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附录二常用的培养基及试剂.docx

1、附录二常用的培养基及试剂附录二 常用的培养基及试剂1、糖发酵管成分:牛肉膏 5g 磷酸氢二钠 2g蛋白胨 10g 0.2溴麝香草本分蓝深液 12 ml氯化钠 3g 蒸馏水 1000 mlpH7。4制法:(1)葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装有一个倒置小管的小试管内,高压灭菌12115min。(2)其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100ml,高压灭菌12115min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将糖溶液5ml加入100ml培养基内以无菌操作分装小试管。试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于361培养,一观观察2-3天,迟缓反应应需观察1

2、4-30天。附注:蔗粮不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。2、ONPG增减基成分:邻基粉-D-半乳糖苷(ONPG) 60mg(O-Nitropheny1-D-galactopyranoside)001%MpH7.5磷酸钠缓冲液 10ml1%蛋白胨(pH7.5) 30ml制法:将ONPG溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以滤过法除菌,分装1075mm试管,每管0.5ml,用橡皮塞塞紧。试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物,满环接种,于361培养1-3h和24h观察结果。如有-半乳糖苷酶产生则于1-3h变黄色,如无此酶则24h不变色。3、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾 5g

3、葡萄糖 5g 多胨 7g 蒸馏水 1000ml制法:溶化后校正pH,分装试管每管1ml,高压灭菌12115min。甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,放361培养2-5天,哈夫尼亚菌则应在22-25培养。滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性。甲基红试剂配法:甲基工10mg溶于30ml95%酒精中,然后加入20ml蒸馏水。V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,放361培养2-4天。哈夫尼亚菌则应在22-25培养。加入6%。A萘酒精溶液0.5ml和40%氢氧化钾溶液0.2ml,充分振摇试管,观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在

4、3614h再进行观察。4、西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠 5G柠檬酸钠 5g硫酸镁(MgS04 7H20) 0.2g琼脂 20g磷酸二氢铵 1g蒸馏水 1000ml磷酸氢二钾 1g0.2%溴麝香草本分蓝溶液 40mlpH6.8制法:先将盐类溶解于内,校正pH再加琼脂,加热溶化然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,高压灭菌12115min,放成斜面。试验方法:挑取少量琼脂增物接种,于361培养4天,每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色。5、丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏 1g 氯化钠 2 g磷酸氢二钾 0.6g 0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12ml磷酸二氢钾 0.4g 蒸馏水

5、1000mlpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,分装每瓶100ml 分别加入各种氨基酸。赖氨酸和鸟氨酸按0.5%加入,dl-氨基酸按1%加入。再行校正pH至6.8。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小式管内管每0.5ml,上面滴加一层液体石蜡,高压灭菌11510min。试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于3618-24h,观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使增基变为黄色。对照管应为黄色。9、蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨) 20g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5g pH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,高

6、温灭菌12115min。靛基质试剂:(1)柯凡克试剂 将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75ml戊醇中然后缓慢加入浓盐酸25ml。(2)殴-波试剂 将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95%酒精95ml,然后缓慢加入浓盐酸25ml。试验方法:挑取小量培养物接种,在361培养1-2天,必要时可培养4-5天。加入柯凡克试剂0.5ml,轻摇试管,阳性者于试剂层呈红色。或加入殴-波试剂约0.5ml,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。附注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌咱鉴定后方可使用。10、尿素琼脂成分:蛋白胨 1g 0.4%本分红溶液 3ml氯化钠 5g 琼脂

7、 20g葡萄糖 1g 蒸馏水 1000ml磷酸二氢钾 2g 20%尿素溶液(后加)100mlpH7.20.1制法: 先将尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶,高压灭菌12115min。冷至50-55,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最后pH应为7.20.1。分装于灭菌试管内,放成斜面备用。试验方法:挑取琼脂培养物接种,在361培养24h观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。11、氰化钾培养基成分:蛋白胨 10g 磷酸氢二钠 5.64g氰化钠 5g 蒸馏水 1000ml磷酸二氢钾 0.225g 0.5%氰化钾溶液(后加) 20ml制法:将

8、除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,高压灭菌121115min,放在冰箱内使其充分冷却。每100ml培养基加入0.5%氰化钾20ml(最后浓度为1:10000),分装于12100mm灭菌试管,每管约4ml,立刻用灭菌橡皮塞塞紧。放在4冰箱内,至少可保存两个月。同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。试验方法:将琼脂培养物 种于蛋白胨水内成为稀释菌液,挑取1环接种于KCN培养基,并另挑取1环接种于对照培养基。在361培养1-2天,观察结果。如有细菌生长即为阳性(不抑制),经2天细菌不生长为阴性(抑制)。附注:氰化钾是剧毒物,使用时应小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分装培养基应在冰箱内

9、进行。试验失败主要原因是超过计划口不平,氰化钾逐渐分解产生氢氰酸气体逸出,以致药物浓度降低,细菌生长,因而造成假阳性反应。试验时对每一环节都要特别注意。12、氧化酶试验试剂:(1)1%盐酸二甲基对苯二胺溶液,少量新鲜配制,于冰箱内避光保存。试验方法:(1)取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈粉红色,并逐渐加深。(2)以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同。13、明胶磷酸盐缓液成分:明胶 2g 蒸馏水 1000ml磷酸氢二钠 4gpH6.2制法:加热溶解,校正pH,高压灭菌121115min。14、乳酸苯酚溶液成分:苯酚 10g 甘油 2g乳酸(比重

10、1.21) 10g 蒸馏水 1000ml制法:将酚在水上加热溶解,然后加入乳酸及甘油用途:检验真菌形态。15、肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉 500g 磷酸氢二钾 2g氯化钠 5 g 蒸馏水 1000ml蛋白胨 10g 制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g,加蒸馏水100ml,混合后放冰箱过液,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒纸过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量,加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4-7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,高压灭菌121115min。16、血琼脂成分:豆粉琼脂pH7.4-7.6 100ml脱绺维羊血(或免血) 5-10ml制法:加热溶化

11、琼脂,冷却50,以无菌手续加入脱纤维羊血,摇匀、倾注平板。变可分装灭菌试管,置成斜面。变可用其他营养丰富的基础培养基配制血液琼脂。17、营养琼脂成分:蛋白胨 10g 琼脂 15-20g牛肉膏 3g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5g制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内。加入15%氢氧化钠溶液约2ml,校正pH至7.2-7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装烧瓶,高压灭菌121115min。附注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面,如用于菌数计数,琼脂量为1.5%,如作成平板或斜面,则应为2%。18、营养牛肉汤成分:蛋白胨 10g 氯化钠 5g牛肉膏 3g 蒸馏水 100

12、0mlpH7.4制法:按上述成分配合,溶解后校正pH、分装烧瓶,每瓶225ml高压灭菌121115min。19、乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨 20g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g 蒸馏水 1000ml乳糖 10gpH7.4制法:将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10ml,并放入一个小试管,高压灭菌121115min。附注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。20、乳粮发酵管成分:蛋白胨 20g 0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml乳糖 10g 蒸馏水 1000mlpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要

13、求分装30ml、10ml或3ml,并放入一个小试管,高压灭菌121115min。附注:(1)双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。(2)30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。21、缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨 10g 磷酸二氢钠 1.5g氯化钠 5G 蒸馏水 1000ml磷酸氢二钠(含12H2O) 9gpH7.2制法:配好后以大烧瓶装,高压灭菌121115min。临用时以无菌操作分装,每瓶225ml。附注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。22、氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液:胰蛋白胨 5g 磷酸二氢钾 1.6g氯化钠 8g 蒸馏水 1000m

14、l乙液:氯化镁(CP) 40g 蒸馏水 100ml丙液:0.4%孔雀绿水溶液制法:分别按上述成分配好后,高压灭菌121115min备用。临用时取甲液90ml,乙液9ml,丙液0.9ml,以无菌操作混合即可。附注:本培养基变称Rappaport(R)增菌液。23、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基:多胨或月胨 5g 硫代硫酸钠 30g胆盐 1g 蒸馏水 1000ml碳酸钙 10g碘溶液:碘 6g 蒸馏水 20ml碘化钾 5g制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100 ml。分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀,高压灭菌121115min备用。临用时每100ml基础培养

15、基中加入碘溶液2ml,0.1%煌绿溶液1ml。24、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨 5g 磷酸二氢钾 4.5g乳糖 4g L-胱氨酸 0.01g亚硒酸氢钠 4g 蒸馏水 1000ml磷酸氢二钠 5.5g制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900ml蒸馏水中,加热煮沸,俊冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mml蒸馏水,加热煮沸,俟冷,以无菌操作与上液混合。再加入1%L-胱氨酸氢氧化钠溶液1.0ml,分装灭菌瓶中,每瓶100ml,pH应为7.00.1,1%L-胱氨酸氢氧化钠溶液。配称:称取 L-胱氨酸0.1g或DL-胱氨酸0.2g,加1NNaOH1.5ml,使溶解再加入蒸馏

16、水8.5ml即成。25、GN增菌液成分:胰蛋白胨 20g 甘露醇 2g葡萄糖 1g 柠檬酸钠 5g去氧胆酸钠 0.5g 氯化钠 5g磷酸氢二钾 4g 蒸馏水 1000mlpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH,分装每瓶225ml,高压灭菌11515min。26、肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨 10g 磷酸二氢钾 2g葡萄糖 5g 煌绿 0.015g牛胆盐 20g 蒸馋水 1000ml磷酸氢二钾 8gpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH,分装每瓶30ml,高压11515min。27、亚硫酸饿琼脂(BS)成分:蛋白胨 10g 煌绿 0.025g牛肉膏 5g 柠檬酸饿铵 2

17、g葡萄糖 5g 亚硫酸钠 6g硫酸亚铁 0.3g 琼脂 18-20g磷酸氢二钠 4g 蒸馋水 1000mlpH7.5制法: (1)将前面5分钟成分分别溶解于300ml蒸馏水中。 (2)将柠檬酸饿铵和亚硫酸钠另用50ml蒸馏水溶解。(3)将琼脂于600ml蒸馏水煮沸溶解,冷至80。(4)将以上三液合并,补充蒸馏水至1000ml,校正pH,加0.5%煌绿水深液5ml,摇匀,冷至50-55,倾注平皿。附注:此培养不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性,应在临用前一天制备,贮存于室温暗处,超过48h不宜使用。28、DHL琼脂(deoxycholate hydrogen sulfide l

18、actose agar)成分:蛋白胨 20g 硫代硫酸钠 2.3g牛肉膏 3g 柠檬酸钠 1g乳糖 10g 中性红 0.03g庶糖 10g 琼脂 18-20g去氧胆酸钠 1g 蒸馏水 1000mlpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400ml蒸馏水中,校正pH。再将琼脂于60ml蒸馏水煮沸溶解。两液合并加入0.5%中性红水溶液6ml,待冷至50-55,倾注平板。29、HE琼脂(hektoen enteric agar)成分:牛肉膏 3g 柠檬酸钠 18-20g乳糖 12g 中性红 1000ml庶糖 12g 0.4%溴麝香香草酚蓝溶液 16ml水杨酸 2g Andrad指示剂 20m

19、l胆盐 20g 甲液 20ml氯化钠 5g 乙液pH7.5制法:将前面七种成分分溶解于400ml 蒸馏水内作为基础液将琼脂加入于600ml蒸馏水内,加热溶解。加入甲液和乙液于基础液内,校正pH,再加入指未剂,并与琼脂液合并,待冷至50-55,倾注平板。附注:(1)此培养基不可高压灭菌。(2)甲液的制备:硫代硫酸钠 34g 蒸馏水 100ml柠檬酸铁铵 4g(3)乙液的配制:去氧胆酸钠 10g 蒸馏水 100ml(4)Andrade指示剂 酸性复红 0.5g 蒸馏水 100ml 1L氢氧化钠溶液 16ml将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液,数小时后如复红退色不全,再加氢氧化钠溶液1-25ml

20、。30、SS琼脂基础培养基牛肉膏 5g 琼脂 19g月示胨 5g 蒸馏水 1000ml三号胆盐 3.5g将牛肉膏、月示胨和胆盐溶解于400ml蒸馏水中,将琼脂加入于600ml蒸馏水中,煮沸使其溶解,再将二液混合,高压灭菌121115min保存备用。完全培养基基础培养基 1000ml 10%柠檬酸铁溶液 10ml乳糖 10g 1%中性红溶液 2.5ml柠檬酸铁溶液 8.5g 0.1%煌绿溶液 0.33ml硫代硫酸钠 8.5g加热溶化基础增基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正pH至7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板。附注:(1)制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48小时

21、内使用。(2)煌绿溶液配好后应在10天内使用。(3)可以购用SS琼脂的干燥培养基。31、麦康凯琼脂成分:蛋白胨 17g 蒸馏水 1000 ml月示胨 3g 乳糖 10g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g 0.01%结晶紫水溶液 10ml 氯化钠 5G 0.5%中性红水溶液 5ml琼脂 17g制法:(1)将蛋白胨、月示胨、胆盐和氯化钠溶解于400ml蒸馏水中,校正pH至7.2,将琼脂加入于600ml蒸馏水中,加热溶解。将两液合并,分装于烧瓶内,高压灭菌121115min备用。(2)临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖。冷至50-55时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板。附注:结晶紫及中性红水溶液配好

22、后须经高压灭菌。32、伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨 10g 2%伊红Y溶液 20ml乳糖 10g 0.65%美蓝溶液 10ml磷酸氢二钾 2g 蒸馏水 1000ml琼脂 17gpH7.1制法:将蛋白、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,高压灭菌121115min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50-55。加入伊红和美蓝溶液,摇匀倾注平板。33、三糖铁琼脂(TSI)成分:蛋白胨 20g 硫酸亚铁6H2O 0.02g牛肉膏 5g 硫代硫酸钠 0.02g乳糖 10g 琼脂 12g蔗糖 10g 酚红 0.025g葡萄糖 1g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5gpH7.4制法

23、:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红溶液12.5ml,摇匀。分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。高压灭菌121115min,放置高层斜面备用。34、三糖铁铁脂(换用方法)蛋白胨 15g 氯化钠 5g月示胨 5g 硫酸亚铁 0.2g牛肉膏 3g 硫代硫酸钠 0.3g酵母膏 3g 琼脂 12g乳糖 10g 酚红 0.025g蔗糖 10g 蒸馏水 1000ml葡萄糖 1gpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中, 校正pH。加入琼脂,加热煮沸,以凉脂琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀。分装试管,装量宜

24、多些,以便得到较高的底层。高压灭菌121115min放置高层斜面备用。35、克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基:血消化汤pH7.6 500ml 硫酸亚铁铵 0.1g琼脂 6.5g 乳糖 5g硫代硫酸钠 0.1g 0.2%酚红溶液 5ml下层培养基:血消化汤pH7.6 500ml 葡萄糖 1g琼脂 2g 0.2%酚红溶液 5ml制法:(1)取血消化汤按上层和下层的琼脂用量,分别加入琼脂,加热溶解。(2)分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内,将下层培养基分装于灭菌12100m试管内每管约2ml,高压灭菌114 10min。(3)将上层增基放在56水浴箱内保温,将下层培养基直立放在室温内,使

25、其凝固。(4)俟下层培养基凝固后,以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5ml,放成斜面。36、克氏双糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨 20g 葡萄糖 1g牛肉膏 3g 氯化钠 5g酵母膏 3g 柠檬酸铁铵 0.5g乳糖 10g 硫代硫酸钠 0.5g琼脂 12g 蒸馏水 1000ml酚红 0.025gpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸以溶化琼脂,加入0.2%酚红水溶液12.5ml,摇匀、分装试管、装量宜多些,以便得到比较高的底层,高压灭菌121115min,放置高层斜面备用。37、半固体琼脂成分:蛋白胨 1g 琼脂 0.35

26、-0.4牛肉膏 0.3g 蒸馏水 1000ml氯化钠 0.5gpH7.4制法:照以上成分配好,煮沸使溶解,并校正pH。分装小试管,高压灭菌121115min。直立凝固备用。附注:供动力观察、菌种保存、H抗原位相变异试验等用。38、Elek氏培养基(毒素测定用)成分:月示胨 20g 琼脂 15g麦芽糖 3g 4%氢氧化钠溶液 1.5ml乳糖 0.7g 蒸馏水 1000ml氯化钠 5gpH7.8制法:用500ml蒸馏水溶解除琼脂以外的成分,煮沸、并用滤纸过滤、用1M NaOH,校正pH。用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂.再将两液混合,分装试管10ml或20ml。高压灭菌12115min。临用时加

27、热溶化琼脂倾注平板。39、氯化钠结晶紫增菌液成分:蛋白胨 20g 0.01%结晶紫溶液 5ml氯化钠 40g 蒸馏水 1000mlpH9.0制法:除结晶紫外,其他按上述成分配好,加热溶解。约加30%氢氧化钾液4.5ml,校正pH。加热煮沸,过滤。再加入结晶紫溶液,混和后分装试管。高压灭菌12115min。40、氯化钠蔗糖琼脂成分:蛋白胨 10g 氯化钠 50G牛肉膏 10g 蔗糖 10g琼脂 18g 蔗糖 1000ml0.2%溴麝香草酚蓝深液 20ml制法:将牛肉膏、蛋白胨及氯化钠溶解于蒸馏水中,校正pH7.8,加入琼脂,加热溶解。加入指示剂,分装烧瓶100ml,高压灭菌12115min备用。

28、临用前在100ml培养基内加入蔗糖1g,加热溶化并冷至50,倾注平板。41、嗜盐菌选择性琼脂成分:蛋白胨 2g 0.01%结晶紫溶液 5ml氯化钠 40g 蒸馏水 1000ml琼脂 17g pH7.7制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配5制瓶,每瓶100ml。每瓶分别加入不同量的氯化钠:(!)不加;(2)3g;(3)7g(4)9g(5)11g。待溶解后分装试管,高压灭菌12115min。43、氯化镁孔雀绿肉汤成分:1%胰胨水(高压灭菌) 156mlM/15Na2HPO4溶液(高压灭菌) 40ml4%(W/N)MgC126H2O水溶液(100煮沸数分钟)53ml0.2%孔雀绿溶液 1.6ml制

29、法:将上述几种溶液,按列出的容量混合,即成氯化镁孔雀绿肉汤,分装试管,每管10ml,于4可保存10个月。如若配氯化镁孔雀绿羧苄青霉肉汤,除上述几种溶液外,再配制羧苄青霉素(carpenicilin)溶液(溶解1mg于1ml水中),将此溶液与其他溶液混合,即成。44、Baird-parker氏培养基成分:胰蛋白胨 10g 甘氨酸 12g牛肉膏 5g 氯化锂(含6H2O) 5g酵母膏 1g 琼脂 20g丙酮酸钠 10g 蒸馏水 950mlpH7.00.2制法:将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。冷至25,校正pH。分装每瓶95ml,高压灭菌12115min。临用时加热溶化琼脂,冷至50,每9

30、5ml加入预热至50的卵黄亚碲酸钾增菌剂5ml,摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的,使用前在冰箱储存不得超过48h。增菌剂的配法:30%卵黄盐水50ml与除菌过的1%亚碲酸钾溶液10ml混合,保存于冰箱内。45、7.5%氯化钠肉汤成分:蛋白胨 10g 氯化钠 75g牛肉膏 3g 蒸馏水 1000ml pH7.4制法:将上述成分加热溶解,校正pH,分装试管,高压灭菌12115min。46、匹克氏肉汤成分:含1%胰蛋白胨的牛心浸液(无牛心用牛肉代替) 200ml1:25000结晶紫盐水溶液 10ml1:800三氮化钠溶液 10ml脱纤维免血(或羊血) 100ml制法:将上述已灭菌的各种成分,用无菌手续依次混合,分装于小三角烧瓶内,每瓶50ml。保存于冰箱内备用。47、疱肉培养基成分:牛肉浸液 1000ml 葡萄糖 3g蛋白胨 30g 可溶性淀粉 2g酵母膏 5g 碎肉渣 适量磷酸二氢钠 5gpH7.8制法:(1)称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g加蒸馏水1000ml和1M氢氧化钠溶液25ml,搅拌煮沸15mi

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