后

13.生物样品预处理应考虑的问题选

1）药物的理化性质和存在形式

2）待测药物的浓度范围

3）药物测定的目的

4）选用的生物样品类型

5）样品预处理与分析技术的关系

14.体内药物分析方法汇总分三类填

1）光谱分析法

2）色谱、电泳法

3）免疫分析法

15.选择性：

名

分析方法的选择性（selectivity）又称专属性（specificity），通常是指样品中含有其它共存物质时，分析方法能够准确、专一地测定出药物的能力。

16.填、选

17.CNKI中国期刊网

世界著名的三大科技文献检索系统：

SCI（科学引文索引）

EI（工程索引）

ISTP（科技会议录索引）

18.简、填

19、选择性（selectivity）名

又称特异性、专属性、专一性，是指样品中含有其它共存物质时，分析方法能够准确、专一地测定出药物的能力。

20、准确度（accruacy）名

指在分析条件下，测得值与真实值的接近程度。

21、精密度（Precision）名

在确定的分析条件下，相同介质中相同浓度样品的一系列测量值的分散程度。

22、灵敏度（sensitivity）名

指一种分析方法可检出有关化合物的最小值。

定量限与检测限的不同在于定量限规定的最低测得量应该符合一定的精密度和准确度要求

23、线性范围（linearrange）名

指一种分析方法的精密度、准确度都符合要求的试验结果成线性时供试物浓度的变化范围。

24、稳定性（stability）名

一种分析物在确定条件下，一定时间内在给定介质中的化学稳定性。

25、萃取回收率（extractionrecovery）名

分析过程的提取效率，以样品提取和处理过程前后分析物含量百分比表示。

26、抗体（antibody）名

机体的免疫系统在抗原刺激下，体内产生的，可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。

27.HPLC样品处理

1）、脱气

气泡从何而来

一、流动相溶液中往往因溶解有氧气或混入了空气而形成气泡；

二、系统开始工作时未能将流路中的空气驱赶干净；

三、在注入样品时不注意混入了空气。

气泡存在的危害：

会造成色谱图上出现尖锐的噪声峰，严重时会造成分析灵敏度下降；

气泡变大进入流路或色谱柱时会使流动相的流速变慢或不稳定，使基线起伏。

常用的脱气方法：

1.吹氦脱气法使用在液体中比空气溶解度低的氦气，在0.1Mpa压力下，以约60ml/min流速通入流动相10-15min以驱除溶解的气体。

此法使用于所有的溶剂，脱气效果较好。

2.加热回流法此法的脱气效果较好；

3.抽真空脱气法此时可使用微型真空泵，降压至0.05-0.07MPa即可除区溶解的气体。

由于抽真空会引起混合溶剂组成的变化，故此法适用于单一溶剂体系脱气。

对多元溶剂体系应预先脱气后再进行混合，以保证混合后的比例不变。

4.超声波脱气法它是目前实验室使用最广泛的脱气方法，将配制好的流动相连同容器一起放入超声波水漕中脱气10-20min即可。

该方法操作简便，基本能满足日常分析的要求。

2）、过滤：

0.22μm或0.45μm

28、选择滤膜滤头要考虑的因素：

微孔滤膜的主要功能是从气相或者液相中截留微粒，细菌及其他杂质，以达到分离，净化，提纯的目的。

选择滤膜要考虑以下几个因素：

1.滤膜的材质（化学兼容性）：

选择滤膜时，首先要考虑化学相容性。

滤器是否耐酸、碱、有机溶剂等。

可参考化学相容性表

2.滤膜的孔径：

对于使用3μm或更大粒径填料的色谱柱系统，可采用0.45μm的针头滤器或滤膜；

对于使小于3μm填料的色谱系统，或涉及微生物生长的色谱系统，推荐使用0.2μm的滤膜。

对于难处理的混浊溶液，可以使用1-5μm的滤膜进行预过滤，然后再用相应的滤膜进行续滤。

29、紫外-可见分光光度法分类知道

导数分光光度法

差示分光光度法

多波长分光光度法

30、紫外-可见分光光度法缺点知道

不具分离能力，即选择性差