常用化学试剂配制.docx
《常用化学试剂配制.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《常用化学试剂配制.docx(9页珍藏版)》请在冰豆网上搜索。
常用化学试剂配制
生物化学实验常用试剂的配制方法
1、0.5mol/L氢氧化钠溶液
□组份浓度0.5mol/L
□配制量2L
□配置方法1.准确称取氢氧化钠40g。
2.用去离子水溶解并稀释至2L。
2、0.5mol/L盐酸溶液
□组份浓度0.5mol/L
□配制量2L
□配置方法1.准确量取盐酸83.4mL。
2.用去离子水稀释至2L。
3、含0.5mol/L氯化钠的0.5mol/L氢氧化钠溶液
□组份浓度0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠
□配制量1L
□配置方法1.准确量取氯化钠29.3g。
2.准确量取氢氧化钠20g。
3.用去离子水稀释至1L。
注意:
此溶液供回收纤维素时使用。
4、0.2%葡萄糖标准溶液
□组份浓度0.2%
□配制量1L
□配置方法1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70℃干燥2小时。
2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。
3.准确称取葡萄糖2.000g。
4.用去离子水溶解并定容至1L
5.于4℃保存。
5、250μg/mL牛血清白蛋白标准液
□组份浓度250μg/mL
□配制量2L
□配置方法1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。
2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。
3.4℃保存。
6、Folin试剂甲
□配置方法1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。
2.称取0.5g酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0.25g硫酸铜?
5水,溶解。
3.将1:
2:
去离子水按20:
4:
1的比例混合即可。
4.4℃保存,可用一周。
7、Folin试剂乙
□配置方法1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?
2水25.0359g,钼酸钠?
2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL,浓盐酸25mL,充分混合。
2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。
3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。
4.于棕色瓶中保存,可使用多年注意:
上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2
mol/L左右,几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的浓度作为应用液,我们这时是把贮备液于使用前稀释18倍,使之浓度为0.1mol/L略高。
这种稀释18倍后的Folin试剂乙就是上文称之为的“应用液”。
Folin试剂乙贮备液浓度的标定,一般是以酚酞为指示剂。
用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液,当溶液颜色由红变为紫灰,再突然变成墨绿即为终点,如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙,终点不太好掌握,溶液地颜色是由浅黄变为浅绿,再变为灰紫色为终点。
8、DNS试剂(3,5-二硝基水杨酸试剂)
□配置方法1.取3,5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200mL。
2.将3,5-二硝基水杨酸溶解,然后加入酒石酸钾钠300g。
3.待其完全溶解,用去离子水稀释至2000mL,棕色瓶保存。
9、5%蔗糖溶液
□组份浓度5%
□配制量1L
□配置方法称取蔗糖50g,用去离子水溶解定容至1L。
10、0.1mol/L蔗糖溶液
□组份浓度0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法称取蔗糖34.230g,用去离子水溶解并定容至1L。
11、20%乙酸溶液
□组份浓度20%
□配制量1.2L
□配置方法量取冰乙酸300mL,用去离子水稀释至1200mL。
12、30%(W/V)Acrylamide
□组份浓度30%(W/V)Acrylamide0.05%
□配制量1L
□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Acrylamide290g、BIS10g2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意:
丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用有积累性,配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。
13、40%(W/V)Acrylamide
□组份浓度40%(W/V)Acrylamide0.05%
□配制量1L
□配置方法1.称量下列试剂,置于1L烧杯中Acrylamide380g、BIS20g2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45μm滤膜滤去杂质。
4.于棕色瓶中4℃保存。
注意:
丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用有积累性,
配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。
14、10%(W/V)过硫酸铵
□组份浓度10%(W/V)过硫酸铵
□配制量10mL
□配置方法1.称取1g过硫酸铵。
2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。
3.贮存于4℃。
注意:
10%过硫酸胺溶液在4℃保存时间可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。
15、考马斯亮蓝R-250染色液
□组份浓度0.1%(W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇,
10%(V/V)冰醋酸
□配制量1L
□配置方法1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。
2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。
3.加入100mL的冰乙醋酸,均匀搅拌。
4.加入650mL的去离子水,均匀搅拌。
5.用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。
16、考马斯亮蓝染色脱色液
□组份浓度10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇
□配制量1L
□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
醋酸100mL、乙醇50mL、H2O850mL2.充分混合后使用。
17、凝胶固定液(SDS-PAGE银氨染色用)
□组份浓度50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸
□配制量100L
□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
甲醇500mL、醋酸100mL、H2O400mL2.均匀混合后室温保存。
18、凝胶处理液(SDS-PAGE银氨染色用)
□组份浓度50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛
□配制量1L
□配置方法1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。
甲醇50mL、戊二醛10mL、H2O40mL2.均匀混合后室温保存。
19、凝胶染色液(SDS-PAGE银氨染色用)
□组份浓度0.4%(W/V)硝酸银,1%(V/V)浓氨水,0.04%(W/V)氢氧化钠
□配制量100L
□配置方法1.量取下列试剂,加入100~200mL试剂瓶中。
20%硝酸银2mL
浓氨水1mL4%氢氧化钠1mLH2O96mL2.均匀混合。
该溶液应为无色透明
状。
如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。
3.本染色液应现用现配,不宜保存。
20、显影液(SDS-PAGE银氨染色用)
□组份浓度0.005%(V/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛
□配制量1L
□配置方法1.称取下列试剂,置于1L试剂瓶中。
柠檬酸50mg甲醛0.2mL
2.加入1L去离子水后,摇动混合后溶解。
3.室温保存。
21、45%乙醇溶液
□组份浓度45%
□配制量1L
□配置方法量取无水乙醇450mL,加入去离子水550mL,混匀。
22、5%的十二烷基硫酸钠溶液(W/V)
□组份浓度5%
□配制量0.1L
□配置方法称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4%的乙醇溶液中。
23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂
□配置方法取500mL三氯甲烷试剂,加入21mL异戊醇试剂,混匀。
24、1.6%乙醛溶液
□组份浓度1.6%
□配制量0.1L
□配置方法取47%乙醛3.4mL,用去离子水定容至100mL。
25、二苯胺试剂
□配置方法1.称取二苯胺试剂0.8g,溶解于180mL冰乙酸中,2.再加入8mL高氯酸混匀。
3.临用前加入0.8mL1.6%乙醛溶液。
注意:
配制完成后试剂应为无色。
26、15%三氯乙酸溶液
□组份浓度15%
□配制量2L
□配置方法称取三氯乙酸300g,用去离子水溶解定容至2000mL。
27、1%谷氨酸溶液
□组份浓度1%
□配制量0.5L
□配置方法1.称取5g谷氨酸,先用适量得用去离子水溶解。
2.再用氢氧化钾溶液中和至中性。
3.最后用去离子水定容至0.5L。
28、1%丙酮酸溶液
□组份浓度1%
□配制量0.5L
□配置方法1.称取5g丙氨酸,先用适量得用去离子水溶解。
2.再用氢氧化钾溶液中和至中性。
3.最后用去离子水定容至0.5L。
29、0.1%的碳酸氢钾溶液
□组份浓度0.1%
□配制量0.5L
□配置方法称取碳酸氢钾0.5g,用去离子水溶解定容至0.5L。
30、0.05%的碘乙酸溶液
□组份浓度0.05%
□配制量0.25L
□配置方法称取0.125g碘乙酸,用去离子水溶解定容至0.25L。
31、Locke氏溶液
□配制量2L
□配置方法称取18g氯化钠,0.84g氯化钾,0.48g氯化钙,0.3g碳酸氢钠,2g葡萄糖,用去离子水溶解定容至2000mL。
32、0.2mol/L的丁酸溶液
□组份浓度0.2mol/L
□配制量1L
□配置方法1.量取18mL正丁酸试剂。
2.用1mol/L的氢氧化钠中和。
3.再用去离子水定容至1L。
33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液
□组份浓度0.1mol/L
□配制量10L
□配置方法称248.17g硫代硫酸钠,用去离子水溶解并定至10L。
34、0.1mol/L的碘溶液
□组份浓度0.1mol/L
□配制量1L
□配置方法1.称取碘12.7g和碘化钾25g。
2.用去离子水溶解并定容至1L。
3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。
35、10%氢氧化钠溶液
□组份浓度10%
□配制量2L
□配置方法称取200g氢氧化钠,用去离子水溶解并定容至2L。
36、10%盐酸溶液
□组份浓度10%
□配制量0.2L
□配置方法量取浓盐酸49.3mL,用去离子水定至0.2mL。
37、0.1%标准丙氨酸溶液
□组份浓度0.1%
□配制量0.5L
□配置方法称取丙氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至0.5mL。
38、0.1%标准谷氨酸溶液
□组份浓度0.1%
□配制量0.5L
□配置方法称取谷氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至500mL。
39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液
□组份浓度0.1%
□配制量1L
□配置方法称取1g水合茚三酮试剂,溶于1000mL无水乙醇中。
40、酚溶液
□配置方法在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g苯酚,在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。
将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000mL分液漏斗内,轻轻振荡混合,使其成为乳状液。
静止7~10小时,乳状液变成两层透明溶液,下层为被水饱和的酚溶液,放出下层,贮存于棕色瓶中备用。
41、0.5%淀粉溶液
□组份浓度0.5%
□配制量0.1L
□配置方法称取淀粉0.5g,用去离子水溶解定容至0.1L。
42、对羟基联苯试剂
□配置方法称取对羟基联苯1.5g,溶于100mL0.5%氢氧化钠溶液中,配制成1.5%的溶液。
若对羟基联苯颜色较深,应用丙酮或无水乙醇重结晶,放置时间较长后,会出项针状结晶,应摇匀后使用。