医院检验科门诊常规检查作业指导书.docx
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医院检验科门诊常规检查作业指导书
作
业
指
导
书
如皋三院医院检验科
目录
采集末梢血（MYCH/DL-5-SC-01）------------------------------------------------1
采集静脉血（MYCH/DL-5-SC-02）------------------------------------------------2
尿沉渣检查（MYCH/DL-5-SC-03）------------------------------------------------5
尿液化学成份检查（MYCH/DL-5-SC-04）-----------------------------------------10
粪便常规（MYCH/DL-5-SC-05）-------------------------------------------------14
粪便隐血试验（MYCH/DL-5-SC-06）---------------------------------------------16
尿液蛋白定性（磺柳酸法）（MYCH/DL-5-SC-07）-----------------------------------19
尿液蛋白定性（加热醋酸法）（MYCH/DL-5-SC-08）---------------------------------20
尿本周氏蛋白定性（MYCH/DL-5-SC-09）-----------------------------------------22
尿液HCG定性（MYCH/DL-5-SC-10）---------------------------------------------24
RBC（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-11）----------------------------------------------25
Hb（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-12）-----------------------------------------------29
MCV（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-13）----------------------------------------------33
MCH（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-14）----------------------------------------------34
MCHC（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-15）---------------------------------------------36
RDW（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-16）----------------------------------------------37
WBC（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-17）----------------------------------------------39
WBC分类（三分群）（MYCH/DL-5-SC-18）-----------------------------------------43
ABO血型鉴定（MYCH/DL-5-SC-19）---------------------------------------------46
PLT（仪器法）（MYCH/DL-5-SC-20）----------------------------------------------49
脑脊液常规（MYCH/DL-5-SC-21）-----------------------------------------------51
浆膜腔积液常规（MYCH/DL-5-SC-22）-------------------------------------------55
阴道分泌物常规（MYCH/DL-5-SC-23）-------------------------------------------57
前列腺常规（MYCH/DL-5-SC-24）-----------------------------------------------59
WBC（手工法）（MYCH/DL-5-SC-25）----------------------------------------------60
PLT（手工法）（MYCH/DL-5-SC-26）----------------------------------------------62
幽门螺杆菌抗体检测（MYCH/DL-5-SC-27）---------------------------------------64
精液常规（MYCH/DL-5-SC-28）-------------------------------------------------68
采集末梢血
1．采集部位：
受检者中指或无名指指尖腹内侧，婴、幼儿可采集拇指、脚趾或脚跟内、外侧缘，采集部位的皮肤应该完整，不能有烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症。
2．采集方法：
轻轻按摩采集部位，使采集部位自然充血。
将皮肤消毒液均匀喷洒于采集部位，1-3分钟后，左手拇指和食指固定采集部位，右手持一次性消毒采血针，自指尖腹内侧迅速刺入，立即拔出采血针。
血液自然流出后，用消毒纸巾擦去第一滴血液，血液自然流出（不能自然流出时，在采集部位两侧轻轻挤压）并成滴，用一次性微量吸管采集约30μl血液（检查项目增加，采集血液量增加）。
血液采集完成后，用消毒纸巾压住穿刺部位，嘱咐受检者按压约10分钟。
用将20μl刻度线以外的血液加到干净玻片上用于制作血液涂片，用干净纸巾沿一次性微量吸管管口方向擦净管外，将吸管插入盛有稀释液的离心管底部，慢慢排出管内血液，用上层液体洗净管内余血，盖紧管盖，轻轻颠倒混匀。
3．血液涂片的制作：
取血液一滴于载玻片右端，左手持载玻片，右手持推玻片，从血滴前方向后移动，接触血滴，使其沿推玻片下缘散开，推玻片与载玻片保持约30°平面夹角，以平稳的速度将血液向前推进。
血液在载玻片上形成一舌形；厚薄均匀；边缘整齐；头、体、尾明显的血膜。
4．血液涂片的染色
4．1瑞特-吉姆萨染色原理：
酸性染料伊红与细胞中的碱性物质（血红蛋白、嗜酸性颗粒）结合，使其染成红色；碱性染料美蓝或天青与细胞中的酸性物质（核染色质、嗜碱性颗粒、血小板、富含核蛋白的细胞质）结合，使其染成蓝色；中性物质（白细胞核染色质、中性粒细胞颗粒、血小板颗粒区）被染成紫色。
4．2染色试剂：
I液：
瑞特染料、吉姆萨染料、甲醇。
II液：
磷酸盐缓冲液：
pH6.4-6.8
4．3染色方法
4．3．1在干燥血膜的两端化线，防止染液外溢。
4．3．2在干燥血膜上滴加I液数滴，覆盖整个血膜，静置1-2分钟。
4．3．3加II液（约为I液的2倍），混匀后静置5-6分钟。
4．3．4平持血片用流水缓缓冲洗干净，干燥后备用。
5．参考文献
朱立华，主编.临床基础检验学实验指导.北京：
人民卫生出版社，1999，第1版。
寇丽筠，主编.临床基础检验学.北京：
人民卫生出版社，2001，第2版。
采集静脉血
1．准备采血器具
1．1双向采血针：
打开采血针包装，旋下采血针白色盖子，将采血针套进采血器并旋紧，备用。
1．2一次性注射器：
打开一次性注射器包装，不要取下无菌针帽，左手持针头下座，右手持针管，将针头与针管旋紧，使针头斜面对准针管刻度，检查针管有无破损，备用。
2．选择静脉：
受检者取坐位，前臂水平伸直置于枕垫上。
暴露穿刺部位，让受检者穿刺部位上端衣袖保持宽松，选择容易固定，明显可见的肘前静脉。
肘部静脉不明显时，可以用手背静脉或内踝静脉，婴、幼儿可于颈外静脉采血。
3．消毒：
将皮肤消毒液距离穿刺部位皮肤表面5cm处均匀喷雾，喷洒面积不小于3cm2。
4．扎压脉带：
在采血部位之上扎压脉带（不能污染消毒部位），嘱受检者握紧拳头，让静脉充盈暴露。
最好不使用压脉带，非使用不可时，压脉带扎压时间不能过长，穿刺成功后，马上松开压脉带，扎压时间最好不超过半分钟。
5．穿刺采血
5．1一次性注射器穿刺采血：
取下针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和中指持注射器针筒，食指固定针头下座，针头斜面和针筒刻度向上，沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤，然后成5°角向前刺破静脉壁进入静脉腔。
见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针钭滑出，但不可用力深刺，以免穿破静脉造成血肿。
以右手固定注射器，左手松开压脉带，缓缓抽动注射器内芯至所需血量。
5．2双向采血针穿刺采血：
取下针头无菌帽，以左手拇指固定静脉穿刺部位下端，右手拇指和中指持采血器，食指固定针头下座，针头斜面和针筒刻度向上，沿静脉走向使针头与皮肤成30°角斜行快速刺入皮肤，然后成5°角向前刺破静脉壁进入静脉腔。
见回血后，将针头顺势深入少许，以免采血时针钭滑出，但不可用力深刺，以免穿破静脉造成血肿。
以左手固定采血器，右手持真空采血管，将采血针后端针头刺入采血管帽盖，采血管内的真空被破坏，血液流入采血管内，根据需要采足所需血液。
6．止血：
采足所需血液后，嘱受检者松开拳头，用消毒棉签压住穿刺孔，拔出针头，嘱受检者继续按压10-15分钟。
7．放血和混匀：
用注射器采集血液时，拔下针头，取下采血管帽盖，破坏真空，根据要求量将血液注入采血管内，盖紧帽盖，轻轻颠倒4-6次；用双向采血针采集血液时，采足所需血液后，拔出采血管，轻轻颠倒4-6次。
8．注意事项
8．1尽量选择明显暴露静脉穿刺。
当静脉暴露不明显时，可以用左手食指经消毒液消毒后，在受检者采血部位触摸，发现静脉走向后凭借手感的方向与深度进行试探性穿刺。
8．2用一次性注射器采血时，切忌将注射器回推，以免注射器中的空气进入血管形成空气栓塞，造成严重后果。
8．3采血时，若遇受检者发生晕针，应立即拔出针头，让其平卧，休息片刻可以恢复。
发生严重情况时，应立即启动紧急预案。
9．参考文献
朱立华，主编.临床基础检验学实验指导.北京：
人民卫生出版社，1999，第1版。
寇丽筠，主编.临床基础检验学.北京：
人民卫生出版社，2001，第2版。
尿沉渣检查（仪器法）
1．实验原理
UF-50运用了流式细胞和电阻抗的原理。
尿液被稀释和染色后，靠液压作用通过鞘液流动池。
当反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时，它被一种无粒子颗粒的鞘液包围。
然后，每个细胞以单个纵列的形式通过流动池中心（竖直）轴线，在这儿每个尿液细胞将被氩激光光束照射。
每个细胞有不同程度的荧光强度（F1），从染色尿液细胞发出的荧光主要反映细胞的定量特性（如细胞膜、核膜、线粒体、核酸）、散射光强度（测定的是前向角散射光，Fsc，它成比例地反映细胞的大小）和电阻抗的大小（电阻抗电信号主要与细胞的体积成正比）。
仪器正是将这种荧光、散射光和电阻抗的信号转化为电信号，分析这些电信号，才能使得每个尿液标本产生直方图和散射图，然后分析这些图形，即可区分每个细胞并得出每个细胞的形态。
UF-50可定量检测RBC、WBC、管型、上皮细胞、和细菌，还能标记出病理管型、小圆上皮细胞、结晶、酵母细胞、精子、其它、红细胞信息，还可测定总计数和电导率等。
2．样本采集
实验室工作人员必须对病人留取尿液进行正确指导。
建议受检者使用实验室提供的专用样本容器。
不推荐受检者使用自己准备的样本容器，非使用不可时，实验室人员应将样本容器的要求告知受检者。
晨尿：
清晨起床后第一次尿，为较浓缩和酸化的样本，血细胞、上皮细胞及管型等有形成分相对集中且保存较好，便于比较，适于可疑或已知泌尿系统疾病的动态观察和早孕试验。
随机尿：
留取任何时间的尿液，易受饮食、运动、药物等的影响，可致低浓度或病理临界浓度的物质和有形成分漏检，也可出现饮食性糖尿或药物的干扰。
餐后尿：
午餐后2小时留取的尿液，该样本对病理性糖尿和蛋白尿的检出更为敏感。
无论留取任何尿液样本，务必使尿道口保持清洁。
必须有足够的送检尿量（10ml以上）。
3．样本的运送
留取的样本应该在2小时内完成检验，如果样本收集后2小时内无法完成分析，可置2-8℃冷藏，6小时内完成检验；如仅做尿沉渣检查，可在样本中加适量防腐剂（400g/L甲醛溶液，每升尿液加入5ml。
应注意甲醛过量时可与尿素产生沉淀物，干扰显微镜检查）。
4．样本的接收
在接受样本时,实验室工作人员应该检查以下内容:
样本容器是否符合要求；留取样本的时间是否过长；样本是否被污染；样本量是否足够（不少于10ml），在特殊病例不可能达到此要求时如婴幼儿、烧伤、肾衰无尿期等，这些情况应在检验报告单上注明收到的样本量。
5．实验材料
5.1采用Sysmex公司配套试剂。
5.1.1试剂组成：
UF-50专用稀释液（URINOPACK）、清洁剂、鞘液、UF-50专用染液（URINOSEARCH）
5.1.2贮存条件及稳定性：
清洁剂密闭避光保存可稳定半年。
UF-50专用稀释液密闭避光贮存可稳定10个月。
UF-50专用染液密闭避光贮存可稳定8个月。
鞘液密闭避光贮存可稳定12个月
5.2校准品：
由Sysmex公司提供。
质控品：
由Sysmex公司提供，2-8℃密闭避光保存可稳定12个月。
6．仪器设备
6.1仪器
6.1.1仪器名称：
Sysmex尿沉渣分析仪
6.12仪器厂家：
Sysmex公司
6.1.3仪器型号：
SysmexUF-50
6.1.4仪器校准程序：
由厂家提供的校准，具体由厂家工程师操作，满足相关标准。
7．操作步骤
7.1见SysmexUF-50尿沉渣分析仪操作维护规程（编号：
MYCH/DL-5-PM-05）
7.2分析流程：
见图1。
8．结果判断与分析：
UF-50提示REVIEW、UF-50结果与尿干化学结果不相符，均应做显微镜检查。
9．计算方式：
仪器自动计算。
10．参考值范围
白细胞（WBC）：
0-25个/ul
红细胞（RBC）：
0-25个/ul
小圆上皮细胞（SRC）：
0-3个/ul
细菌（BACT）：
0-8000个/ul
管型（CAST）：
0-2个/ul
病理管型（PathCAST）：
0-1个/ul
上皮细胞（EC）：
0-20个/ul
精子（SPERM）：
0-3个/ul
电导率（CONDCT）：
19.8-42.5Ms/cm
结晶（XˊTAL）：
0-15个/ul
类酵母细胞（YLC）：
0-10个/ul
总粒子数（Total）：
0-40000个/ul
11．质量控制：
作标本时同时测定质控品，以2S为警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断分析是否在控。
12．临床意义
12.1红细胞增加，主要见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤、泌尿系血管畸形和出血性疾病等。
利用红细胞信息可了解红细胞形态从而鉴别血尿来源。
12.2白细胞增加，见于泌尿系统感染、结石、结核和肿瘤。
泌尿系感染疾病的尿中往往同时存在白细胞和细菌，因此，检查尿液中白细胞和细菌的存在是诊断泌尿系感染的重要指标。
12.3上皮细胞：
正常尿液中可见少量上皮细胞主要是鳞状上皮细胞和移行上皮细胞；如数量增多，且可见小圆上皮细胞，提示泌尿道有炎症或肾实质损害。
12.4管型：
透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾或循环功能改变时，尿内可有少量透明管型；在肾实质性病变如肾小球肾炎时，可见较多的颗粒管型。
红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。
颗粒管型的出现，提示肾单位有淤滞的现象。
脂肪管型的出现，见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。
在慢性肾功能不全时，尿内出现肾衰竭管型，提示预后不良。
蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变，见于慢性肾小球肾炎的晚期和肾淀粉样变时。
12.5细菌：
主要用于泌尿系细菌感染的诊断。
12.6导电率：
对糖尿病、尿崩症的鉴别诊断、治疗具有十分重要的意义；通过对尿导电率的高低监控，可以预防某些结石疾病的发生，有利于结石疾病的治疗。
13．参考文献
13.1叶应妩、王毓三，等，全国临床检验操作规程，东南大学出版社，第二版，1997,133
13.2丛玉隆，王淑娟，等，今日临床检验学，中国科学技术出版社，第一版，1997，267-275
13.3寇丽筠，主编.临床基础检验学.北京：
人民卫生出版社，2001，第2版。
尿液化学成份测定（试带法）
1．实验原理
1.1空白（校正块）：
尿液在试纸上分布的状态和尿液本身的颜色，一般都会给测定结果带来误差，设空白块就是为了排除这些产生误差的因素，各个项目都使用同一块空白块。
1.2pH：
通过pH指示剂（甲基红与溴麝香草酚蓝适量配合）测定4.5-9的范围的pH值，正常人的新鲜尿液pH值在5-7之间。
1.3亚硝酸盐（NIT）：
反应依赖于尿中革兰氏阴性菌把硝酸盐还原成亚硝酸盐，亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物，重氮化合物再与萘基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色。
1.4葡萄糖（GLU）：
根据葡萄糖氧化酶反应原理，葡萄糖氧化酶特异性氧化β-D-葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，是指示剂氧化而呈现蓝色。
1.5蛋白质（PRO）：
根据指示剂蛋白误差法原理，蛋白质与染料结合形成复合物产生色变，特别是对白蛋白的反应比对球蛋白、血红蛋白、本-周氏蛋白和粘蛋白更为灵敏。
1.6隐血（BLD）：
根据血红蛋白接触活性法原理，通过血红蛋白的类过氧化物酶样作用催化分解过氧化物，使邻联甲苯胺氧化呈色。
1.7尿比重（SG）：
利用多聚电解质方法，尿中电解质与聚电解质发生离子交换的原理。
阳离子存在时，多聚物氢离子通过交换释出，使溴百里酚蓝指示剂发生颜色变化，颜色有蓝经过蓝绿最后变成黄色。
1.8胆红素（BIL）：
根据偶氮偶合法的原理，2，4-二氯苯胺重氮盐与胆红素进行特异性反应，并与胆红素的浓度相对应产生的颜色。
1.9尿胆原（URO）：
根据偶氮结合法的原理，尿胆原在强酸条件下和重氮盐偶联形成胭脂红色素。
1.10酮体（KET）：
根据硝普酸钠法原理，硝普酸钠和酮体在碱性条件下相互作用而呈现紫色，特别是乙酰乙酸对此特别灵敏。
1.11白细胞（WBC）：
粒细胞胞浆内含有酯酶，这种酶能水解一种3—羟基吡咯酯类底物，释放出酚从而与重氮试剂反应生成紫红色化合物。
1.12维生素C（Vc）：
根据Tillman’Reagent原理，Vc将染料有蓝色还原成红色。
本项目的测定目的是为了给使用者提供样本中Vc的含量以判断其可能存在的干扰。
2．样本采集、运送、接收:
同尿沉渣检查（编号：
MYCH/DL-5-SC-03）
3．实验材料
3.1试剂：
采用桂林市医疗电子仪器厂生产的优利特UritestA11A尿试纸条。
2℃-10℃或30℃以下干燥阴凉处保存，可稳定12个月。
3.2校准品：
由桂林市医疗电子仪器厂提供。
3.3质控品：
由长春迪瑞实业有限公司提供，2-8℃保存可稳定12个月。
4．仪器设备：
优利特Uritest-200B尿液分析仪。
由厂家提供的校准，具体由厂家工程师操作，满足相关标准。
5．操作步骤：
见优利特Uritest-200B尿液分析仪操作维护规程（文件编号：
MYCH/DL-5-PM-04）
6．结果的判断与分析：
（不适用）
7．质量控制：
作标本时同时测定质控品，以在质控品结果允许范围内为在控。
8．参考值范围：
pH：
5.0-7.0NIT：
阴性GLU：
阴性PRO：
阴性
BLD：
阴性KET：
阴性BIL：
阴性URO：
阴性或弱阳性WBC：
阴性SG：
1.015-1.025
9．临床意义：
9.1pH降低：
酸中毒、慢性肾小球肾炎、痛风、糖尿病等排酸增加；呼吸性酸中毒，因CO2潴留，尿多呈酸性。
9.2pH升高：
频繁呕吐丢失胃酸、服用重碳酸盐、尿路感染、换气过度及丢失CO2过多的呼吸性碱中毒，尿呈碱性。
9.3比重增高：
尿少时，比重可增高，见于急性肾炎、高热、心功能不全、脱水等；尿量增多同时比重增加，常见于糖尿病。
9.4比重降低：
慢性肾小球肾炎、肾功能不全、尿崩症等。
9.5蛋白阳性：
分为功能性、体位性、病理性蛋白尿；病理性蛋白尿见于肾炎、肾病综合征等。
9.6尿糖阳性：
见于糖尿病、肾性糖尿病、甲状腺机能亢进等。
内服或注射大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。
9.7酮体阳性：
严重未治疗的糖尿病酸中毒患者可呈强阳性反应。
妊娠呕吐、长期饥饿、营养不良、剧烈运动后也可呈阳性反应。
9.8胆红素阳性：
肝实质性及阻塞性黄疸时，均可呈阳性反应。
9.9尿胆原阳性：
溶血性疾患及肝实质性病变如肝炎时为阳性。
9.10隐血阳性：
见于各种引起血管内溶血的疾病；血型不合引起急性溶血、阵发性寒冷性或睡眠性Hb尿症；重度烧伤、毒蕈中毒、毒蛇咬伤；自身免疫性溶血性贫血、SLE等。
9.11NIT阳性：
提示有大肠埃希菌感染。
9.12白细胞阳性：
同尿沉渣检查（编号：
MYCH/DL-3-SC-13）
10．方法的局限性：
尿蛋白假阳性用10%磺柳酸确证，尿WBC假阳性用镜检确证。
11．参考文献
11.1叶应妩，王毓三，等，全国临床检验操作规程，第二版，东南大学出版社，1997，118-131
11.2寇丽筠，主编.临床基础检验学.北京：
人民卫生出版社，2001，第2版。
粪便检查
1．一般性状检查
1.1颜色
根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。
正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。
灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疸、胆汁减少或缺乏。
绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。
红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。
柏油样便见于上消化道出血等。
酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。
米泔水样见于霍乱。
1.2性状
报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化实物等。
正常时为有形软便。
便秘时可见球形硬便。
粘液稀便见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。
粘液脓性血便多见于细菌痢疾。
酱色粘液（可带脓）便多见于阿米巴痢疾。
稀汁样便可见于急性肠胃炎，大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。
米泔样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱、副霍乱等。
扁平带状便：
可能因直肠或肛门匣窄所致。
1.3寄生虫虫体：
蛔虫、饶虫，绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辨。
钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。
服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。
驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。
2．粪便的显微镜检查
2.1直接涂片镜检
2.1.1操作步骤
2.1.1.1洁净玻片上加等渗盐水1~2滴，选择粪便的不正常部分，或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。
2.1.1.2最好取大玻片，制成涂片后，应覆以盖片。
涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。
2.1.1.3在涂片中如发现疑似包囊，则在该涂片上加一滴碘液，在高倍镜下仔细鉴别，如仍不能决定时，可取全量粪便浓缩法检查。
2.1.2虫卵的报告方式：
未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。
2.1.3注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并注意有肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。
若大量出现，则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。
2.1.3细胞中应注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞（直接涂片干后用瑞氏染色）、上皮细胞、巨噬细胞等。
2.1.4夏科—雷登（Charcot-Leyden）结晶：
为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小不一。
常见于肠道溃烂，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。
过敏性腹泻及钩虫病患者粪便中
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