常用化学试剂配制.docx

1、常用化学试剂配制生物化学实验常用试剂的配制方法 1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 组份浓度 0.5mol/L 配制量 2L 配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。 2、0.5mol/L盐酸溶液 组份浓度 0.5mol/L 配制量 2L 配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离子水稀释至2L。 3、含 0.5mol/L氯化钠的 0.5mol/L氢氧化钠溶液 组份浓度 0.5mol/L氯化钠、0.5mol/L氢氧化钠 配制量 1L 配置方法 1.准确量取氯化钠29.3g。 2.准确量取氢氧化钠20g。 3.用去离子水稀释至1L。注意:此溶液供回收纤维素

2、时使用。 4、0.2%葡萄糖标准溶液 组份浓度 0.2% 配制量 1L 配置方法 1.称取葡萄糖2.5g置于称量瓶中,在70干燥2小时。 2.干燥器中冷却至室温,重复干燥,冷却至恒重。 3.准确称取葡萄糖2.000g。 4.用去离子水溶解并定容至1L 5.于4保存。 5、250g/mL牛血清白蛋白标准液 组份浓度 250g/mL 配制量 2L 配置方法 1.准确称取250mg标准牛血清白蛋白。 2.用0.03mol/LpH7.8的磷酸缓冲液溶解并定容至1L。 3.4保存。 6、Folin试剂甲 配置方法 1.称取10g氢氧化钠溶于400mL去离子水中,加入50g无水碳酸钠,溶解,待用。2.称取

3、0.5g酒石酸钾钠,溶于80mL去离子水中,加入0. 25g硫酸铜?5水,溶解。3.将1:2:去离子水按20:4:1的比例混合即可。 4. 4保存,可用一周。 7、Folin试剂乙 配置方法 1.在500mL的磨口回流装置内加入钨酸钠?2水25.0359g,钼酸钠?2水6.2526g,去离子水175mL,85%磷酸12.5mL,浓盐酸25mL,充分混合。 2.回流10小时,再加硫酸锂37.5g,去离子水12.5mL及数滴溴。 3.然后开口沸腾15min,以驱除过量的溴,冷却后定容到250mL。 4.于棕色瓶中保存,可使用多年注意:上述制备地Folin试剂乙地贮备液浓度一般在2 mol/L左右,

4、几种操作方案都是把Folin试剂乙稀释至1mol/L的浓度作为应用液,我们这时是把贮备液于使用前稀释18 倍,使之浓度为0.1mol/L略高。这种稀释18倍后的Folin 试剂乙就是上文称之为的“应用液”。Folin 试剂乙贮备液浓度的标定,一般是以酚酞为指示剂。用Folin试剂乙去滴定1mol/L左右的标准氢氧化钠溶液,当溶液颜色由红变为紫灰,再突然变成墨绿即为终点,如果用氢氧化钠去滴定Folin试剂乙,终点不太好掌握,溶液地颜色是由浅黄变为浅绿,再变为灰紫色为终点。 8、DNS试剂(3,5-二硝基水杨酸试剂) 配置方法 1.取3,5-二硝基水杨酸10g,加入2mol/L氢氧化钠溶液200m

5、L。 2.将3,5-二硝基水杨酸溶解,然后加入酒石酸钾钠300g。 3. 待其完全溶解,用去离子水稀释至2000mL,棕色瓶保存。 9、5%蔗糖溶液 组份浓度 5% 配制量 1L 配置方法称取蔗糖50g,用去离子水溶解定容至1L。 10、0.1mol/L蔗糖溶液 组份浓度 0.1mol/L 配制量 1L 配置方法称取蔗糖34.230g,用去离子水溶解并定容至1L。 11、20%乙酸溶液 组份浓度 20% 配制量 1.2L 配置方法量取冰乙酸300mL,用去离子水稀释至1200mL。 12、30%(W/V)Acrylamide 组份浓度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% 配制量

6、1L 配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Acrylamide 290g 、BIS 10g 2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45m滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4保存。注意:丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用有积累性,配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。 13、40%(W/V)Acrylamide 组份浓度 40%(W/V)Acrylamide 0.05% 配制量 1L 配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Acrylamide 380g、BIS 20g

7、2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解 3.加入去离子水将溶液定容至1L,用0.45m滤膜滤去杂质。 4.于棕色瓶中4保存。 注意:丙稀铣胺具有很强的神经毒性,并可通过皮肤吸收,其作用有积累性, 配制时应戴手套等。聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为有可能含有少量的未聚合成份。 14、10%(W/V)过硫酸铵 组份浓度 10%(W/V)过硫酸铵 配制量 10mL 配置方法 1.称取1g过硫酸铵。 2.加入10mL的去离子水后搅拌溶解。 3.贮存于4。注意:10%过硫酸胺溶液在4保存时间可使用2周左右,超过期限会失去催化作用。 15、考马斯亮蓝R-250染色液 组份浓度 0.1%(

8、W/V)考马斯亮蓝R-250,25%(V/V)异丙醇, 10%(V/V)冰醋酸 配制量 1L 配置方法 1.称取1g考马斯亮蓝R-250,置于1L烧杯中。 2.量取250mL的异丙醇加入上述烧杯中,搅拌溶解。 3.加入100mL的冰乙醋酸,均匀搅拌。 4.加入650mL的去离子水,均匀搅拌。 5.用滤纸出去颗粒物质后,室温保存。 16、考马斯亮蓝染色脱色液 组份浓度 10%(V/V)醋酸,5%(V/V)乙醇 配制量 1L 配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。醋酸100mL、乙醇50mL 、H2O850mL 2.充分混合后使用。 17、凝胶固定液 (SDS-PAGE银氨染色用) 组份浓度

9、 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)醋酸 配制量 100L 配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。甲醇500mL 、醋酸 100mL 、H2O 400mL 2.均匀混合后室温保存。 18、凝胶处理液 (SDS-PAGE银氨染色用) 组份浓度 50%(V/V)甲醇,10%(V/V)戊二醛 配制量 1L 配置方法 1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。甲醇50mL 、戊二醛 10mL 、H2O 40mL 2. 均匀混合后室温保存。 19、凝胶染色液 (SDS-PAGE银氨染色用) 组份浓度 0.4%(W/V)硝酸银,1%(V/V)浓氨水,0.04%(W/V)氢氧化钠 配制量 100L 配置方

10、法 1.量取下列试剂,加入100200mL试剂瓶中。 20%硝酸银 2m L 浓氨水 1mL 4%氢氧化钠 1mL H2O 96mL 2.均匀混合。该溶液应为无色透明 状。如氨水浓度过低时溶液会呈现混浊状,此时应补加浓氨水,直至透明。 3.本染色液应现用现配,不宜保存。 20、显影液 (SDS-PAGE银氨染色用) 组份浓度 0.005%(V/V)柠檬酸,0.02%(V/V)甲醛 配制量 1L 配置方法 1.称取下列试剂,置于1L试剂瓶中。柠檬酸 50mg 甲醛 0.2m L 2.加入1L去离子水后,摇动混合后溶解。 3.室温保存。 21、45%乙醇溶液 组份浓度 45% 配制量 1L 配置方

11、法量取无水乙醇450mL,加入去离子水550mL,混匀。 22、5%的十二烷基硫酸钠溶液(W/V) 组份浓度5% 配制量0.1L 配置方法称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4%的乙醇溶液中。 23、三氯甲烷-异戊醇混合试剂 配置方法取500mL三氯甲烷试剂,加入21mL异戊醇试剂,混匀。 24、1.6%乙醛溶液 组份浓度 1.6% 配制量 0.1L 配置方法取47%乙醛3.4mL,用去离子水定容至100mL。 25、二苯胺试剂 配置方法 1.称取二苯胺试剂0.8g,溶解于180mL冰乙酸中, 2.再加入8 mL高氯酸混匀。 3. 临用前加入0.8mL 1.6%乙醛溶液。注意:配制完成后

12、试剂应为无色。 26、15%三氯乙酸溶液 组份浓度 15% 配制量 2L 配置方法称取三氯乙酸300g,用去离子水溶解定容至2000mL。 27、1%谷氨酸溶液 组份浓度 1% 配制量 0.5L 配置方法 1.称取5g谷氨酸,先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。 28、1%丙酮酸溶液 组份浓度 1% 配制量 0.5L 配置方法 1.称取5g丙氨酸,先用适量得用去离子水溶解。 2. 再用氢氧化钾溶液中和至中性。 3. 最后用去离子水定容至0.5L。 29、0.1%的碳酸氢钾溶液 组份浓度 0.1% 配制量 0.5L 配置方法称取碳酸

13、氢钾0.5g,用去离子水溶解定容至0.5L。 30、0.05%的碘乙酸溶液 组份浓度 0.05% 配制量 0.25L 配置方法称取0.125g碘乙酸,用去离子水溶解定容至0.25L。 31、Locke氏溶液 配制量 2L 配置方法称取18g氯化钠,0.84g氯化钾,0.48g氯化钙,0.3g碳酸氢钠, 2g葡萄糖,用去离子水溶解定容至2000mL。 32、0.2mol/L的丁酸溶液 组份浓度 0.2mol/L 配制量 1L 配置方法 1.量取18mL正丁酸试剂。 2.用1mol/L的氢氧化钠中和。 3.再用去离子水定容至1L。 33、0.1mol/L的硫代硫酸钠溶液 组份浓度 0.1mol/L

14、 配制量 10L 配置方法称248.17g硫代硫酸钠,用去离子水溶解并定至10L。 34、0.1mol/L的碘溶液 组份浓度 0.1mol/L 配制量 1L 配置方法 1.称取碘12.7g和碘化钾25g。 2.用去离子水溶解并定容至1L。 3.用0.1mol/L的硫代硫酸钠标定。 35、10%氢氧化钠溶液 组份浓度 10% 配制量 2L 配置方法称取200g氢氧化钠,用去离子水溶解并定容至2L。 36、10%盐酸溶液 组份浓度 10% 配制量 0.2L 配置方法量取浓盐酸49.3mL,用去离子水定至0.2mL。 37、0.1%标准丙氨酸溶液 组份浓度 0.1% 配制量 0.5L 配置方法称取丙

15、氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至0.5mL。 38、0.1%标准谷氨酸溶液 组份浓度 0.1% 配制量 0.5L 配置方法称取谷氨酸0.5g,用去离子水溶解并定容至500mL。 39、0.1%水合茚三酮乙醇溶液 组份浓度 0.1% 配制量 1L 配置方法称取1g水合茚三酮试剂,溶于1000mL无水乙醇中。 40、酚溶液 配置方法在大烧杯中加入80mL去离子水,再加入300g 苯酚,在水浴中加热搅拌、混合至苯酚完全溶解。将该溶液倒入盛有200mL去离子水的1000 mL分液漏斗内,轻轻振荡混合,使其成为乳状液。静止710小时,乳状液变成两层透明溶液,下层为被水饱和的酚溶液,放出下层,贮存于棕色瓶中备用。 41、0.5%淀粉溶液 组份浓度 0.5% 配制量 0.1L 配置方法称取淀粉0.5g,用去离子水溶解定容至0.1L。 42、对羟基联苯试剂 配置方法称取对羟基联苯1.5g,溶于100mL0.5%氢氧化钠溶液中,配制成1.5%的溶液。若对羟基联苯颜色较深,应用丙酮或无水乙醇重结晶,放置时间较长后,会出项针状结晶,应摇匀后使用。