五种发酵木薯渣在罗非鱼饲料中应用的养殖性能比较张伟涛精.docx

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五种发酵木薯渣在罗非鱼饲料中应用的养殖性能比较张伟涛精

五种发酵木薯渣在罗非鱼饲料中应用的养殖性能比较

张伟涛

叶元土

尹晓静

高艳玲

张宝彤

随着水产业的蓬勃发展,水产饲料产量逐年成倍增长,随之而来的是饲料原料的短缺,除蛋白饲料不足外,能量饲料不足的问题也越来越显示出来。

近年来,各地都在开发廉价的饲料资源替代部分玉米等能量原料。

木薯(ManihotesculentaCrantz)是世界3大薯类作物之一,有“地下粮仓”、“淀粉之王”和“特用作物”之誉称。

木薯的单位面积食物的能量超过水稻、小麦、高粱和玉米,是人类主要的食物资源之一[1]。

许多国家研究木薯做畜禽饲料,以补充粮食的不足[2-5];我国畜牧科技人员用木薯代替玉米饲养猪禽取得良好广西等省用木薯粉替代玉米等能量饲效果[6,7];广东、

料应用在畜禽饲料中,并取得较好养殖效果[8]。

罗非鱼具有生长快、产量高、食性杂、适应力强、疾病少,而且肉嫩味美等优点,深受养殖户和消费者的欢迎。

本研究旨在开发新型高能水产饲料原料———木薯渣,并通过一系列物理、化学、生物等方法处理,以提高木薯的营养效价,从而减少玉米等原料在水产配合饲料中的大量使用,以达到节省粮食、降低成本的目的,为实际生产创造更大的价值。

组别

原料

进口鱼粉豆粕菜粕棉粕次粉木薯渣肉骨粉米糠菜油豆油膨润土

基础日粮组成见表1,各试验组饲料常规营养成分实测值见表2。

表1

基础日粮组成

含量(%)

Ca(H2PO4)2沸石粉预混料合计

382020102029112211100

表2

粗水分

饲料常规营养成分实测值(%)

粗蛋白

粗脂肪

粗灰分

11.1

材料与方法试验设计

在罗非鱼饲料中,分别添加5种发酵木薯渣原

BCDE8.557.649.718.327.9127.7726.7828.2127.6927.817.918.669.488.437.9613.7413.9113.9713.6414.122.452.412.462.382.031.521.511.591.491.50

5种发酵木薯渣样品为广西建邦经贸有限公司提

供,利用提取木薯淀粉后的残渣采用不同发酵处理方法得到的产品。

样品干物5种木薯渣样品的蛋白含量、质消化率、样品蛋白消化率见表3。

表3

样品5种木薯渣样品蛋白含量、干物质消化率、蛋白消化率(%)

样品

样品粗蛋白

样品干物质消化率

样品蛋白消化率

料,共5个试验组,5组试验饲料以A、B、C、D、E表示,每组3个平行处理,每个处理放平均体重(44.49±

0.31)g的罗非鱼9尾,养殖周期60d。

1.2

试验鱼

选择自然健康的罗非鱼作为养殖试验鱼,为当年的池塘养殖鱼种。

经1周暂养、驯化后,选择体格健壮、规格整齐的鱼种进行随机分组。

2345

1.3饲料配方与常规营养水平

20.75±0.2120.05±0.12b18.54±0.17c19.88±0.12b17.84±0.18d

a22.64±3.68

19.30±6.0517.98±3.5121.38±2.6721.47±0.1365.60±0.37a

59.89±0.08a51.15±4.38b61.27±4.06a65.15±0.70a

注:

同列数据肩标小写字母不同表示差异显著(P<0.05)。

下表同。

张伟涛,北京桑普生物化学技术有限公司,528300,广东省佛山市顺德区凤翔工业园荣业六路1号正对面。

叶元土、尹晓静、邱燕、高艳玲、张俊,苏州大学生命科学学院。

张宝彤,单位及通讯地址同第一作者。

收稿日期:

2008-02-21

将木薯渣原料样品粉碎,过60目筛后,与其它原料均匀混合,用小型饲料制粒机制成直径2mm的硬颗粒饲料,饲料制成后自然冷却,装袋,放于冰箱冷藏保存、待用。

1.4饲养管理

养殖试验在室内同一循环养殖系统进行,使用直

28

肝胰脏酶液:

取肝胰脏称重,加入10倍体积的

径70cm、高85cm的养殖桶。

养殖用水为经过曝气的自来水,每天换水量为总水量的1/3,以减少残余饲料和粪便对水体的影响。

养殖水体经过滤、沉淀后流回蓄水池,经过增氧、控温后由水泵抽回各养殖桶。

日投饵3次(8:

00、12:

30、17:

00),投饲率为体重的3% ̄4%。

1.5检测指标

1.5.1生长性能指标及形体指标

饲养试验结束时,使鱼空腹24h后称重。

每个养殖桶取鱼6尾,击打头部致死,称取鱼体重、测量鱼体

长,解剖取鱼背部肌肉,取内脏团并分离,记录内脏团重和肝脏重。

各指标计算公式如下:

增重率(%)=(末重-初重)(g)/初重(g)×100;

体重特定生长率(%/d)=(ln末重-ln初重)/天数×100;体长特定生长率(%/d)=(ln末体长-ln初体长)/天数×100;

存活率(%)=试验末鱼尾数/试验初鱼尾数×100;饵料系数=总投饲量(g)/(末重-初重)(g);肝体比(%)=肝脏重量(g)/体重(g)×100;脏体比(%)=内脏总重(g)/体重(g)×100。

pH值7.4、0.2mol/l的磷酸缓冲液。

用匀浆器匀浆,

6000r/min离心,取上清液备用。

1.5.2.2测定方法

溶菌酶活力测定:

采用Hultmark法[9]的改进方法,用0.1mol/l、pH值6.4的磷酸盐缓冲液将溶壁微

球菌(干菌粉)配成一定浓度的反应底物,底物浓度确定为570nm、OD值0.303。

取0.1ml待测样品加3ml菌悬液,测Ao值,在37℃温浴30min后立即置冰浴

10min终止反应,测A值。

LSZ活力=(Ao-A)/A。

总超氧化物歧化酶活力测定:

采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定。

谷草转氨酶活力测定:

采用南京建成生物工程研究所试剂盒进行测定。

血红蛋白测定:

采用南京建成生物工程研究所氰化高铁血红蛋白试剂盒测定。

1.5.3鱼体常规营养成分测定

水分测定用105℃烘干恒重方法,粗蛋白测定采

用凯氏定氮法(总氮×6.25),脂肪测定采用索氏抽提法,粗灰分测定采用高温炉灰化法(550℃),钙含量采用乙二胺四乙二酸二钠滴定法(GB/T6436—1992)测定,总磷含量按GB/T6437—1992测定。

1.5.2生理指标

免疫防御力:

以血清及体表粘液中溶菌酶(LSZ),

血清、体表粘液和肝脏中的总超氧化物歧化酶(T-

SOD)表示。

肝胰脏功能:

以血清和肝脏中的谷草转氨酶(GOT)活力来反映肝胰脏功能。

造血功能:

以全血血红蛋白含量来评价。

1.5.4离体消化率的测定

参照叶元土(2004)提出的水产饲料离体消化率

蛋测定方法[10],测定5种木薯渣样品的离体消化率、白消化率。

1.5.2.1酶液的制备1.6数据处理

标准差”表示,结果采用Ex-试验数据用“平均数±

血清:

尾静脉抽血,以3000r/min,冰冻离心15min,取上清液作为酶液。

体表粘液:

用滤纸轻轻吸去鱼体表水分,用解剖刀刮取体表不同部位粘液(不能含有鳞片),3 ̄5尾鱼样品合在一起,称重。

采用0.02mol/l、pH值7.4磷酸盐缓冲液5倍稀释,匀浆器匀浆,6000r/min冷冻离心,取上清液作为酶液,-20℃冰箱保存备用。

表4

组别

成活率(%)

cel和SPSS11.5版统计软件中One-WayANOVA过程进行方差分析,并进行Duncan's多重比较,显著水平为0.05。

2结果

2.1添加不同木薯渣样品对罗非鱼生长的影响(见表4)

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼生长的影响

体重特定生长率(%/d)

体长特定生长率(%/d)

饵料系数

增重率(%)

ABCDE100±0.00

6.4196.3±96.3±6.41100±0.0096.3±6.41217.23±3.73

204.71±10.12205.18±4.99208.65±1.70202.54±14.481.92±0.02

1.85±0.061.86±0.031.88±0.011.84±0.080.54±0.06

0.53±0.040.53±0.030.54±0.050.53±0.051.47±0.03a

1.53±0.03ab1.51±0.04ab1.53±0.01ab1.54±0.05b

从表4结果可知,各试验组成活率均较高,为体重特定生长率、体长特定生长96.3%以上。

增重率、

率,均以A组最高,最低的为E组;饵料系数,以A组最低,最高的为E组,A、E两组有显著性差异(P<0.05)。

29

2.2添加不同木薯渣样品对罗非鱼形体的影响肥满度、脏体比、肝体比等本试验以体重/体长、

A组,各试验组间差异不显著(P>0.05);血清GOT活力

最大组为A组,最小组为B组,A组显著高于其它各组(P<0.05)。

表8

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼谷草转氨酶(GOT)活力的影响(U/100ml)

组别

肝脏

血清

指标来反映饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼形体的影响,结果见表5。

结果显示,各试验组鱼体的体重/体长、肥满度、脏体比、肝体比均无显著性差异(P>0.05)。

表5

组别

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼形体的影响

体重/体长(g/cm)

肥满度(%)

脏体比(%)

肝体比(%)

BCD8.70±1.208.60±1.458.69±1.198.60±1.298.52±1.663.43±0.24

3.43±0.223.41±0.213.41±0.247.77±0.85

7.47±0.717.43±1.387.78±0.711.12±0.37

1.13±0.451.18±0.370.93±0.29A

BCDE234.90±9.80253.43±17.72248.73±32.26249.18±29.44257.94±8.2763.82±5.95a

21.91±8.14b27.79±2.11b30.59±10.96b25.29±4.16b

2.3.4血红蛋白(Hb)

测定5个试验组鱼体全血血红蛋白含量,结果见

2.32.3.1

添加不同木薯渣样品对罗非鱼生理指标的影响溶菌酶(LSZ)活力(见表6)

表6

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼溶菌酶(LSZ)活力的影响

组别

血清

粘液

表9。

试验组血红蛋白含量最高组为E组,显著高于

B、D组(P<0.05),但与其它组间差异不显著(P>0.05);含

量最低的为B组,与其它各组差异显著(P<0.05)。

结果表明,不同的木薯渣样品对罗非鱼体血红蛋白含量存在一定的影响。

表9

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼血红蛋白(Hb)活力的影响(g/l)

组别

血红蛋白含量

BCDE0.68±0.06ab0.75±0.06bc0.78±0.09c0.65±0.06a0.62±0.08a0.10±0.02a

0.09±0.02ab0.07±0.02bc0.08±0.02abc0.06±0.02c

从表6可以看出,血清溶菌酶活力最高的为C组,显著高于A、D、E组(P<0.05);粘液溶菌酶活力以A组为最高,活力最低组为E组,A、E组差异显著(P<0.05),其余3组间差异不显著(P>0.05)。

BCDE74.72±9.28ab60.30±6.29c74.48±11.17ab72.64±8.34a81.63±4.09b

2.4

影响

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼鱼体成分各试验组鱼体全鱼、肌肉和肝脏组成成分见表10。

2.3.2超氧化物歧化酶(SOD)活力

肝脏和血清超氧化物歧化5个试验组鱼体粘液、

酶(SOD)活力结果见表7。

从表7可以看出,粘液SOD酶活力最高组为C组,最低组为E组,各试验组之间差异不显著(P>0.05);肝脏SOD酶活力最高为E组,最低组为B组,各试验组之间差异不显著(P>0.05);血清

从表10可以看出,各试验组全鱼水分含量差异不显著(P>0.05);全鱼粗蛋白以C组含量最高,为60.44%

±2.55%,显著高于A、D组(P<0.05);粗脂肪含量以D组最高,为23.69%±1.59%,各试验组无显著性差异

(P>0.05)。

各试验组鱼体肌肉水分含量以C组含量最高,但各试验组间差异不显著(P>0.05);各试验组鱼体肌肉粗蛋白含量以C组含量最高,B组含量最低,两组间差异显著(P<0.05);各试验组粗脂肪含量差异不显著(P>0.05)。

各试验组鱼体肝脏水分含量以A组最高,但各试验组间差异不显著(P>0.05);各试验组鱼体肝脏粗蛋白含量以E组含量最高,B组含量最低,两组间存在显著性差异(P<0.05),E组与A、C组差异显著(P<0.05),

SOD酶活力最高组为B组,最低组为E组,各试验组

之间差异不显著(P>0.05)。

表7

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼超氧化物岐化酶(SOD)活力的影响(U/ml)

组别

粘液

肝脏

血清

BCDE192.88±31.53195.31±39.65203.66±18.66195.01±18.96189.38±13.44557.41±6.54

556.65±24.21557.28±19.60558.94±26.36571.52±23.5893.64±30.85

102.59±12.0687.93±13.93100.00±19.7585.15±19.13

2.3.3谷草转氨酶(GOT)活力

鱼体肝脏和血清GOT活力值见表8。

从表8中

C、D差异显著(P<0.05);各试验组粗脂肪含B组与A、

量以D组含量最高,C组含量最低,两组之间差异显

可以看出,肝脏GOT活力最大组为E组,最小组为

30

表10

组别

水分

全鱼粗蛋白

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼鱼体成分的影响(%)

粗脂肪

水分

肌肉

粗蛋白

粗脂肪

ab

水分

肝脏粗蛋白

粗脂肪

ABCDE73.89±0.1973.54±1.2374.84±1.8073.25±0.8173.67±1.2358.33±1.32

59.58±2.55bc60.44±2.55c57.24±1.41a58.84±1.28abc

ab22.91±1.27

23.59±1.4522.78±1.0423.69±1.5923.18±1.7478.87±0.73

78.78±0.6278.98±0.3878.62±0.1178.49±0.6589.43±1.17

88.39±1.40a89.69±0.82b88.69±1.39ab89.45±1.28ab8.61±0.61

9.25±0.888.64±0.698.70±0.949.07±0.5278.45±5.13

75.33±0.7378.25±3.9375.29±0.6877.62±2.5950.42±2.79

44.15±1.65c49.93±2.48a52.12±5.13ab54.56±4.80b28.29±1.96ab

28.72±1.89ab27.49±1.50a30.29±2.65b28.77±2.14ab

著(P<0.05),其余各组间差异不显著(P>0.05)。

响。

溶菌酶存在于鱼类的粘液、血清、吞噬细胞和单核细胞的胞浆内。

溶菌酶通过酶解病原体细胞壁的粘多糖将其杀死,溶菌酶活力高,可以说明鱼体对外来异物的抵抗能力较强,因此,鱼体内溶菌酶的水平和活性,直接关系到鱼类的免疫功能和健康[13,14]。

本试验中,各试验组罗非鱼血清、粘液溶菌酶活力存在一定的差异性,此结果反映出不同的木薯粉样品饲料,对于罗非鱼非特异性免疫力影响差异较大。

33.1

讨论

罗非鱼的生长以及对5种发酵木薯渣样品饲料本试验5种发酵木薯渣样品饲料,对试验罗非鱼

的利用

养殖均显示了较好的效果。

成活率、增重率值较高,表明5种发酵木薯渣样品添加到饲料中,对鱼体没有产生不良影响,相反,在保证鱼体成活的同时,促进了鱼体的增重;从饲料利用效率上看,饵料系数均为1.5左右,表明5个试验组罗非鱼对饲料的利用率都比较高,摄食情况良好。

从生长试验结果上看,A组养殖效果最优,成活率、增重率、特定生长率均最高,饵料系数低,木薯渣样品通过此种处理模式添加到配合饲料中,不仅满足了罗非鱼正常的生长需求,也大大降低了养殖成本,效果较好。

SOD作为一种特异性消除超氧自由基的循环酶,

主要负责过氧化和噬菌作用造成的组织损伤的防御保护作用。

SOD活性越高,说明其清除自由基的能力越强[15]。

王雷等(1994)[16]的研究表明了SOD的活性与水生动物的免疫水平密切相关,对于增强吞噬细胞防御能力和整个机体的免疫功能具有重要作用,可作为水产动物机体的免疫性指标,与鱼类机体的健康有着密切的联系。

通过试验可以发现,各试验组罗非鱼

3.2罗非鱼形体生长效果

鱼体形体指标的评判,主要包括体重/体长关系、

SOD酶活力差异不显著;并且通过整个养殖过程来

看,鱼体健康状况良好,进而说明鱼体免疫系统功能正常,具有良好的抵抗、防御病害能力。

肥满度、脏体比、肝体比。

体重/体长比反映鱼体单位体长的重量,值越大表明鱼体较肥;脏体比是鱼体内脏重量占体重的百分比,反映鱼体肌肉生长情况;肝体比反映了肝胰脏重占内脏重的百分比;肥满度是反映鱼体横向骨骼的生长情况[11]。

本试验条件下,5个试验组鱼体的体重/体长、肥满度、脏体比和肝体比均无显著性差异,说明5种发酵木薯渣样品饲料对鱼体形体指标的影响上差异不显著(P>0.05)。

3.3.2肝脏生理机能

转氨酶是催化氨基酸氧化分解时氨基转移到α-

酮酸的酶,正常情况下主要存在于肝细胞内,在血清中的含量也很低。

当组织中毒发生病变,或者受损伤的组织范围较大,引起生物膜通透性增加时,可导致细胞内转氨酶释放到血液中的量异常增加,从而引起血清中该酶浓度上升或活性突然持续性增强[17]。

因此,在人体医学上以血清转氨酶活力大小作为肝功能是否正常的重要指标之一。

本试验测定了5个组罗非鱼血清和肝胰脏的谷草转氨酸(GOT)活力,结果显示,试验罗非鱼肝脏转氨酶活力远高于血清转氨酶活力,各试验组鱼体肝脏未受到损害,肝功能正常;同时,试验结束取样解剖观察,发现鱼体肝脏颜色为紫红色,且柔韧有弹性,进而证实了上述观点。

3.33.3.1

饲料中添加不同木薯渣样品对罗非鱼生理指标非特异免疫力

鱼类属较低等的变温脊椎动物,其特异性免疫应

的影响

答能力相对低下,因此,非特异性免疫在其免疫防御中具有重要意义,而溶菌酶和超氧化物歧化酶是鱼类行使其非特异性免疫反应的重要工具,它们对于保护鱼体,杀灭细菌发挥了重要的作用[12]。

水产动物体内的溶菌酶是一种重要的非特异性免疫防御因子,特别是鱼的生理防御水平的一个重要标志,也可体现病原菌及其它环境对鱼体健康的影

3.3.3造血功能

血红蛋白是红细胞的主要成分,是对机体组织运

输氧的关键成分。

血红蛋白含量的多少直接影响到

31

鱼体整个生命活动能否正常运行的关键。

血红蛋白含量和红细胞数量是反映鱼体是否贫血的重要指标,临床试验中常用血红蛋白含量来检测动物的造血机能[18,19]。

本试验通过测定血红蛋白含量,来依此评价鱼体造血功能。

结果显示,各试验组血红蛋白含量存在一定差异,个别组含量相对较低,从而影响了鱼体的造血功能。

因此,对于木薯粉样品,不同的处理方式,在鱼体造血功能上表现出一定的差异性。

[6]

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叶元土.水产动物的营养与饲料研究评价指标体系[J].饲料广角,2004(20):

19-21.

3.4罗非鱼常规营养成分分析

各试验组罗非鱼的全鱼、肌肉和肝脏水分含量差

异不显著(P>0.05),而粗蛋白含量存在一定的差异性,此试验结果结合5种发酵木薯渣试验饲料基础配方营养成分组成来评价分析,由于基础饲料配方中B组样品饲料蛋白含量显著低于其它几个试验组,而从试验结果来看,B组的的蛋白沉积量在肌肉和肝脏中也是最低的;粗脂肪含量在全鱼、肌肉中含量差异不显著(P>0.05),而在肝脏中粗脂肪含量存在差异性,表明不同的木薯粉样品饲料饲喂罗非鱼,鱼体肝脏对饲料脂肪的吸收、运转、代谢存在一定的差异性,具体影响原因,还有待进一步研究探讨。

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486-488.

4结论

木薯渣样品,经过一系列加工处理,不仅提高了

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业大学学报,1997,19(1):

41-45.

木薯渣样品营养成分含量,同时添加到配合饲料中可被鱼体吸收利用,满足其正常的营养需求。

综合评价,本试验5种发酵木薯渣样品,尤以A样品添加到饲料中养殖效果最佳,当然,本试验研究结果还有待进一步的验证。

同时,应开展后续针对不同添加量的梯度试验等研究,从而指导实际生产,进而创造更大的价值。

本项目重点在于开发新的饲料原料替代品———木薯渣,因此在木薯的应用和科技研究方面,它依然是一个待开发的作物资源;本项目的研究成果,也为后续的研究做一参考。

参考文献

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(编辑:

徐世良,fi-xu@163.com

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本刊为半月刊,大16

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