银耳多糖抗衰老作用机理的研究进展开题报告之欧阳科创编.docx

银耳多糖抗衰老作用机理的研究进展开题报告之欧阳科创编.docx

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银耳多糖抗衰老作用机理的研究进展开题报告之欧阳科创编

四川农业大学本科毕业论文（设计）

时间：

2021.02.05

创作：

欧阳科

开题报告

题目

银耳多糖抗衰老作用机理的研究进展

论文方向：

天然产物的开发利用

学生姓名：

鲜坤

学号：

20035041

学院（系）：

资源与环境系

专业（班级）：

生物技术教育1班03级

指导教师（职称）：

唐福全硕士

完成时间：

2006年10月

1、引言2

2、文献综述2

2.1银耳的生物学特性2

2.2　银耳的化学成份2

2.3银耳多糖的药理作用研究概况及药理作用3

2.3.1对免疫系统的调节作用3

2.3.2抗衰老作用4

2.3.3抗肿瘤作用4

2.3.4降血糖作用4

2.3.5降血脂作用4

2.3.6促进蛋白质、核酸合5

2.3.7抗凝血、抗血栓作用5

2.3.8抗溃疡作用5

2.3.9抗突变作用5

3、综述的目的5

4、综述的思路和内容6

4.1　论文关注的理论意义和应用价值6

4.2论文重点关注的问题6

4.2.1银耳多糖提高免疫功能对抗衰老的影响6

4.2.2研究银耳多糖抗衰老抗衰老的理论数据6

4.2.3为人类利用银耳多糖抗衰老提供全面依据6

4.3采用的论文技术路线6

5、预期结果和存在问题6

5.1　预期的结果6

5.2　存在的问题6

6、论文时间安排7

7、经费预算7

8、参考文献7

1、引言

衰老是人类的自然进程，而抗衰老是科学领域热门的主题。

根据现代生物学的推

算，人的寿命为性成熟期的8-10倍（即100~150岁）。

目前全世界平均寿命约为61岁，发达国家平均为70岁，日本为78岁。

可见当今人类的寿命还远远没有达到自然寿命的期限。

许多研究结果提示，很多营养素具有抗衰延寿的作用，我国传统食物银耳中所含

的银耳多糖（TP）有很好的抗衰保健功能，能明显延长果蝇的寿命，对很多老年性疾病

都有防治作用。

衰老是一个渐进的过程，在这个过程中环境与遗传都有很大影响，现代医学使很

多疾病引起的衰老得到了控制，但仍未能改变正常衰老的过程，这说明在生物体中有

自身控制寿命的机制的存在，只有对相应的机制进行调控，才能真正发挥抗衰老的功

能。

国外关于营养对衰老的研究已经进入分子生物学领域，如Se、维生素A,E都成为研究的对象。

关于衰老的机制众口不一，如遗传学说、脂褐质累积学说、交联学说、端粒学说、特异ERCDNA（环状DNA）积累学说等，最新研究是关于细胞周期调控与衰老。

本文基于目前银耳多糖抗衰老研究的基础上，对银耳多糖抗衰老的药用机理进行全面的阐述，关注抗衰老与提高免疫功能之间的关系，讨论银耳多糖抗衰老的药用指标。

为以后开发利用奠定基础。

2、文献综述

2.1银耳的生物学特性

银耳在分类上隶属于真菌门（Eumycota），担子菌纲（Basidiomycetes），银耳目（Tremellales），银耳科（Tremellaceae），银耳属（tremella），属中温、好气性真菌，主要分布于亚热带，也分布于热带、温带和寒带。

银耳菌丝和子实体生长的最适温度是22~26oC，最适PH为5.2~5.8，在50~600Lx的光照条件下，银耳子实体生长发育良好。

银耳直接利用纤维素和木质素的能力很弱，有赖于其伴生菌分解大分子化合物，从中摄取养分。

银耳能利用葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖、甘露糖、木糖、纤维二糖、乙醇及醋酸钠等碳源和蛋白胨、铵态氮、硫酸铵等有机氮。

对银耳分类、生活史、生活条件等的研究已有较多的报道[1-2]。

2.2　银耳的化学成份

可分为三大类，即多糖类、脂类和蛋白类（酶、蛋白质、氨基酸）。

每100g银耳干品含蛋白质5.0~6.6g,脂肪6--3.1g,碳水化合物68~78.3g,粗纤维1.0~2.6g，此外还含有无机盐4~6.7g、维生素B等。

其中以多糖类研究最为深入，银耳中的多糖类主要分为酸性杂多糖、中性杂多糖、酸性低聚糖、胞壁多糖和胞外多糖五类[3]。

1972年Ukai等从银耳子实体中分离出3种酸性杂多糖A、B、C。

A和B均为无色片状，C为微带黄色的白色片状。

这3种多糖主要由木糖、葡萄糖醛酸和甘露糖组成，还有少量葡萄糖及微量岩藻糖，其分子中有典型的乙酰基结构[4]。

1976年Tsubaki从银耳的培养液中分离到一种高分子量、高分支的酸性杂多糖，主要由D-甘露糖、D-木糖、岩藻糖、D-葡糖醛酸和O-乙酞基构成[5]。

1978年Ukai等从中国出产的银耳子实体的碱性提取物中分离出中性杂多糖，为无色粉末，分子量约为8000，主要由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖按照2:

4:

5:

35的摩尔比组成[6]。

1978年Ukai等在进一步证明银耳子实体中酸性杂多糖AC,BC结构的过程中，用酸性水解的方法从中分离到3种酸性低聚糖（H-1,H-2和H-3）。

它们的结构分别为:

H-1,O-ß-D-吡喃葡糖醛酸-（1→2）-O-a-D-吡喃甘露糖一（1--3）-0-a-D-吡喃甘露糖-（1→3）-D吡喃甘露糖;H-2,0-（0-D-吡喃葡糖醛酸）一（1→2）-O-a-D吡喃甘露糖-（1→3）-D-吡喃甘露糖;H-3,2-0-（ß-D-吡喃葡糖醛酸）-D-吡喃甘露糖[7]。

1978年Sone等从银耳细胞壁中分离到两种胞壁多糖，主要由D-葡萄糖、D-葡萄糖醛酸、D-甘露糖和D-木糖组成[8]。

1979年，Kakuta等人从银耳细胞深层发酵孢子中分离到主链结构与子实体多糖相似的酸性杂多糖，仅在支链上稍有区别，其主链结构是由a-（1→3）糖苷键连接的甘露聚糖，在主链的2、4、6位上连接有葡萄糖（Glc）、葡萄糖醛酸（G1cA）和木糖等组成的侧链[5-10]。

因此，我们可以认为深层发酵培养的银耳抱子和子实体提取的银耳多糖二者在组分上无明显的区别。

章云津等由福建产银耳子实体提取的银耳多糖由葡萄糖醛酸、甘露糖、木糖及少量岩藻糖、葡萄糖组成，分子量为300000[9]。

顾锤琦等对银耳抱子多糖I进行了研究，确知该多糖由甘露糖、岩藻糖、木糖、少量葡萄糖醛酸和一未知化合物构成，分子量为560000[10]。

2.3银耳多糖的药理作用研究概况及药理作用

研究表明，银耳的多种生理活性的都与其多糖密切相关。

近年来发现，银耳多糖

有免疫增强、抗衰老、抗肿瘤、抗突变、保肝护肝和降血糖降血脂等药理作用，其中

免疫增强及其机制的研究较为深入，其它许多生理活性也建立在免疫增强基础之上。

本文拟就对银耳多糖的药理作用及有关机制的研究进展作一综述。

2.3.1对免疫系统的调节作用

2.3.1.1对免疫器官重量的影响　林志彬等[11]报道,银耳多糖皮下注射100mg/kg对正常小鼠的胸腺及脾脏重量均无显著影响,而腹腔注射200mg/kg可使正常小鼠脾脏重量明显增加。

2.3.1.2对体液免疫功能的影响　银耳多糖100mg/kg可使正常和环磷酰胺处理小鼠经绵羊红细胞（SRBC）免疫所致溶血素生成分别增加9.19%和11.19%[12],表明银耳多糖可增强正常及改善免疫功能低下小鼠的体液免疫功能。

2.3.1.3对细胞免疫功能的影响　银耳多糖（50、100、150及200μg/ml）体外可显著增强正常小鼠经ConA诱导的脾淋巴细胞增殖反应[13]。

当银耳多糖50mg/kg与环磷酰胺、可的松、丝裂霉素C、5-氟脲嘧啶（5-Fu）等合用时,银耳多糖可不同程度地拮抗它们对小鼠网状内皮系统吞噬功能、特异性体液及细胞免疫的抑制作用[14]崔金莺等[15]观察了银耳多糖对正常小鼠脾细胞内游离钙离子浓度的影响,结果表明银耳多糖25～200ug/ml可明显升高脾细胞内钙离子浓度,并与ConA有协同作用。

在细胞外钙浓度为零时,银耳多糖对内钙释放无影响,钙通道阻滞剂维拉帕米（10μg/ml）可阻断银耳多糖升高脾细胞内游离钙离子浓度的作用。

以上提示通过促进外钙内流途径增加脾细胞内游离钙水平可能是银耳多糖发挥免疫调节作用的机制之一。

2.3.1.4对细胞因子的影响　马莉等[16]报道,银耳多糖1～50μg/ml体外不仅能增强正常成年（3月龄）小鼠脾细胞产生IL-2能力,而且还能改善19月龄老年小鼠脾细胞产生IL-2的能力,使之恢复至3月龄小鼠水平。

银耳多糖100μg/ml可增强小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-6、TNF-α的能力。

高其品等[7]从银耳的子实体中分离纯化出三种杂多糖Tla～Tlc,它们由甘露糖（Man）、木糖（Xyl）、葡萄糖（Glc）和葡萄糖醛酸（GlcA）组成,研究表明Tla～Tlc可显著激活人单核细胞,促进其产生大量IL-1、IL-6和TNF。

2.3.2抗衰老作用

银耳多糖能明显降低小鼠心肌组织脂褐质含量，增加小鼠脑和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）的比活力。

SOD可减少自由基在细胞代谢过程中产生的有害物质，减轻自由基对细胞膜的毒害。

银耳多糖还能明显抑制人脑中单胺氧化酶-B（MAO-B）的活性。

脂褐质含量增多，SOD含量减少，MAO-B活性增强都是衰老的标志[17]

薛永志等报道，银耳构祀煎剂（由银耳，构祀，大枣，山植组成）可明显增加小鼠血清中SOD的活力，降低丙二醛（MDA）含量，同时能显著地增强机体的耐受能力和适应环境变化的能力[18]。

林晓明等对比了银耳、获荃、绞股蓝对小鼠免疫机能和清除自由基的作用，发现

银耳、获荃能显著提高脾淋巴细胞体外增殖反应及外周血T细胞酸性a一乙酸蔡醋醋酶（a-ANAE）阳性率。

同时还指出，细胞免疫与机体延缓衰老100%相关，银耳的抗衰老作用与其提高机体免疫功能密切相关[17-18]此外，有人报道口服银耳多糖40d后能明显延长果蝇的平均寿命，为对照M的1.28倍，果蝇脂褐质含量降低23.95%;而银耳抱子多糖对果蝇寿命和脂褐质含量均无明显影响[19]。

姚淑贤介绍银耳浴疗可增白嫩肤，延缓皮肤衰老，头发变白，减少头发脱落[20]。

银耳多糖的抗衰老作用不仅体现在可减少体内老化的代谢产物，还与其增加核酸

和蛋白质的含量，增加肝微粒体P-450含量，促进机体细胞免疫和体液免疫功能等作

用有关[21]。

2.3.3抗肿瘤作用

　　周爱如等[22]报道,银耳多糖100mg/kg可明显抑制小鼠艾氏腹水癌的生长,抑制癌细胞DNA合成,而体外应用时无此作用,提示银耳多糖对癌细胞并无直接抑制或杀伤作用。

进一步研究表明,银耳多糖对癌细胞的抑制作用是通过提高机体免疫功能、增强网状皮系统吞噬功能、促进IFN、TNF等的产生而发挥作用。

此外,银耳多糖还可减轻化疗和放疗的毒副反应,增强疗效,提高癌症患者的生存质量及延长生存期。

在临床上,银耳多糖常与其它药物配伍用于治疗晚期肺癌或作为肝癌手术后用药,效果较好[23]。

因此,银耳多糖是一种较好的“扶正固本”的抗肿瘤辅助治疗药物。

2.3.4降血糖作用

　　姜秀莲等[24]报道,银耳多糖250mg、500mg及1000mg/kg能明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖水平,亦可显著降低高血糖动物及正常动物血糖含量,升高血清胰岛素水平。

在注射四氧嘧啶前4小时口服银耳多糖300mg/kg,小鼠血糖含量明显降低,葡萄糖耐量曲线恢复正常,表明银耳多糖对四氧嘧啶引起的糖尿病具有预防作用,此作用可能与其减少四氧嘧啶对胰岛β-细胞的损伤有关[25]。

姜瑞芝等[14]对银耳多糖的纯化、结构与其降血糖活性进行了研究,经初步分离纯化得到3种多糖（Se1～Se3）。

甲基化分析结果表明,Se1～Se3的结构相似,主链由1→3连接的甘露糖组成,它们均能拮抗肾上腺素引起的小鼠血糖升高,抑制肝糖元分解。

何执中等[26]报道,将银耳多糖作为胰岛素的修饰配基对胰岛素进行化学修饰,观察修饰后的胰岛素对胰岛素降血糖活性影响,结果修饰后的胰岛素可将胰岛素在体内作用时间从通常的3～4小时延长至8～12小时,这一结果为开发胰岛素新的修饰剂来源、探索胰岛素长效化提供了新途径。

2.3.5降血脂作用

　　银耳多糖可明显降低高脂血症大鼠血清游离胆固醇、胆固醇脂、甘油三酯、β-脂蛋白含量,降低高胆固醇血症小鼠总胆固醇含量,并可预防小鼠高胆固醇血症的形[27]。

2.3.6促进蛋白质、核酸合成

　　夏尔宁等[28]通过3H-亮氨酸掺入法观察了银耳多糖对小鼠血清蛋白质生物合成的影响,结果银耳多糖可促进血清蛋白质的生物合成,增强机体抗病能力。

银耳多糖可明显增强人淋巴细胞核糖核酸（RNA）生物合成,但对人淋巴细胞脱氧核糖核酸（DNA）生物合成无影响。

程时等[29]报道,银耳多糖可升高小鼠肝细胞中粗面内质网数目及促进糖元合成。

岳微等[30]用放射同位素标记前体渗入方法观察了银耳多糖对小鼠损伤肝脏修复的影响,结果银耳多糖可明显促进正常小鼠和部分肝切除小鼠的肝脏蛋白质及核酸合成,且银耳多糖可优先促进损伤肝脏的修复。

2.3.7抗凝血、抗血栓作用

申建和等[31]报道,银耳多糖体内、体外应用均有明显抗凝血作用,不同给药途径均显示出较强的抗凝血活性,尤其以口服效果最好。

银耳多糖对凝血酶元时间无影响,但可明显延长部分凝血活酶时间,表明其可能是通过影响内源性凝血系统而发挥抗凝血作用。

贾汉卿等[32]报道,银耳多糖的延凝作用强度与其分子量有关,分子量越低,效应强度越大,平均分子量每减少一半左右,其效应增强4倍。

家兔腹腔注射银耳多糖27.8和41.7mg/kg可明显延长特异性血栓和纤维蛋白血栓的形成时间,缩短血栓长度,降低血小板数目、血小板粘附率和血液粘度,降低血浆纤维蛋白原含量,升高纤溶酶活性,表明银耳多糖具有明显的抗血栓形成作用[33]。

2.3.8抗溃疡作用

　　薛惟建等[34]报道,银耳多糖70mg/kg可明显降低大鼠应激性溃疡的形成165mg/kg可促进醋酸性胃溃疡的愈合,但其对胃酸分泌和胃蛋白酶活性无影响。

2.3.9抗突变作用

　周慧萍等[35]报道,银耳多糖可对抗环磷酰胺引起的小鼠骨髓微核率增加,同时还可防止受照射动物的淋巴细胞染色体发生畸变。

3、综述的目的

20世纪70年代以来，科学家们发现众多多糖及糖复合物参与了细胞的各种生命现象的调节，如免疫细胞间信息的传递和感受，这与细胞表面多糖受体的介导有密切关系。

药理和临床研究表明，许多多糖类化合物具有免疫调节作用，能激活免疫细胞，提高机体抗衰老功能。

到目前为止已发现有100多种中药中的多糖类化合物具有抗衰老促进作用，这类多糖大多没有细胞毒性而且药物质量通过化学手段容易控制，这已经成为当今新药开发的方向之一。

由于多糖结构复杂，即使组成相同的多糖，也可能因其螺旋结构（helixstucture）的不同，具有不同的吸收、分布和活性[36]。

因而，研究银耳多糖的化学结构与其药理作用及作用机制息息相关。

银耳中含有丰富的多糖类物质，其多糖具有广泛的药理作用，但迄今对其主要药理作用机制尚不十分清楚，而且对其各种药理作用之间的内在联系也知之甚少。

根据目前研究结果提示，银耳多糖的抗衰老作用可能与其对机体免疫功能的调节密切相关。

但真的是否通过调节机体免疫功能的平衡而发挥其多种药理学作用，还有待进一步确证。

在我国，银耳资源丰富、价格低廉，而且银耳多糖及银耳抱子多糖的提取工艺简便易行，具有重要的医疗价值和经济意义。

4、综述的思路和内容

4.1　论文关注的理论意义和应用价值

衰老，意味着人生命活力的下降和死亡的临近，是古今中外人们普遍关注和重视的问题。

抗御衰老，提高生命素质，延长自然寿命，几千年以来，一直是人类想往和追求的目标。

本文基于现今关于衰老的最新研究进展，作重关注银耳多糖抗衰老的药用机理，以及衰老与提高免疫力的关系，讨论银耳多糖抗衰老药用指标，为以后开发利用提供详细依据。

4.2论文重点关注的问题

4.2.1银耳多糖提高免疫功能对抗衰老的影响

4.2.2研究银耳多糖抗衰老抗衰老的理论数据

4.2.3为人类利用银耳多糖抗衰老提供全面依据

4.3采用的论文技术路线

题目→查找资料→撰写开题报告－寻问调查－图书资料查阅，网上查阅－整理资料→综述初稿→定稿

5、预期结果和存在问题

5.1预期的结果

通过银耳抗衰老的作用机制的综述，系统的讨论银耳多糖抗衰老与提高免疫的关系，关注银耳多糖抗衰老的作用机理及各种药用指标。

5.2　存在的问题

由于国内外对银耳多糖研究较多较杂，论文叙述起来数据处理较复杂，参考文献的选择较难。

6、论文时间安排

6.1确定题目--------------------------2006年9月上旬

6.2查阅资料--------------------------2006年9月中旬——2006年10中旬

6.3撰写文献综述－寻问调查－图书资料查阅，网上查阅－整理资料---------------------------------------2006年10中旬——2006年12月中旬

6.4综述初稿--------------------------2006年12月中旬——2007年5月上旬

6.5完成论文--------------------------2007年5月——2007年6月

7、经费预算

寻问调查

图书资料查阅，网上查阅

整理资料

200.00

400.00

100.00

8、参考文献

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中兽医医药杂志，1993,（3）:

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中国农业出版社，2000.1~187

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北京：

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[20]　陈锡林,陈孔荣，抗癌菌类药常用种类及近代研究简介1浙江中医学院学报,1987;11

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[22]　周慧萍,陈琼华,王淑如，黑木耳多糖和银耳多糖的抗衰老作用1中国药科大学学报,1989;20（5）∶303～306

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[24]　薛惟建,鞠　彪,王淑如等，银耳多糖和木耳多糖对四氧嘧啶糖尿病小鼠高血糖的防治作用1中国药科大学学报,1989;20（3）∶81

[25]　姜瑞芝,高其品，银耳多糖的纯化、结构与其降血糖活性部位的研究1长白山中医药研究与开发,1995;4

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[27]　申建和,陈琼华，木耳多糖、银耳多糖和银耳饱子多糖的降血脂作用1中国药科大学学报,1989;20（6）∶344

[28]　夏尔宁,陈琼华，黑木耳、银耳、银耳饱子多糖对血清蛋白生物合成的影响1南京药学院学报,1985;16（3）∶49

[29]　程　时,黄　静,王之湄,等，银耳多糖TP对小鼠肝细胞超微结构影响的定量电镜观察1北京医学院学报,1984;16（3）∶208

[30]　岳　微,丛　静，银耳多糖对小鼠正常胀和受伤肝蛋白质合成及糖原合成的影响1中国药理院学报,1986;7（4）∶364

[31]　申建和,陈琼华，黑木耳多糖、银耳多糖、银耳饱子多糖的抗凝血作用1中国药科大学学报,1987;18

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[32]　贾汉卿,安英林,郑淑芹，银耳多糖延凝作用的强度与分子量的关系1佳木斯医学院学报,1990;13

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[33]　申建和,陈琼华，木耳多糖、银耳多糖和银耳饱子多糖对实验性血栓形成的影响1中国药科大学学报,1990;21

（1）∶39

[34]　薛惟建,王淑如,陈琼华，银耳多糖、银耳饱子多糖及黑木耳多糖的抗溃疡作用1中国药科大学学报,1987;18

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252~255

时间：

2021.02.05

创作：

欧阳科