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藏药熏倒牛化学成分研究解析

天然产物研究与开发NatProdResDev2009,21:

1992202

文章编号）022*******

藏药熏倒牛化学成分研究

王维恩

1,2

张晓峰

沈建伟,娄灯吉

11,2

中国科学院西北高原生物研究所藏药中心,西宁810008;2中国科学院研究生院,北京100049

摘　要:

利用色谱对藏药熏倒牛进行化学成分研究。

从藏药熏倒牛（BiebersteiniaheterostemonMaxim.）中分离鉴β2xylopyranoside

（1）、定了6个化合物,采用波谱技术分别鉴定为hypolaetin72O2山羊豆碱

（2）、反式242羟基山羊

13豆碱（3）、甘露糖醇（4）、伞形花内脂（5）、槲皮素（6）。

对化合物1的H、CNMR信号进行了准确归属,化合

物1～4均为首次从该植物中分离得到。

β2xylopyranoside;山羊豆碱关键词:

熏倒牛;hypolaetin72O2中图分类号:

R284.1;Q946

文献标识码:

ChemicalConstituentsinAerialPartsof

BiebersteiniaheterostemonMaxim.

WANGWei2en

1,2

ZHANGXiao2feng,J2wei1311,TheNorthwestPlateauInstituteofBiology,ofXChina;

GraduateUniversityofyBChina

Abstract:

SixcompoundsisBiebersteiniaheterostemonMaxim.（Geraniaceae）by

β2xylopyranoside

（1）,coloumstheywereidentifiedashypolaetin72O2

galegine,242（3）,mannitol（4）,umbelliferone（5）andquercetin（6）.

β2xylopyranoside;galegineKeyheterostemonMaxim.;hypolaetin72O2

　　熏倒牛（Biebersteiniaheterostemon）的藏名译音

为明见赛保,民间又称臭花椒、狼尾巴,是蔷薇纲牻牛儿苗亚纲熏倒牛科的植物。

熏倒牛科（Bieber2steiniaceae）是一单型科,仅有一属即熏倒牛属

Biebersteinia。

熏倒牛B.heterostemon为甘、宁、青、川

β2xylopyranoside）的波报道化合物1（hypolaetin72O2谱特征

[3,4]

但对C22′、C25′的H,CNMR信号归属

有错误,本文对其进行了分析纠正,并首次报道化合物3的核磁共振数据,由X2ray射线单晶衍射确定其为反式242羟基山羊豆碱。

张晓峰等曾报道在藏药熏倒牛中分得7个化合物

[5]

西北（诺尔盖）特有,于1000～3200m间黄土草原

[1]

河滩偶见,浓烈腥臭。

其味辛、苦,性寒,具有消炎止痛,清热解毒,清血热,祛风毒的作用,用于治疗各种炎症、结核症、丹毒、疟疾、咽喉肿痛、胃痛、全身

[2]

水肿、中风、虫蛇咬伤等。

藏医认为所有的炎症

[3]

及热病都是“赤巴”引起的,而熏倒牛也常在藏医药中用来治疗“赤巴”病。

我们在体外抗菌药效的跟踪研究中分离获得了六个化合物,根据理化性质

β2xylopyrano2和波谱数据分别鉴定为hypolaetin72O2

side

（1）、山羊豆碱

（2）、反式242羟基山羊豆碱（3）、甘露糖醇（4）、伞形花内脂（5）、槲皮素（6）。

文献曾

而本文分得的化合

物1～4均为首次从该植物中分离。

1　仪器与材料

　　XT4A数字显示双目显微熔点仪（北京泰克仪

器有限公司）;NOVA2600（加拿大NOVA公司）或BrukerAV2400核磁共震仪（瑞士Bruker公司）,TMS

为内标;APEX.ⅡFT2ICR型质谱仪（瑞士Bruker公司）;Bio2RadFT2IR240型红外光谱仪（美国Bio2Rad公司）,KBr压片;高效薄层板GF254（烟台化工科技开发试验厂）;SephadexLH20、反相RP218柱料（Sig2ma公司）;D101大孔吸附树脂（天津南开大学化工

　收稿日期:

2007212213　　　接受日期:

2008203221

　基金项目:

国家高科技研究发展863计划基金项目3通讯作者E2mail:

xfzhang@

厂）;200～300目柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）;所有试剂均为光谱纯或分析纯。

熏倒牛全草于2006年8月采集于青海省黄南

200天然产物研究与开发　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Vol120

州同仁县,中国科学院西北高原生物研究所卢学峰研究员鉴定为BiebersteiniaheterostemonMaxim,标本保存在西北高原生物研究所藏药中心标本室。

归属在H22′,所以本文分析纠正后的信号归属更为合理。

具体信号归属见表1,其化学结构式见图1,HMBC相关见图2。

β2表1　5,8,3′,4′2四羟基黄酮272O2D2木糖苷

（1）的NMR数

据

β2Table1　NMRdataof5,8,3′,4′2tetrahydroxyflavon272yl2D2

xylopyranoside

（1）

碳原子编号No.

234567892′3′4′5′6′Xyl1″2″

7.48（brs）10.46（s,OH）10.87（s,OH）6.91（brd,8.3）7.46（brd,8.3）4.96（d,7.8）3.3623.33e5.40（d,4.2,OH）

3″

3.2623.33e5.15（d,4.2,OH）

4″

3.3823.40e5.12（d,4.2,OH）

5″

3.81（brd,10.8）

3.3823.33e

Note:

MeasuredinDMSO2d6at600MHz.eoverlappingwithothersignals

65.9

CH2

69.5

75.8

8.76（s,12.35（s,OH）6.56（s）6.68（s）

2　提取与分离

　　取熏倒牛全草10kg,粉碎成粗粉,用6倍量

90%的乙醇回流提取3次,每次2h,过滤,合并滤液,回收乙醇得浸膏。

将90%乙醇回流提取浸膏加适量水溶解,依次用石油醚、氯仿、醋酸乙脂及正丁醇萃取,醋酸乙酯萃取物浓缩后得到黄色沉淀3.5g,沉淀部分40℃温水溶解后上SephadexLH20柱,用水2乙醇（1∶0～0∶1）洗脱,得到纯化的化合物1（960mg）;剩余醋酸乙酯萃取物（130g）经硅胶柱色

δHδC

164.4102.8182.4152.498.6151.1127.27105.4121.8113.7145.9150.1116.2119.4101.873.2

DEPTCCHCCCHCCCCCCHCCCHCHCHCH

谱,以氯仿2丙酮（20∶1～1∶1）洗脱得化合物2（430mg）;正丁醇萃取物（230g）用D101大孔吸附树脂以水和不同浓度的乙醇为洗脱剂,对得到的50%乙醇洗脱部位经硅胶柱色谱,以氯仿2甲醇洗脱,经薄层色谱鉴定,合并大致相同部分得到A～D部分用RP218柱分离,甲醇2水（6∶2）,（）;后得到化合物（）（14g）经硅胶柱色谱,酸乙脂为洗脱剂,得到的流份经重结晶得化合物5（250mg）和6（220mg）。

3　结构鉴定

25　　化合物1　黄色粉末,mp.204～205℃,[α]D

+12.5（10%水溶液）,盐酸镁粉反应及Molish反应

皆呈阳性,高效薄层板GF254点样,于醋酸乙酯:

吡啶:

水:

甲醇（80∶20∶10∶5）中展开,碘蒸气显色,薄

KBr21υ层色谱Rf为0.68;FTIRm:

3419（2OH）,1661,maxc1612,1579,1513,1384,1051,834,625;HRESI2MS

m/z:

435.0725[M+H]。

核磁共振氢谱数据和碳

β2xylopyranoside谱数据与文献报道的hypolaetin72O2

[4]

基本一致,推测化合物1分子式为C20H18O11,结

β2构被确定为5,8,3′,4′2四羟基黄酮272O2D2木糖

β2xylopyranoside,文献对C2苷,即hypolaetin72O22′、C25′的H、CNMR信号归属有错误,根据H2HCOSY和HMQC谱来看,C25′对应δ.2,C22′对C116

应δ.7;H25′和H22′在δ.91（dd,J=8.3Hz,C113H6

H）处有同核位移相关,而且在δ6.91（dd,J=8.3Hz,H）和7.46（dd,J=8.3Hz,H）处的两对双峰也证实了δ,而δH6.91归属在H25′H7.48（brs,H）

β2图1　5,8,3′,4′2四羟基黄酮272O2D2木糖苷

（1）的结构β2xylopy2Fig11　Structureof5,8,3′,4′2tetrahydroxyflavon272yl2

ranoside

（1）

Vol120王维恩等:

藏药熏倒牛化学成分研究

201

表2　32甲基222丁烯基胍

（2）和反式242羟基232甲基222丁烯

基胍（3）的NMR数据

Table2　NMRdataofgalegine

（2）andtrans242hydroxygalegine（3）碳原子编号

No.

δH

3.69（d,6.4）5.17brt

δC

40.1118.9136.3

δH

3.92（d,6.3）5.19brt

δC

38.6120.9140.3

β2图2　5,8,3′,4′2四羟基黄酮272O2木糖苷的HMBC

Fig12　SelectedH2HCOSY,HMBCcorrelationsof1

123

　　化合物2　无色针晶（甲醇）,mp.104～105℃,改良碘化铋钾反应及坂口反应皆呈阳性,高效薄层

板GF254点样,于氯仿:

甲醇:

乙酸:

水（13∶5∶1∶1）中υ展开,碘蒸气显色,薄层色谱Rf为0.76;FTIRmax

cm:

3357（2NH2）,3178（2NH2）,1680（2C=CH2）,

KBr

4BH3（2CH3）C=NH

1.69brs1.63brs7.50brs

25.217.7156.5

3.95brd1.71s7.76brs

60.214.1157.4

　　Note:

RecordedinDMSO2d6（1H:

400MHz;13C:

100MHz）.

1645（2C=NH）;核磁共振氢谱和碳谱的具体信号归

属见表2。

HRESI2MSm/z:

128.1192[M+H],综合上述理化性质及结合HRESI2MS,H、CNMR数据,推测其分子式为C6H13N3,数据与文献报道即山羊豆碱

[6,7]

基本一致,故化合物2鉴定为32甲22,

图3　32甲基222丁烯基胍

Fig13　Structureofgalegine

　　化合物3　无色针晶（甲醇）,mp.118.5～120.5℃,改良碘化铋钾反应及坂口反应皆呈阳性,表明其为胍类生物碱;高效薄层板GF254点样,于氯仿:

甲醇:

乙酸:

水（13∶5∶1∶1）中展开,碘蒸气显色,薄层

KBr21

υ色谱Rf为0.82;FTIRm:

3428（2OH）,3347maxc

　　化合物4　无色方晶（甲醇）,mp1161～162℃,

25KBr21

υ[α]D20140（10%水溶液）。

FTIRm:

3271maxc

（2OH）,2935,1462,1378,1088,1026,932,713,890,

624;HNMR（400MHz,DMSO2d6）δ:

3132～3160（8H,m）;13CNMR（100MHz,DMSO2d6）δ:

63181,69160,71125;HRESI2MSm/z:

20510702[M+Na],其

（2NH2）,3157（2NH2）,1680（2C=CH2）,1645（2C=NH）;核磁共振氢谱和碳谱的具体信号归属见表2。

HRESI2MSm/z:

144.1238[M+H],综合上述理化

分子式为C6H14O6。

以上数据与文献报道的甘露醇糖一致

[9]

性质及结合HRESI2MS,H、CNMR数据和X2Ray单晶衍射图推测其分子式为C6H13N3O,化合物3被确定为反式242羟基232甲基222丁烯基胍,即反式242羟基山羊豆碱。

有文献报道曾在蝶形花科植物山羊豆（Galegaofficinalis）中分离得到42羟基山羊豆碱

[8]

113

故化合物4鉴定为甘露醇糖。

本文首次报道化合物3的核磁共振数据,并由

化合物5　无色针晶（甲醇）,紫外下显蓝色荧

KBr21υ光,mp1230～232℃。

FTIRm:

3153（2OH）,maxc

1706,1680（C=O）,1603,1570,1569（C2O）,1508,1455,1408,1324（C2O）,1235（C=O）,1136,902,

837;HNMR（400MHz,DMSO2d6）δ:

6119（d,J=914Hz,H）,7193（d,J=914Hz,H）,7152（d,J=814Hz,H）,6178（dd,J=814Hz,H）,6170（d,J=

X2ray射线单晶衍射确定其为反式242羟基山羊豆

碱,化学结构见图4,X2ray射线单晶衍射见图5。

202天然产物研究与开发　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Vol120

0116Hz,H）;CNMR（100MHZ,DMSO2d6）δ:

try,2004,65:

2072213.

10211,11113,11114,11311,12917,14415,15515,16014,16113。

HRESI2MSm/z:

16310396[M+H],其

5　ZhangXF（张晓峰）,HuBL（胡伯林）,ZhouBN（周炳南）.

StudiesontheactiveconstituentsofTibetanherbBieberstein2iaheterostemonMaxim..ActaPharmSinica,1995,30:

2112

分子式为C9H6O3。

以上数据与文献报道的伞形花内脂一致,故化合物5鉴定为伞形花内脂。

　　化合物6　黄色针晶（甲醇）,mp1310～315℃。

KBr21υIROH）,1663（C=O）,1603,1518,maxcm:

3330（2

1436,1370,1289,1252,1222（C2O）,1050,831,711,696,558。

红外数据与有机物谱图库槲皮素红外数

[12]

据基本吻合;与槲皮素标准品（Sigma公司）混和

[10,11]

214.

6　EichholzerJV,LewisIAS,MacleodJK,etal.Galegineanda

newdihydroxyalkylacetamidefromVerbesinaenceloiodes.Phytochemistry,1982,21:

97299.

7　DelleMG,RitaVA,DelleMF,etal.Furtherhypotensiveme2

tabolitesfromVerbesinacaracasan.Bioorg&MedChemLet2ters,1999,9:

324923254.

点样共薄层,于醋酸乙酯:

吡啶:

水:

甲醇（80∶20∶10∶5）中展开,碘蒸气显色,薄层色谱Rf为0178,显示一个点,故鉴定化合物6为槲皮素。

参考文献

1　TheEditorialBoardoftheFloraofChinaofChineseAcade2myofSciences（中国科学院中国植物志编辑委员会）.Flo2raofChina（中国植物志）.Vol.1.Beijing:

2004.415.

2　YangYC（杨永昌）.（）.

Xinning:

Qleπs1991.2632264.3　MarkhamKR,A,oyBrianPJ,etal.Flavonoid

profilesofnewZealandlibocedrusandrelatedgenera.Phyto2chemistry,1990,29:

5012507.

8　DesvagesG,OlomuckiM.Researchofguanidinederivative

fromGalegaoffcinalisL.:

galegineandhydroxygalegine.BullSocChim,1969,9:

322923232.

9　YangNY（杨念云）,DuanJA（段金廒）,QianSH（钱世

辉）,etal.StudiesonchemicalofTageteserecta

L..J（）,2003,.

2A,ShafieeA,etal.Phy2

tofFerulogobernardiiTomk&M.pimen.PharmMatMed（DARU）,2006,14:

2142221.

11ShiY（施瑶）,LiDX（李定祥）,MinZD（闵知大）.Chemi2

calconstituentsofZanthoxylumdimorphophyllum.ChinTra2ditHerbDrugs（中草药）,2006,37:

13215.

12SDBS（SpectralDatabaseforOrganicCompounds,NIMC）

（有机物谱图库,日本）.[DB/OL].SDBSNO2621.

4　TsutomuN,NaokiI,YukaI,etal.Neolignanandflavonoid

glycosidesinJuniperuscommunisvar.depressa.Phytochemis2

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