衡水中学届高三生物三轮限时培优练基因工程.docx
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衡水中学届高三生物三轮限时培优练基因工程
衡水中学2021届高三生物三轮限时培优练基因工程
1.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，以便于重组和筛选。
已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—；限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。
据图判断，下列操作正确的是（）
A.质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
B.质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
C.目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
D.目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
2.作为基因工程的运输工具——运载体，必须具备的条件及理由是（）
A.能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因
B.具有多个限制酶切位点，以便于目的基因的表达
C.具有某些标记基因，以使目的基因能够准确定位与其结合
D.宿主细胞对其无伤害，以使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存
3.下列物质中不具有特异性识别作用的是（ ）
A.糖蛋白 B.抗体
C.质粒 D.限制性核酸内切酶
4.基因工程技术也被称为重组DNA技术，其实施必须具备的条件是（）
A.目的基因、DNA酶、载体、受体细胞
B.重组DNA、RNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶
C.模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞
D.工具酶、目的基因、载体、受体细胞
5.基因工程中因受体细胞不同，目的基因导入的方法也不同，下列叙述不正确的是（）
A.将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法
B.将目的基因导入老鼠细胞内常用显微注射法
C.将目的基因导入大肠杆菌细胞内常用显微注射法
D.将目的基因导入烟草细胞内常用农杆菌转化法
6.下列哪一种方法不能用于检测目的基因是否成功导入或表达（）
A.在显微镜下直接观察受体细胞中是否含有目的基因
B.通过PCR等技术检测受体细胞的DNA分子上是否含有目的基因
C.提取受体细胞合成的相应蛋白质，利用抗原—抗体特异性反应进行检测
D.抗虫基因导入植物细胞后，检测植物是否具有抗虫特性
7.下列关于基因工程的基本工具的说法中，正确的是（）
A.DNA连接酶只能连接双链DNA片段互补的黏性末端，连接效率不同
B.限制酶可从原核细胞中提取，只能用于切割目的基因
C.质粒是基因工程中最常用的载体，某些病毒也可以作为载体
D.质粒要具有标记基因，有且只有一个限制酶切点，以便得到与外源基因相同的黏性末端
8.如图表示细胞膜上乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因的克隆技术操作过程，下列相关分析中正确的是（）
A.获得该mRNA的最佳材料是受精卵
B.构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌
C.完成过程①②必不可少的酶分别是逆转录酶、DNA聚合酶
D.探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌，获得未被感染的细菌
9.腺苷酸脱氨酶（ADA）基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：
取出患者的白细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些白细胞注射入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。
下列有关叙述正确的是（）
A.正常ADA基因替换了患者的缺陷基因
B.正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能
C.白细胞需在体外培养成具无限增殖能力后再注射入患者体内
D.ADA基因缺陷症属于获得性免疫缺陷病
10.下列有关动物基因工程的说法，错误的是（）
A.将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速度
B.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低
C.利用基因工程得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题
D.用转基因动物作为器官移植的供体时，由于导入的是调节因子，而不是目的基因，所以无法抑制供体细胞抗原物质的合成
11.番茄营养丰富,是人们喜爱的蔬菜。
普通番茄细胞中含有多聚半乳糖醛酸酶的控制基因,控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶,该酶能破坏细胞壁,使番茄软化,不耐贮藏。
科学家通过基因工程将一种抗多聚半乳糖醛酸酶的基因导入番茄细胞,获得了抗软化番茄。
下列关于培育抗软化番茄的叙述,错误的是（）
A.运载工具是质粒
B.受体细胞是番茄细胞
C.目的基因为多聚半乳糖醛酸酶基因
D.目的基因的表达延缓了细胞的软化
12.《人类基因治疗》报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。
基因治疗是指（）
A.把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
B.对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C.运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常
D.运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
13.下列关于基因工程应用的叙述,正确的是（ ）
A.基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因
B.基因诊断的基本原理是DNA分子杂交
C.一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D.利用基因工程生产乙肝疫苗时,目的基因存在于人体B淋巴细胞的DNA中
14.下列关于转基因生物与环境安全的叙述错误的是（ ）
A.重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染
B.转基因生物所带来的环境安全问题在今后有可能得到解决
C.如果转基因植物的花粉中有毒蛋白或过敏蛋白,可能会通过食物链传递到人体内
D.种植抗虫棉可以减少农药的使用量,对环境没有任何负面影响
15.下列有关PCR技术的叙述,错误的是（ ）
A.PCR技术利用了DNA的热变性来控制DNA的解聚与结合,不需要解旋酶
B.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从引物的3′端延伸DNA链
C.PCR的引物的基本单位是一定脱氧核苷酸
D.扩增DNA时,需要加入两种引物
16.科学家将含人的α—胰蛋白酶基因的DNA片段，注射到羊的受精卵中，该受精卵发育的羊能分泌含α一抗胰蛋白质的奶。
这一过程没有涉及（）
A.DNA以其一条链为模板合成RNAB.DNA按照碱基互补配对原则自我复制
C.RNA以自身为模板自我复制D.按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质
17.以下为形成cDNA过程和PCR扩增过程示意图。
据图分析，下列说法正确的是（）
A.催化①过程的酶是RNA聚合酶
B.④过程发生的变化是引物与单链DNA结合
C.催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温
D.对同一目的基因，通过cDNA过程获得和PCR过程获得的目的基因结构完全相同
18.科学家采用基因工程技术将矮牵牛中控制蓝色色素合成的基因
转移到玫瑰中,以培育蓝玫瑰,下列操作正确的是（ ）
A.利用
分子杂交技术从矮牵牛的基因文库中获取基因
B.用氯化钙处理玫瑰叶肉细胞,使其处于感受态
C.用含四环素的培养基筛选转基因玫瑰细胞
D.将基因
导入玫瑰细胞液泡中,
防止其经花粉进入野生玫瑰
19.为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1）,拟将其与质粒（图2）重组,再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是（ ）
A.用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
下列有关基因工程中限制性核酸内切酶的描述，错误的是
A 一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列
B 限制性核酸内切酶的活性受温度的影响
C 限制性核酸内切酶能在识别序列内的任意位点切割
D 限制性核酸内切酶可从原核生物中提取
21.科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,并以质粒为载体,采用转基因方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品种.下列有关说法正确的是（ ）
A.质粒是最常用的运载体之一,它仅存在于原核细胞中
B.将抗枯萎病基因连接到质粒上,用到的工具酶仅有DNA连接酶
C.用叶肉细胞作为受体细胞培育出的植株不能表现出抗枯萎病性状
D.通过该方法获得的抗枯萎病金茶花产生的配子不一定含抗枯萎病基因
22.科学家为提高玉米中赖氨酸含量,计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二竣酸合成酶中104位的氨基酸由天冬氨酸变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍。
下列对蛋白质的改造,操作正确的是（ ）
A.直接改造蛋白质的空间结构
B.直接对相应的基因进行改造
C.直接对氨基酸序列进行改造
D.直接改造相应的
23.已知生物体内有一种蛋白质（P），该蛋白质是一种转运蛋白，由305个氨基酸组成。
如果将P分子中第158位的丝氨酸变成亮氨酸，第240位的谷氨酰胺变成苯丙氨酸，改变后的蛋白质（P1）不但保留了P的功能，而且具有了酶的催化活性。
回答下列问题：
（1）从上述资料可知，若改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的_________进行改造。
（2）以P基因序列为基础，获得P1基因的途径有修饰_________基因或合成_________基因，所获得的基因表达时是遵循中心法则的，中心法则的全部内容包括_________的复制以及遗传信息在不同分子之间的流动。
（3）蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过_________和_________，进而确定相应的脱氧核苷酸序列，据此获得基因，再经表达、纯化获得蛋白质，之后还需要对蛋白质的生物_________进行鉴定。
胰岛素可以用于治疗糖尿病,但是胰岛素被注射人人体后,会堆积在皮下,要经过较长时间才能进入血液,而进入血液的胰岛素又容易分解,因此治疗效果受到影响。
下图是用蛋白质工程设计的速效胰岛素的生产过程,请据图回答有关问题。
（1）构建新的蛋白质模型是蛋白质工程的关键,图中构建新的胰岛素模型的主要依据是________。
（2）图解中从新的胰岛素模型到新的胰岛素基因的基本思路是什么?
_____________。
（3）新的胰岛素基因与运载体（质粒）结合过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶。
已知限制性内切酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-。
请画出质粒被限制性内切酶I切割后所形成的黏性末端___________。
DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列是否有专一性要求?
____________。
（4）若将含有新的胰岛素基因的表达载体导入植物细胞中,最常用的有效做法是____________。
（5）若要利用大肠杆菌速效生产胰岛素,需用到的生物工程有____________、___________和发酵工程。
25.白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。
由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感且杀死害虫的能力较强,科研人员对其进行基因工程改造,流程如图所示。
请冋答有关问题:
（1）.苏云金芽孢杆菌产生的毒蛋白,能有效杀死害虫。
已知该基因的全部序列,科研人员可通过__________法和PCR技术获得大量毒蛋白基因片段。
据图分析,将毒蛋白基因和质粒连接获得重组质粒1的过程需要用到的工具酶有__________。
（2）.用XbaⅠ处理重组质粒1和Bar基因（草丁膦抗性基因）,得到酶切片段。
重组质粒1的酶切片段再用去磷酸化酶处理,使末端游离的磷酸基脱离,目的是防止__________。
将未用去磷酸化酶处理的Bar基因与重组质粒1连接,获得重组质粒2获得的重组质粒2是下图中的__________。
（3）.将重组质粒2与感受态的白僵菌菌液混合进行转化,重组质粒2在白僵菌细胞内被修复一段时间后用含有__________培的养基进行筛选,获得含有如Bar基因的重组白僵菌。
（4）.科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的__________,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
2,4-D作为除草剂在农田中大量使用，研究认为它是某种淋巴癌的致病因子。
为降低2,4-D的危害，科研人员通过基因工程技术构建了能高效降解2,4-D的基因工程菌。
请回答：
（1）在农业生产上常会使用 浓度2,4-D进行麦田除草，在杀死杂草的同时却不会对小麦生长造成损害，原因是 。
（2）从被2,4-D污染的土壤中得到能降解2,4-D的细菌，从该菌提取RNA，构建 文库，进一步获得目的基因。
（3）PCR技术扩增目的基因的过程是：
目的基因DNA受热变性后解链为单链，引物与单链相应互补序列结合，然后在 酶作用下进行延伸，如此重复循环多次，使目的基因的量呈 形式扩增。
（4）一个基因表达载体的组成中要有标记基因，标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中 。
欲知基因工程成功与否，需要进行 水平的检测，有时还需进行 水平的鉴定。
参考答案
1.答案：
A
解析：
由题干信息可知，限制酶Ⅰ能切割—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ不仅能切割—↓GATC—，也能切割—G↓GATCC—。
据题图可知，目的基因两端都有限制酶Ⅱ的识别序列（切点是—↓GATC—），可见只有用限制酶Ⅱ才能将目的基因切割下来。
质粒上GeneⅠ和GeneⅡ表示两种标记基因，分别能被限制酶Ⅱ识别并切割和被限制酶Ⅰ、Ⅱ识别并切割。
如果用限制酶Ⅱ切割，则GeneⅠ和GeneⅡ都被破坏，造成重组质粒无标记基因；如果用限制酶Ⅰ切割，则会破坏GeneⅡ，保留GeneⅠ，且其产生的黏性末端和切割目的基因后的黏性末端相同，故可以连接形成重组DNA，A正确。
2.答案：
A
解析：
A、作为运载体必须具备的条件之一是能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因，A正确；
B、作为运载体必须具备的条件之一是具有一个或多个限制酶切点，以便目的基因能够与之结合，B错误；
C、作为运载体必须具备的条件之一是具有某些标记基因，以便于重组后进行重组DNA的筛选，C错误；
D、运载体对宿主细胞无伤害，以使目的基因在宿主细胞中复制并稳定保存，D错误。
故选：
A。
3.答案：
C
解析：
糖蛋白分布在细胞膜的外表面，具有识别能力，参与细胞间的信息交流；抗体能与抗原发生特异性结合；质粒是双链环状DNA分子，不具有特异性，但可用作基因工程的运载体；酶具有特异性，一种酶只能催化一种或一类化学反应．
解：
A、糖蛋白具有特异性识别功能，能参与细胞间的信息交流，故A正确；
B、抗体具有识别功能，能与抗原特异性结合形成沉淀或细胞集团，故B正确；
C、质粒是双链环状DNA分子，不具有特异性识别能力，故C错误；
D、限制酶具有特异性识别能力，能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，故D正确．
故选C．
点评：
本题考查糖蛋白、抗体、质粒和限制酶的特性，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确的解释和得出正确的结论．
4.答案：
D
解析：
重组DNA技术至少需要三种工具：
限制性内切核酸酶（限制酶）、DNA连接酶、载体。
其中限制酶和DNA连接酶是构建基因表达载体所需要的两种工具酶；将目的基因导入受体细胞时需要载体，可见目的基因和受体细胞也是基因工程实施的必备条件。
5.答案：
C
解析：
将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法，如抗虫棉的培育，A正确；显微注射法是将目的基因导入动物细胞最有效的方法，B正确；将目的基因导入大肠杆菌细胞常用的是感受态细胞转化法，C错误；在自然条件下，农杆菌可感染双子叶植物和裸子植物，农杆菌转化法是将目的基因导入烟草细胞最常用的方法，D正确。
6.答案：
A
解析：
检测目的基因是否成功导入或表达的方法有多种。
①分子水平上的检测：
通过PCR等技术检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出了mRNA；检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原—抗体杂交技术。
②个体生物学水平的鉴定：
检测是否具有抗性及抗性程度；检测基因工程产品与天然产品的活性是否相同等。
在显微镜下无法观察到受体细胞中是否含有目的基因，故选A。
7.答案：
C
解析：
A.DNA连接酶能连接双链DNA片段的黏末端或平末端，故A错误；
B.原核生物内含有的限制酶是对外源DNA进行切割,并不是只能切割目的基因，故B错误；
C.基因工程常用的载体包括质粒,动植物病毒,噬菌体的衍生物等，故C正确；
D.载体应该有多个限制酶的切点,以便与外源基因连接，故D错误。
8.答案：
C
解析：
受精卵还没有分化，细胞中的乙酰胆碱（一种神经递质）受体基因还没有表达，所以受精卵中不含该目的基因的mRNA，A项错误；大肠杆菌是基因工程常用的受体细胞，但不能作为基因工程的载体，B项错误；图示过程①以mRNA为模板合成DNA，需要逆转录酶；过程②DNA的复制，需要DNA聚合酶，C项正确；用探针筛选的目的是获得被感染的细菌，淘汰未被感染的细菌，D项错误。
9.答案：
B
解析：
正常ADA基因没有替换患者的缺陷基因，A错误。
患者体内转入正常ADA基因，可通过控制ADA的合成增强免疫功能，B正确。
题中所述的治疗属于体外基因治疗，C错误。
ADA基因缺陷症属于先天性免疫缺陷病，D错误。
10.答案：
D
解析：
将外源生长激素基因导入动物体内可提高动物生长速度，A正确；将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖含量大大降低，B正确；利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题，C正确；用转基因动物作为器官移植的供体时，向器官供体基因组导入某种调节因子，以抑制抗原决定基因的表达，D错误。
11.答案：
C
12.答案：
A
解析：
A、基因治疗是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，A正确；
B、基因治疗只是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，并没有对有基因缺陷的细胞进行修复，B错误；
C、人工诱变具有不定向性，并且是多害少利的，C错误；
D、基因治疗是把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的，并没有切除有缺陷的基因，D错误。
故选：
A。
13.答案：
B
解析：
基因治疗是把正常基因导入有基因缺陷的细胞中,也就是将外源基因通过基因转移技术将其插入病人的适当的受体细胞中,使外源基因制造的产物能治疗某种疾病;基因诊断是让正常人的DNA与病人基因组中分离出的DNA进行杂交来诊断疾病;一种基因探针只能检测水体中的一种病毒;利用基因工程生产乙肝疫苗时的目的基因是乙肝病毒的核酸。
14.答案：
D
解析：
重组的微生物在降解污染物的过程中可能产生二次污染,造成环境安全问题.A正确;转基因生物所带来的环境安全问题在今后可能得到解决正确;若转基因植物的花粉中有毒蛋白或过敏蛋白,可能会通过食物链传递到人体内,.造成食物安全问题,C正确;种植抗虫棉可以减少农药的使用量,保护环境,但转基因植物可能会与野生植物杂交,造成基因污染,可能会给生物多样性带来潜在的风险和威胁.D错误.
15.答案：
C
16.答案：
C
解析：
A、该受精卵发育的羊能分泌含α-抗胰蛋白酶的奶，说明目的基因已表达成功：
DNA→mRNA→蛋白质（抗胰蛋白酶），A正确；
B、人的α-抗胰蛋白酶基因的DNA片段在羊的受精卵中，能整合到其染色体上，随着其复制而复制：
DNA→DNA，B正确；
C、RNA以自身为模板自我复制只能发生在以RNA作为遗传物质的少数病毒体内，C错误；
D、翻译是以mRNA为模板的，即按照RNA密码子的排列顺序合成蛋白质，D正确．
故选：
C．
17.答案：
B
解析：
A、①为逆转录过程，该过程需要逆转录酶的催化，A错误；
B、④为复性过程，发生的变化是引物与单链DNA链结合，B正确；
C、图中②⑤过程为DNA复制，这两个过程都需要DNA聚合酶的催化，其中⑤过程进行的温度是70～75℃，因此催化该过程的DNA聚合酶能酶耐高温，但催化②过程的酶不耐高温，C错误；
D、对同一目的基因而言，通过cDNA过程获得的目的基因不含内含子、启动子等结构，而通过PCR过程获得的目的基因含有内含子、启动子等结构，D错误。
故选：
B。
18.答案：
A
19.答案：
C
解析：
本题借助图示考查基因工程的相关知识。
题图所示的质粒上含有潮霉素抗性基因,该基因是标记基因,因此在筛选时,培养基中应添加潮霉素。
目的基因C和质粒都有可被EcoRⅠ切割的酶切位点,另外需要DNA连接酶将切好的目的基因和质粒连接起来,A项正确:
愈伤组织全能性较高,是理想的植物受体细胞,将目的基因导入植物受体细胞的方法通常为农杆菌转化法,B项正确;质粒中含有潮霉素抗性基因,因此选择培养基中应该加入潮霉素,C项错误;使用分子杂交方法可检测目的基因是否整合到受体染色体上,D项正确。
答案：
20、
21.答案：
D
解析：
质粒在某些真核细胞中也有,如酵母菌;将目的基因连接到质粒上,不但要用到DNA连接酶,在连接之前还要用同一种限制性核酸内切酶处理含目的基因的DNA片段和质粒以得到相同的黏性末端,植物的体细胞都具有全能性,因此都可以作为受体细胞;因为目的基因只结合在某条染色体上,所以有的配子中没有目的基因。
22.答案：
B
解析：
分析题干可知,对蛋白质的改造实质是对控制该蛋白质合成的基因进行改造。
23.答案：
（1）氨基酸序列
（2）P；P1；DNA和RNA
（3）设计预期的蛋白质结构；推测应有的氨基酸序列；功能
解析：
（1）由题干信息可知，改造蛋白质的功能可通过改变氨基酸序列实现。
（2）依据蛋白质工程的定义及题干中信息可知，获得P1基因的途径有修饰现有（P）基因或合成新（P1）基因。
中心法则的内容包括DNA的复制、RNA的复制、转录、逆转录和翻译。
（3）蛋白质工程的基本途径：
从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
通过蛋白质工程合成的蛋白质还需要进行生物功能的鉴定，看是否符合人们的需求。
答案：
24、
25.答案：
（1）.人工合成（或化学合成）;NcoⅠ、BamHⅠ和DNA连接酶（限制酶和DNA连接酶）
（2）.重组质粒1酶切片段自身连接;C;（3）.草丁膦;（4）.死亡害虫数
解析：
（1）.已知基因的碱基序列,可通过人工合成法合成目的基因。
质粒和毒蛋白基因均有BamHⅠ和NcoⅠ酶切位点,将毒蛋白基因与质粒连接获得重组质粒1需用到的工具酶有NcoⅠ、BamHⅠ和DNA连接酶。
（2）.重组质粒1酶切片段末端的游离磷酸基脱离后,质粒片段就不能自身连接。
因质粒的两个末端去磷酸基,故目的基因与质粒连接时,每条主链均只能与质粒的相应主链完成切口一端的连接,如C。
（3）.重组质粒在白僵菌细胞内被修复,Bar基因可正常表达,白僵菌具有了抗草丁膦能力,故可用含草丁膦的培养基进行筛选。
（4）.本方法从个体生物学水平对转基因植物进行鉴定,单位时间内杀死害虫个体数可作为重组白僵菌杀虫效果的指标。
答案：
26、
解析：
2,4-D是生长素类似物，利用不同植物对其敏感程度不同，可用其除麦田杂草。
从工程菌中提取RNA构建的基因文库是部分基因文库（cDNA文库）。
PCR技术用热稳定性DNA聚合酶（Taq酶）延伸，多次循环成指数（2n）增长。
标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因。
欲知基因工程成功与否，需要进行分子水平检测，有时还需进行个体生物学水平鉴定。
考点：
本
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