细菌和真菌标本的采集指南.docx

1、细菌和真菌标本的采集指南八 细菌和真菌标本的采集指南标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存脓肿用无菌盐水或70乙醇拭去表面渗出物组织或体液优于拭子标本，如必须用拭子，采集2个，1个培养，1个做革兰氏染色。开放性尽可能抽取或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样拭子送捡系统2h，常温24h，常温1/d/来源从脓肿底部或脓肿壁的取样，结果最好封闭性用针及注射器抽吸脓肿壁，将所有物质无菌转入厌氧转运装置厌氧送捡系统1ml2h，常温24h，常温1/d/感染来源取样时，可能会带入与感染过程无关的定植细菌咬伤见脓肿不要培养12h的动物咬伤伤口（通常不能分离到感染性病原体，除非位于脸上或手

2、上，或有感染的指征存在）血培养培养瓶的消毒：加70异丙基乙醇到橡胶塞1min细菌：血培养瓶2h，常温24h，常温或按说明3套/24h急性脓毒病：10min内从不同部位采23套成人，5-10ml/套急性心内膜：12h内从3个不同部位采3套首先触摸静脉婴儿，35ml/套亚急性心内膜炎：从3个分离部位采3套，间隔15min，如24h内为阴性，要再采3套标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存血培养静脉穿刺消毒：1.用70乙醇清洗采集体位 2.使用蘸碘拭子，次女嘎中心开始呈同心圆式涂抹 3.让碘制剂晾干 4.不要触摸该点 5.采血 6.穿刺后，用乙醇将皮肤上的碘除去原因不明发热：

3、从不同部位采23套，间隔1h，如24h内为阴性，要再采3套骨髓对穿刺一侧准备同外科切口接种血培养瓶24h，常温， 24h，常温1/d少量骨髓可直接接种培养基烧伤标本采集前，先清洗和清创烧伤伤口将组织放入有旋帽的容器内用拭子取渗出物2h，常温24h，常温1/d/感染只需进行需氧培养，烧伤表面的培养可能会有误导导管1. 用乙醇清洗导管周围的皮肤2. 将导管末端距夹子5cm无菌移入无菌管3. 直接转运微生物实验室，以防干燥无菌或有旋帽的管或杯15min，常温24h，4无对半定量培养，导管是可以接受的，如静脉导管（Maki法）：中心的、CVP、Hickman、Broviac、外周的、动脉的、Foley

4、由于培养物代表尿道末端的菌群，不要培养要求培养是不能接受的标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存蜂窝组织炎1. 用无菌生理盐水或70%乙醇擦拭2. 用细针头和注射器抽吸发炎的区域（一般是中心而不是边缘）3. 往注射器吸入少量无菌生理盐水，将标本抽入无菌旋帽管无菌管（不要用注射器转运）15min，常温24h，常温无只有2530%可产生潜在的致病菌CSF1. 用2%碘酒消毒采集体位2. 用带L3L4，L4L5或L5S1通管丝的针头插入3. 进入蛛网膜下腔后，移去通管丝，采集12ml液体，分别放入3个防漏管无菌旋帽管所需的最小量：细菌，1ml真菌，2ml细菌：不要冷冻；15m

5、in，常温24h，常温无也可采血进行培养。如果仅仅采集了1管CSF，应立即送交进行微生物培养；否则，送交第2管。脑部脓肿或活检标本的抽吸物，对检测厌氧菌或寄生虫可能是必须的褥疮溃疡不选择拭子标本（见备注）1 用无菌盐水清洗表面2 如得不到活检标本，用拭子用力采集损伤底部3 将拭子放入适当的转运系统拭子转运（需氧）或厌氧系统2h，常温24h，常温1/d/感染由于溃疡拭子提供不了什么临床信息，因此不提倡。一般选择组织活检活针头抽吸标本。标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存耳内耳外耳对复杂的、反复的或慢性顽固的中耳炎做鼓室穿刺术1 接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集

6、液体2 对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用软杆拭子收集液体1 用湿拭子将耳道的任何碎屑或痂皮拭去2 在外耳道用力旋转拭子取样无菌管，拭子转运培养基或厌氧培养培养基拭子转运2h，常温2h，常温24h，常温24h，41/d/感染1/d/感染喉或鼻咽部的拭子培养结果不足以诊断中耳炎的致病因子，不应该送交对于外耳道应用力取样，表面取样可能采不到蜂窝组织炎链球菌眼结膜角膜刮擦1 分别用（无菌盐水预湿）拭子绕每一个结膜取2 采集完即接种培养基3 将拭子涂片在两个玻片上染色1 如上述，获得结膜拭子标本2 滴2滴局部麻醉液3 用无菌铲刮擦脓肿或溃疡物直接接种于培养基直接接种培养：BAP和CHOC，或拭子转运直接

7、培养接种：含10%绵羊红细胞的BHI，CHOC和抑制霉菌的琼脂平皿：15min，常温拭子：2h，常温15min，常温24h，常温24h，常温无无即使只有一个眼睛感染，如可能，对每一结膜都要取样转运；可使用未感染眼作为对照，和分离于感染眼的细菌进行比较；如费用限制，可根据革兰氏染色的结果，帮助对培养物进行解释。以确定固定菌群。建议：培养用于拭子采样要先于麻醉药的应用，而角膜刮擦可稍后进行。标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存液体或抽吸物无菌旋帽直接将少量液体接种于培养基24h，常温24h，常温1/d包括真菌培养基，麻醉药对于一些病原体有抑制作用。粪便常规培养Ecoli

8、O157：H7直肠拭子直接置入一清洁、干燥的容器，采集后1h内将标本转运至微生物实验室将液体或血便放入一清洁、干燥的容器。1 小心插入拭子超越肛门括约肌约1in2 轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样用于检测病原的拭子上应能见到粪便清洁、干燥宽口的容器或用拭子送检系统；2g无菌、防漏宽口容器或用拭子送检系统；2m l拭子转运未防腐，1h，常温拭子转运系统：24h，常温未防腐：1h，常温拭子转运系统：24h，常温或42h，常温24h，448h，常温或424h，448h，常温24h，常温1/d1/d1/d住院超过3d或入院诊断不是肠胃炎的患者不做常规粪便培养。除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做

9、常规病原检测有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血或液状便的效果最好对淋球菌、志贺氏菌、弯曲菌、单纯疱疹病毒、及肛门携带的B群链球菌的检测，或不能留样的患者是保留的方法标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存瘘管见脓肿液体：腹部的、羊膜的、腹水、胆汁、关节穿刺液、心包的、腹膜的、滑膜的、胸腔穿刺液1 用2%的碘町充分消毒皮肤2 经皮穿刺抽吸或外科获取标本3 立即转运实验室4 尽量多呈送液体；不要将拭子浸入液体内转运用于细菌和酵母的血培养瓶或无菌旋帽管或厌氧转运系统细菌，1ml真菌，10ml15min，常温24h，常温心包液或用于真菌培养的液体，24h，4无羊水和后穹隆穿刺

10、液应用厌氧系统送检，革兰氏染色前不需离心。其他液体检测最好用细胞离心制备物做革兰氏染色坏疽组织见脓肿不提倡采集表面或表皮组织标本，优选组织活检或抽取物胃的：洗液或灌洗液患者早晨未进食，并卧床，采样1用鼻胃管经口或鼻进入胃2用2550ml冷却的无菌蒸馏水灌洗3获得的标本并放入到防漏的无菌容器4在去除管子前，停止抽吸，并钳紧。无菌，防漏容器15min，常温或在采集1h内中和24h，41/d标本必须立即处理，因为分枝杆菌在胃灌洗液中死亡很快用1.5ml40%无水Na2HPO4中和3050ml胃灌洗液标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存生殖器：女性羊膜1经羊膜穿刺、剖宫产、子

11、宫内导管抽吸2将液体转入厌氧转运系统厌氧转运系统，1ml15min，常温24h，常温无不能接受用拭子采集或抽吸的阴道膜标本，因为有潜在的阴道共生菌落的污染宫颈1用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见2用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子3用新的无菌拭子紧贴宫颈内道轻轻采样拭子转运2h，常温24h，常温1/d后穹隆送抽吸液厌氧培养系统，1ml2h，常温24h，常温1/d子宫内膜的1通过望远镜导管经宫颈采样2将样本全量转入厌氧转运系统厌氧培养系统，1ml2h，常温24h，常温1/d妊娠产物1将组织的一部分送入无菌容器内2如果从刮宫产获得，立即转入厌氧培养转运系统无菌管或厌氧系统转运2h，常温24h常温1

12、/d不要处理恶露，该标本的培养可能会或不会提供临床上有意义的结果，该结果可能会有误导作用标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存女性尿道患者排尿1h后采集1拭去尿道口的渗出物2用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集尿液拭子转运2h，常温24h，常温1/d如未获得尿液，用Betadine皂清洗外尿道，应用水冲洗，用泌尿生殖道拭子插入尿道24cm，旋转拭子2s阴道1擦除过多的分泌物和排出液2用无菌拭子或吸管从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物3如果需要涂片，再用一个拭子拭子转运2h，常温24h，常温1/d对于子宫内装置，将全装置放入无菌容器并室温转运推荐用革兰氏染色方法确定细菌

13、性阴道炎。细菌培养往往不准确和容易误导生殖：女性或男性，损伤1用无菌盐水清洗伤口，用解剖刀刃切去损伤表面2使渗出液积聚3按压损伤底部，用无菌拭子用力采渗出液拭子转运2h，常温24h，常温1/d用暗视野检查来辨认梅毒螺旋体，用载玻片接触渗出液，加盖玻片，放在保湿的装置里（每个平皿用一个湿纱布）立即转运到实验室检测梅毒的标本不送交培养生殖：男性前列腺1 用肥皂和水清洗阴茎头2 通过直肠按摩前列腺3 用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内拭子转运或无菌管2h，常温24h，常温1/d按摩前后立即采集尿标本，可获得更多表示尿道和膀胱微生物相关性的结果精液也可培养尿道用泌尿生殖道拭子插入尿道腔24cm处，

14、旋转拭子，至少停留20s，而使之容易吸收拭子转运2h，常温24h，常温1/d标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存头发，皮肤真菌病1 用镊子采集至少1012根具有完整柄部的感染头发2 放入清洁的管内或容器内清洁容器10根头发24h，常温1/d/部位在刮擦损伤的同时，如有头皮屑，应采集。注意近期所采取的任何抗真菌治疗指甲，皮肤真菌病1 用浸70%乙醇的纱布（非棉花）擦指甲2 减去感染的大部分，从指甲下收集材料或碎片3 将材料放入清洁容器内清洁容器刮擦的量足以覆盖图钉头2h，常温1/d藏毛囊肿见脓肿下呼吸道下支气管肺泡灌洗、支气管刷或洗、气管抽吸物痰，咳出痰，诱导性1 将抽

15、吸物或洗出物放入痰采集器内2 将刷出物放入有盐水的无菌容器内1在医生或护士的直接监视下采集标本2让患者清洗或漱口，去除表面菌落3知指导患者深咳，产生下呼吸道标本（非鼻后液）。采集到无菌容器内1刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口2借助喷雾器使患者吸入约25ml310%的无菌盐水3采集诱导的痰到无菌容器内无菌容器1ml无菌容器1ml最小量：细菌1ml真菌，3-5ml分枝杆菌5-10ml寄生虫，35ml无菌容器2h，常温2h，常温2h，常温24h，424h，424h，常温1/d1/d1/d定量分析需4080ml液体量，作刷状物的定量分析，可将刷出物放入0.5ml的胰蛋白酶大豆肉汤中对于不能产生标本的儿科

16、患者，呼吸道治疗师应经抽吸获得标本，最好的标本应10个鳞状上皮细胞/100视野一旦获得标本，荚膜组织胞浆菌和皮炎芽生菌仅能短暂存活一小段时间真菌的分离基本是隐球菌和一些丝状真菌，其他酵母菌很少引起下呼吸道感染上呼吸道1 用拭子拭去损伤表面的分泌物和碎片，并丢弃2 用第二个拭子用力在损伤处采样，避免接触正常组织拭子转运2h，常温24h，常温1/d对细菌学评价，不能采表浅组织，应选择组织活检标本或针抽吸物鼻1 用预先被无菌盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm2 对着鼻黏膜用力旋转拭子转运2h，常温24h，常温1/d先前的鼻培养应保存，以用于链球菌和链球菌携带者或鼻损伤的检测可能的话用扩鼻器标本类型采集时

17、间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存鼻咽1 用藻酸钙拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部2 慢慢旋转拭子5s以吸收分泌物3 移去拭子，立即送检。 直接培养基接种或拭子转运平皿：15min，常温拭子：2h，常温24h，常温1/d喉1 用压舌板压舌2 用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区域采样拭子转运2h，常温24h，常温1/d喉拭子培养不能用于会厌发炎的患者皮肤和皮肤真菌病1 用70%乙醇消毒患处2 在损伤的活动边缘轻轻刮擦皮肤表面，不要出血3 将样本置于清洁容器内或两个清洁玻片之间清洁容器，刮擦的量足以覆盖图钉头部2h，常温1/d/部位如标本处于两玻片之间被呈送，应将两玻片黏牢，并置于信封内组织1

18、 用无菌容器呈送2 小样本应滴加几滴无菌盐水保持湿润3 不能使组织干涸厌氧转运系统或无菌旋帽瓶，需氧加一些盐水15min，常温24h，常温无呈送组织的量尽可能多，如可能在70保存一定量的外科组织以进一步研究之需不要呈送在表面简单摩擦的拭子对于定量研究，2cm1cm也就是500mg的样本是适宜的盐水对于一些军团菌来说可能有抑制作用标本类型采集时间和温度重复采样限制说明原则装置和最小量转运储存尿女性，中段1 用肥皂和水完全清洗尿道区域2 用湿纱布垫漂洗3 分开阴唇，开始排泄4 排出几微升后，不停止尿流，采集中段尿无菌广口容器，1ml，或尿运转试剂盒未防腐：2h，常温防腐：24h，常温24h，41/

19、d女性尿道中的衣原体抗原可能难以检出。尿对细胞系有毒，因而不能用于支原体培养之标本中段尿部分用于细菌培养男性，中段1 用肥皂盒水清洗阴茎头2 用湿纱布垫漂洗3 回缩包皮，开始排泄4 排出几微升后，不停止尿流，采集中段尿无菌广口容器，1ml，或尿运转试剂盒未防腐：2h，常温防腐：24h，常温24h，41/d首段尿用于衣原体的探针和抗原检测。等待至最后一次排尿2h后。中段尿部分用于细菌培养直导管1 用肥皂和水清洗阴茎头2 用湿纱布垫漂洗3 将导管无菌插入膀胱4 流过15ml尿后，采集尿入无菌容器内无菌防漏容器未防腐：2h，常温防腐：24h，常温24h，41/d该程序可能导致尿道菌落进入膀胱并增加医源性感染的危险导管内1 用70%乙醇消毒导管采集部分2 用针头和注射器无菌采集510ml尿3 转入无菌管或容器内无菌防漏容器未防腐：2h，常温防腐：24h，常温24h，41/d伤口见脓肿