附录二常用的培养基及试剂.docx

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附录二常用的培养基及试剂

附录二常用的培养基及试剂

1、糖发酵管

成分：

牛肉膏5g磷酸氢二钠2g

蛋白胨10g0.2溴麝香草本分蓝深液12ml

氯化钠3g蒸馏水1000ml

pH7。

4

制法：

（1）葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装有一个倒置小管的小试管内，高压灭菌121℃15min。

（2）其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100ml,高压灭菌121℃15min。

另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。

将糖溶液5ml加入100ml培养基内以无菌操作分装小试管。

试验方法：

从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36±1℃培养，一观观察2-3天，迟缓反应应需观察14-30天。

附注：

蔗粮不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。

2、ONPG增减基

成分：

邻基粉β-D-半乳糖苷（ONPG）60mg

（O-Nitropheny1-β-D-galactopyranoside）

0．01%MpH7.5磷酸钠缓冲液10ml

1%蛋白胨（pH7.5）30ml

制法：

将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以滤过法除菌，分装10×75mm试管，每管0.5ml，用橡皮塞塞紧。

试验方法：

自琼脂斜面上挑取培养物，满环接种，于36±1℃培养1-3h和24h观察结果。

如有β-半乳糖苷酶产生则于1-3h变黄色，如无此酶则24h不变色。

3、缓冲葡萄糖蛋白胨水（MR和VP试验用）

成分：

磷酸氢二钾5g葡萄糖5g

多胨7g蒸馏水1000ml

制法：

溶化后校正pH，分装试管每管1ml,高压灭菌121℃15min。

甲基红（MR）试验：

自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，放36±1℃培养2-5天，哈夫尼亚菌则应在22-25℃培养。

滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。

鲜红色为阳性，黄色为阴性。

甲基红试剂配法：

甲基工10mg溶于30ml95%酒精中，然后加入20ml蒸馏水。

V-P试验：

用琼脂培养物接种本培养基中，放36±1℃培养2-4天。

哈夫尼亚菌则应在22-25℃培养。

加入6%。

A萘酒精溶液0.5ml和40%氢氧化钾溶液0.2ml，充分振摇试管，观察结果。

阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在36±1℃4h再进行观察。

4、西蒙氏柠檬酸盐培养基

成分：

氯化钠5G柠檬酸钠5g

硫酸镁（MgS047H20）0.2g琼脂20g

磷酸二氢铵1g蒸馏水1000ml

磷酸氢二钾1g0.2%溴麝香草本分蓝溶液40ml

pH6.8

制法：

先将盐类溶解于内，校正pH再加琼脂，加热溶化然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，高压灭菌121℃15min，放成斜面。

试验方法：

挑取少量琼脂增物接种，于36±1℃培养4天，每天观察结果。

阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。

5、丙二酸钠培养基

成分：

酵母浸膏1g氯化钠2g

磷酸氢二钾0.6g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12ml

磷酸二氢钾0.4g蒸馏水1000ml

pH6.8

制法：

先将酵母浸膏和盐类溶解于水,分装每瓶100ml分别加入各种氨基酸。

赖氨酸和鸟氨酸按0.5%加入，dl-氨基酸按1%加入。

再行校正pH至6.8。

对照培养基不加氨基酸。

分装于灭菌的小式管内管每0.5ml，上面滴加一层液体石蜡，高压灭菌115℃10min。

试验方法：

从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±℃18-24h，观察结果。

氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。

阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使增基变为黄色。

对照管应为黄色。

9、蛋白胨水（靛基质试验用）

成分：

蛋白胨（或胰蛋白胨）20g蒸馏水1000ml

氯化钠5g

pH7.4

制法：

按上述成分配制，分装小试管，高温灭菌121℃±15min。

靛基质试剂：

（1）柯凡克试剂将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75ml戊醇中然后缓慢加入浓盐酸25ml。

（2）殴-波试剂将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95%酒精95ml，然后缓慢加入浓盐酸25ml。

试验方法：

挑取小量培养物接种，在36±1℃培养1-2天，必要时可培养4-5天。

加入柯凡克试剂0.5ml，轻摇试管，阳性者于试剂层呈红色。

或加入殴-波试剂约0.5ml，沿管壁流下，覆盖于培养液表面，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。

附注：

蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。

每批蛋白胨买来后，应先用已知菌咱鉴定后方可使用。

10、尿素琼脂

成分：

蛋白胨1g0.4%本分红溶液3ml

氯化钠5g琼脂20g

葡萄糖1g蒸馏水1000ml

磷酸二氢钾2g20%尿素溶液（后加）100ml

pH7.2±0.1

制法：

先将尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶，高压灭菌121℃±15min。

冷至50-55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液，尿素的最终浓度为2%，最后pH应为7.2±0.1。

分装于灭菌试管内，放成斜面备用。

试验方法：

挑取琼脂培养物接种，在36±1℃培养24h观察结果。

尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。

11、氰化钾培养基

成分：

蛋白胨10g磷酸氢二钠5.64g

氰化钠5g蒸馏水1000ml

磷酸二氢钾0.225g0.5%氰化钾溶液（后加）20ml

制法:

将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,高压灭菌121±1℃15min,放在冰箱内使其充分冷却。

每100ml培养基加入0.5%氰化钾20ml（最后浓度为1：

10000），分装于12×100mm灭菌试管，每管约4ml，立刻用灭菌橡皮塞塞紧。

放在4℃冰箱内，至少可保存两个月。

同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。

试验方法：

将琼脂培养物种于蛋白胨水内成为稀释菌液，挑取1环接种于KCN培养基，并另挑取1环接种于对照培养基。

在36±1℃培养1-2天，观察结果。

如有细菌生长即为阳性（不抑制），经2天细菌不生长为阴性（抑制）。

附注：

氰化钾是剧毒物，使用时应小心，切勿沾染，以免中毒。

夏天分装培养基应在冰箱内进行。

试验失败主要原因是超过计划口不平，氰化钾逐渐分解产生氢氰酸气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生长，因而造成假阳性反应。

试验时对每一环节都要特别注意。

12、氧化酶试验

试剂：

（1）1%盐酸二甲基对苯二胺溶液，少量新鲜配制，于冰箱内避光保存。

试验方法：

（1）取白色洁净滤纸沾取菌落。

加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈粉红色，并逐渐加深。

（2）以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。

13、明胶磷酸盐缓液

成分：

明胶2g蒸馏水1000ml

磷酸氢二钠4g

pH6.2

制法：

加热溶解，校正pH，高压灭菌121±1℃15min。

14、乳酸苯酚溶液

成分：

苯酚10g甘油2g

乳酸（比重1.21）10g蒸馏水1000ml

制法：

将酚在水上加热溶解，然后加入乳酸及甘油

用途：

检验真菌形态。

15、肉浸液肉汤

成分：

绞碎牛肉500g磷酸氢二钾2g

氯化钠5g蒸馏水1000ml

蛋白胨10g

制法：

将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，加蒸馏水100ml，混合后放冰箱过液，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒纸过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量,加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH7.4-7.6煮沸并过滤，分装烧瓶，高压灭菌121±1℃15min。

16、血琼脂

成分：

豆粉琼脂pH7.4-7.6100ml

脱绺维羊血（或免血）5-10ml

制法：

加热溶化琼脂，冷却50℃，以无菌手续加入脱纤维羊血，摇匀、倾注平板。

变可分装灭菌试管，置成斜面。

变可用其他营养丰富的基础培养基配制血液琼脂。

17、营养琼脂

成分：

蛋白胨10g琼脂15-20g

牛肉膏3g蒸馏水1000ml

氯化钠5g

制法：

将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内。

加入15%氢氧化钠溶液约2ml，校正pH至7.2-7.4。

加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。

分装烧瓶，高压灭菌121±1℃15min。

附注：

此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面，如用于菌数计数，琼脂量为1.5%，如作成平板或斜面，则应为2%。

18、营养牛肉汤

成分：

蛋白胨10g氯化钠5g

牛肉膏3g蒸馏水1000ml

pH7.4

制法：

按上述成分配合，溶解后校正pH、分装烧瓶，每瓶225ml高压灭菌121±1℃15min。

19、乳糖胆盐发酵管

成分：

蛋白胨20g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml

猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g蒸馏水1000ml

乳糖10g

pH7.4

制法：

将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10ml，并放入一个小试管，高压灭菌121±1℃15min。

附注：

双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

20、乳粮发酵管

成分：

蛋白胨20g0.04%溴甲酚紫水溶液25ml

乳糖10g蒸馏水1000ml

pH7.4

制法：

将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30ml、10ml或3ml，并放入一个小试管，高压灭菌121±1℃15min。

附注：

（1）双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。

（2）30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。

21、缓冲蛋白胨水（BP）

成分：

蛋白胨10g磷酸二氢钠1.5g

氯化钠5G蒸馏水1000ml

磷酸氢二钠（含12H2O）9g

pH7.2

制法：

配好后以大烧瓶装，高压灭菌121±1℃15min。

临用时以无菌操作分装，每瓶225ml。

附注：

本培养基供沙门氏菌前增菌用。

22、氯化镁孔雀绿增菌液（MM）

甲液：

胰蛋白胨5g磷酸二氢钾1.6g

氯化钠8g蒸馏水1000ml

乙液：

氯化镁（CP）40g蒸馏水100ml

丙液：

0.4%孔雀绿水溶液

制法：

分别按上述成分配好后，高压灭菌121±1℃15min备用。

临用时取甲液90ml，乙液9ml，丙液0.9ml，以无菌操作混合即可。

附注：

本培养基变称Rappaport（R）增菌液。

23、四硫磺酸钠煌绿增菌液（TTB）

基础培养基：

多胨或月胨5g硫代硫酸钠30g

胆盐1g蒸馏水1000ml

碳酸钙10g

碘溶液:

碘6g蒸馏水20ml

碘化钾5g

制法：

将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100ml。

分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀，高压灭菌121±1℃15min备用。

临用时每100ml基础培养基中加入碘溶液2ml，0.1%煌绿溶液1ml。

24、亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）

成分：

蛋白胨5g磷酸二氢钾4.5g

乳糖4gL-胱氨酸0.01g

亚硒酸氢钠4g蒸馏水1000ml

磷酸氢二钠5.5g

制法：

将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900ml蒸馏水中，加热煮沸，俊冷备用。

另将亚硒酸氢钠溶解于100mml蒸馏水，加热煮沸，俟冷，以无菌操作与上液混合。

再加入1%L-胱氨酸氢氧化钠溶液1.0ml，分装灭菌瓶中，每瓶100ml，pH应为7.0±0.1,1%L-胱氨酸氢氧化钠溶液。

配称：

称取L-胱氨酸0.1g或DL-胱氨酸0.2g，加1NNaOH1.5ml，使溶解再加入蒸馏水8.5ml即成。

25、GN增菌液

成分：

胰蛋白胨20g甘露醇2g

葡萄糖1g柠檬酸钠5g

去氧胆酸钠0.5g氯化钠5g

磷酸氢二钾4g蒸馏水1000ml

pH7.0

制法：

按上述成分配好，加热使溶解，校正pH，分装每瓶225ml，高压灭菌115℃15min。

26、肠道菌增菌肉汤

成分：

蛋白胨10g磷酸二氢钾2g

葡萄糖5g煌绿0.015g

牛胆盐20g蒸馋水1000ml

磷酸氢二钾8g

pH7.2

制法：

按上述成分配好，加热使溶解，校正pH，分装每瓶30ml，高压115℃15min。

27、亚硫酸饿琼脂（BS）

成分：

蛋白胨10g煌绿0.025g

牛肉膏5g柠檬酸饿铵2g

葡萄糖5g亚硫酸钠6g

硫酸亚铁0.3g琼脂18-20g

磷酸氢二钠4g蒸馋水1000ml

pH7.5

制法：

（1）将前面5分钟成分分别溶解于300ml蒸馏水中。

（2）将柠檬酸饿铵和亚硫酸钠另用50ml蒸馏水溶解。

（3）将琼脂于600ml蒸馏水煮沸溶解，冷至80℃。

（4）将以上三液合并，补充蒸馏水至1000ml，校正pH，加0.5%煌绿水深液5ml，摇匀，冷至50-55℃，倾注平皿。

附注：

此培养不需高压灭菌。

制备过程不宜过分加热，以免降低其选择性，应在临用前一天制备，贮存于室温暗处，超过48h不宜使用。

28、DHL琼脂（deoxycholatehydrogensulfidelactoseagar）

成分：

蛋白胨20g硫代硫酸钠2.3g

牛肉膏3g柠檬酸钠1g

乳糖10g中性红0.03g

庶糖10g琼脂18-20g

去氧胆酸钠1g蒸馏水1000ml

pH7.3

制法：

将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400ml蒸馏水中，校正pH。

再将琼脂于60ml蒸馏水煮沸溶解。

两液合并加入0.5%中性红水溶液6ml，待冷至50-55℃，倾注平板。

29、HE琼脂（hektoenentericagar）

成分：

牛肉膏3g柠檬酸钠18-20g

乳糖12g中性红1000ml

庶糖12g0.4%溴麝香香草酚蓝溶液16ml

水杨酸2gAndrad指示剂20ml

胆盐20g甲液20ml

氯化钠5g乙液

pH7.5

制法：

将前面七种成分分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液将琼脂加入于600ml蒸馏水内，加热溶解。

加入甲液和乙液于基础液内，校正pH，再加入指未剂，并与琼脂液合并，待冷至50-55℃，倾注平板。

附注：

（1）此培养基不可高压灭菌。

（2）甲液的制备：

硫代硫酸钠34g蒸馏水100ml

柠檬酸铁铵4g

（3）乙液的配制：

去氧胆酸钠10g蒸馏水100ml

（4）Andrade指示剂

酸性复红0.5g蒸馏水100ml

1L氢氧化钠溶液16ml

将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液，数小时后如复红退色不全，再加氢氧化钠溶液1-25ml。

30、SS琼脂

基础培养基

牛肉膏5g琼脂19g

月示胨5g蒸馏水1000ml

三号胆盐3.5g

将牛肉膏、月示胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中，将琼脂加入于600ml蒸馏水中，煮沸使其溶解，再将二液混合，高压灭菌121±1℃15min保存备用。

完全培养基

基础培养基1000ml10%柠檬酸铁溶液10ml

乳糖10g1%中性红溶液2.5ml

柠檬酸铁溶液8.5g0.1%煌绿溶液0.33ml

硫代硫酸钠8.5g

加热溶化基础增基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀，校正pH至7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。

附注：

（1）制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于48小时内使用。

（2）煌绿溶液配好后应在10天内使用。

（3）可以购用SS琼脂的干燥培养基。

31、麦康凯琼脂

成分：

蛋白胨17g蒸馏水1000ml

月示胨3g乳糖10g

猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g0.01%结晶紫水溶液10ml

氯化钠5G0.5%中性红水溶液5ml

琼脂17g

制法：

（1）将蛋白胨、月示胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中，校正pH至7.2，将琼脂加入于600ml蒸馏水中，加热溶解。

将两液合并，分装于烧瓶内，高压灭菌121±1℃15min备用。

（2）临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖。

冷至50-55℃时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。

附注：

结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。

32、伊红美蓝琼脂（EMB）

成分：

蛋白胨10g2%伊红Y溶液20ml

乳糖10g0.65%美蓝溶液10ml

磷酸氢二钾2g蒸馏水1000ml

琼脂17g

pH7.1

制法：

将蛋白、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，高压灭菌121±1℃15min备用。

临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50-55℃。

加入伊红和美蓝溶液，摇匀倾注平板。

33、三糖铁琼脂（TSI）

成分：

蛋白胨20g硫酸亚铁6H2O0.02g

牛肉膏5g硫代硫酸钠0.02g

乳糖10g琼脂12g

蔗糖10g酚红0.025g

葡萄糖1g蒸馏水1000ml

氯化钠5g

pH7.4

制法：

将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。

加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。

加入0.2%酚红溶液12.5ml,摇匀。

分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。

高压灭菌121±1℃15min，放置高层斜面备用。

34、三糖铁铁脂（换用方法）

蛋白胨15g氯化钠5g

月示胨5g硫酸亚铁0.2g

牛肉膏3g硫代硫酸钠0.3g

酵母膏3g琼脂12g

乳糖10g酚红0.025g

蔗糖10g蒸馏水1000ml

葡萄糖1g

pH7.4

制法：

将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH。

加入琼脂，加热煮沸，以凉脂琼脂。

加入0.2%酚红水溶液12.5ml，摇匀。

分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。

高压灭菌121±1℃15min放置高层斜面备用。

35、克氏双糖铁琼脂（KI）

上层培养基：

血消化汤pH7.6500ml硫酸亚铁铵0.1g

琼脂6.5g乳糖5g

硫代硫酸钠0.1g0.2%酚红溶液5ml

下层培养基：

血消化汤pH7.6500ml葡萄糖1g

琼脂2g0.2%酚红溶液5ml

制法：

（1）取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。

（2）分别加入其他各种成分。

将上层培养基分装于烧瓶内，将下层培养基分装于灭菌12×100m试管内每管约2ml，高压灭菌11410min。

（3）将上层增基放在56℃水浴箱内保温，将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。

（4）俟下层培养基凝固后，以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面，每管约1.5ml，放成斜面。

36、克氏双糖铁琼脂（换用方法）

成分：

蛋白胨20g葡萄糖1g

牛肉膏3g氯化钠5g

酵母膏3g柠檬酸铁铵0.5g

乳糖10g硫代硫酸钠0.5g

琼脂12g蒸馏水1000ml

酚红0.025g

pH7.4

制法：

将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正pH，加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂，加入0.2%酚红水溶液12.5ml，摇匀、分装试管、装量宜多些，以便得到比较高的底层，高压灭菌121±1℃15min，放置高层斜面备用。

37、半固体琼脂

成分：

蛋白胨1g琼脂0.35-0.4

牛肉膏0.3g蒸馏水1000ml

氯化钠0.5g

pH7.4

制法：

照以上成分配好，煮沸使溶解，并校正pH。

分装小试管，高压灭菌1211℃15min。

直立凝固备用。

附注：

供动力观察、菌种保存、H抗原位相变异试验等用。

38、Elek氏培养基（毒素测定用）

成分：

月示胨20g琼脂15g

麦芽糖3g4%氢氧化钠溶液1.5ml

乳糖0.7g蒸馏水1000ml

氯化钠5g

pH7.8

制法：

用500ml蒸馏水溶解除琼脂以外的成分，煮沸、并用滤纸过滤、用1MNaOH，校正pH。

用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂.再将两液混合,分装试管10ml或20ml。

高压灭菌121℃15min。

临用时加热溶化琼脂倾注平板。

39、氯化钠结晶紫增菌液

成分：

蛋白胨20g0.01%结晶紫溶液5ml

氯化钠40g蒸馏水1000ml

pH9.0

制法：

除结晶紫外，其他按上述成分配好，加热溶解。

约加30%氢氧化钾液4.5ml，校正pH。

加热煮沸，过滤。

再加入结晶紫溶液，混和后分装试管。

高压灭菌121℃15min。

40、氯化钠蔗糖琼脂

成分：

蛋白胨10g氯化钠50G

牛肉膏10g蔗糖10g

琼脂18g蔗糖1000ml

0.2%溴麝香草酚蓝深液20ml

制法：

将牛肉膏、蛋白胨及氯化钠溶解于蒸馏水中，校正pH7.8，加入琼脂，加热溶解。

加入指示剂，分装烧瓶100ml，高压灭菌121℃15min备用。

临用前在100ml培养基内加入蔗糖1g，加热溶化并冷至50℃，倾注平板。

41、嗜盐菌选择性琼脂

成分：

蛋白胨2g0.01%结晶紫溶液5ml

氯化钠40g蒸馏水1000ml

琼脂17g

pH7.7

制法：

配制2%蛋白胨水，校正pH，共配5制瓶，每瓶100ml。

每瓶分别加入不同量的氯化钠：

（！

）不加；

（2）3g;（3）7g（4）9g（5）11g。

待溶解后分装试管，高压灭菌121℃15min。

43、氯化镁孔雀绿肉汤

成分：

1%胰胨水（高压灭菌）156ml

M/15Na2HPO4溶液（高压灭菌）40ml

4%（W/N）MgC126H2O水溶液（100℃煮沸数分钟）53ml

0.2%孔雀绿溶液1.6ml

制法：

将上述几种溶液，按列出的容量混合，即成氯化镁孔雀绿肉汤，分装试管，每管10ml，于4℃可保存10个月。

如若配氯化镁孔雀绿羧苄青霉肉汤，除上述几种溶液外，再配制羧苄青霉素（carpenicilin）溶液（溶解1mg于1ml水中），将此溶液与其他溶液混合，即成。

44、Baird-parker氏培养基

成分：

胰蛋白胨10g甘氨酸12g

牛肉膏5g氯化锂（含6H2O）5g

酵母膏1g琼脂20g

丙酮酸钠10g蒸馏水950ml

pH7.0±0.2

制法:

将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。

冷至25℃，校正pH。

分装每瓶95ml，高压灭菌121℃15min。

临用时加热溶化琼脂，冷至50℃，每95ml加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5ml，摇匀后倾注平板。

培养基应是致密不透明的，使用前在冰箱储存不得超过48h。

增菌剂的配法：

30%卵黄盐水50ml与除菌过的1%亚碲酸钾溶液10ml混合，保存于冰箱内。

45、7.5%氯化钠肉汤

成分：

蛋白胨10g氯化钠75g

牛肉膏3g蒸馏水1000ml

pH7.4

制法：

将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，高压灭菌121℃15min。

46、匹克氏肉汤

成分:

含1%胰蛋白胨的牛心浸液（无牛心用牛肉代替）200ml

1：

25000结晶紫盐水溶液10ml

1：

800三氮化钠溶液10ml

脱纤维免血（或羊血）100ml

制法：

将上述已灭菌的各种成分，用无菌手续依次混合，分装于小三角烧瓶内，每瓶50ml。

保存于冰箱内备用。

47、疱肉培养基

成分：

牛肉浸液1000ml葡萄糖3g

蛋白胨30g可溶性淀粉2g

酵母膏5g碎肉渣适量

磷酸二氢钠5g

pH7.8

制法：

（1）称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g加蒸馏水1000ml和1M氢氧化钠溶液25ml，搅拌煮沸15mi