细菌和真菌标本的采集指南.docx

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细菌和真菌标本的采集指南

八细菌和真菌标本的采集指南

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

脓肿

用无菌盐水或70％乙醇拭去表面渗出物

组织或体液优于拭子标本，如必须用拭子，采集2个，1个培养，1个做革兰氏染色。

开放性

尽可能抽取或将拭子深入伤口，紧贴伤口前沿取样

拭子送捡系统

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d/来源

从脓肿底部或脓肿壁的取样，结果最好

封闭性

用针及注射器抽吸脓肿壁，将所有物质无菌转入厌氧转运装置

厌氧送捡系统≥1ml

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d/感染来源

取样时，可能会带入与感染过程无关的定植细菌

咬伤

见脓肿

不要培养≤12h的动物咬伤伤口（通常不能分离到感染性病原体，除非位于脸上或手上，或有感染的指征存在）

血培养

培养瓶的消毒：

加70％异丙基乙醇到橡胶塞1min

细菌：

血培养瓶

≤2h，常温

≤24h，常温或按说明

3套/24h

急性脓毒病：

10min内从不同部位采2－3套

成人，5-10ml/套

急性心内膜：

1－2h内从3个不同部位采3套

首先触摸静脉

婴儿，3－5ml/套

亚急性心内膜炎：

从3个分离部位采3套，间隔≥15min，如24h内为阴性，要再采3套

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

血培养

静脉穿刺消毒：

1.用70％乙醇清洗采集体位

2.使用蘸碘拭子，次女嘎中心开始呈同心圆式涂抹

3.让碘制剂晾干

4.不要触摸该点

5.采血

6.穿刺后，用乙醇将皮肤上的碘除去

原因不明发热：

从不同部位采2－3套，间隔≥1h，如24h内为阴性，要再采3套

骨髓

对穿刺一侧准备同外科切口

接种血培养瓶

≤24h，常温，

≤24h，常温

1/d

少量骨髓可直接接种培养基

烧伤

标本采集前，先清洗和清创烧伤伤口

将组织放入有旋帽的容器内用拭子取渗出物

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d/感染

只需进行需氧培养，烧伤表面的培养可能会有误导

导管

1.用乙醇清洗导管周围的皮肤

2.将导管末端距夹子5cm无菌移入无菌管

3.直接转运微生物实验室，以防干燥

无菌或有旋帽的管或杯

≤15min，常温

≤24h，4℃

无

对半定量培养，导管是可以接受的，如静脉导管（Maki法）：

中心的、CVP、Hickman、Broviac、外周的、动脉的、

Foley

由于培养物代表尿道末端的菌群，不要培养

要求培养是不能接受的

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

蜂窝组织炎

1.用无菌生理盐水或70%乙醇擦拭

2.用细针头和注射器抽吸发炎的区域（一般是中心而不是边缘）

3.往注射器吸入少量无菌生理盐水，将标本抽入无菌旋帽管

无菌管（不要用注射器转运）

≤15min，常温

≤24h，常温

无

只有25－30%可产生潜在的致病菌

CSF

1.用2%碘酒消毒采集体位

2.用带L3－L4，L4－L5或L5－S1通管丝的针头插入

3.进入蛛网膜下腔后，移去通管丝，采集1－2ml液体，分别放入3个防漏管

无菌旋帽管

所需的最小量：

细菌，≥1ml

真菌，≥2ml

细菌：

不要冷冻；

≤15min，常温

≤24h，常温

无

也可采血进行培养。

如果仅仅采集了1管CSF，应立即送交进行微生物培养；否则，送交第2管。

脑部脓肿或活检标本的抽吸物，对检测厌氧菌或寄生虫可能是必须的

褥疮溃疡

不选择拭子标本（见备注）

1．用无菌盐水清洗表面

2．如得不到活检标本，用拭子用力采集损伤底部

3．将拭子放入适当的转运系统

拭子转运（需氧）或厌氧系统

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d/感染

由于溃疡拭子提供不了什么临床信息，因此不提倡。

一般选择组织活检活针头抽吸标本。

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

耳

内耳

外耳

对复杂的、反复的或慢性顽固的中耳炎做鼓室穿刺术

1．接触耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液体

2．对破裂的鼓室，借助耳科诊视器，用软杆拭子收集液体

1．用湿拭子将耳道的任何碎屑或痂皮拭去

2．在外耳道用力旋转拭子取样

无菌管，拭子转运培养基或厌氧培养培养基

拭子转运

≤2h，常温

≤2h，常温

≤24h，常温

≤24h，4℃

1/d/感染

1/d/感染

喉或鼻咽部的拭子培养结果不足以诊断中耳炎的致病因子，不应该送交

对于外耳道应用力取样，表面取样可能采不到蜂窝组织炎链球菌

眼

结膜

角膜

刮擦

1．分别用（无菌盐水预湿）拭子绕每一个结膜取

2．采集完即接种培养基

3．将拭子涂片在两个玻片上染色

1．如上述，获得结膜拭子标本

2．滴2滴局部麻醉液

3．用无菌铲刮擦脓肿或溃疡物直接接种于培养基

直接接种培养：

BAP和CHOC，或拭子转运

直接培养接种：

含10%绵羊红细胞的BHI，CHOC和抑制霉菌的琼脂

平皿：

≤15min，常温

拭子：

≤2h，常温

≤15min，常温

≤24h，常温

≤24h，常温

无

无

即使只有一个眼睛感染，如可能，对每一结膜都要取样转运；可使用未感染眼作为对照，和分离于感染眼的细菌进行比较；如费用限制，可根据革兰氏染色的结果，帮助对培养物进行解释。

以确定固定菌群。

建议：

培养用于拭子采样要先于麻醉药的应用，而角膜刮擦可稍后进行。

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

液体或抽吸物

无菌旋帽直接将少量液体接种于培养基

≤24h，常温

≤

24h，常温

1/d

包括真菌培养基，麻醉药对于一些病原体有抑制作用。

粪便

常规培养

E．coliO157：

H7

直肠拭子

直接置入一清洁、干燥的容器，采集后1h内将标本转运至微生物实验室

将液体或血便放入一清洁、干燥的容器。

1．小心插入拭子超越肛门括约肌约1in

2．轻轻旋转拭子，在肛门隐窝取样

用于检测病原的拭子上应能见到粪便

清洁、干燥宽口的容器或用拭子送检系统；≥2g

无菌、防漏宽口容器或用拭子送检系统；≥2ml

拭子转运

未防腐，≤1h，常温

拭子转运系统：

≤24h，常温

未防腐：

≤1h，常温

拭子转运系统：

≤24h，常温或4℃

≤2h，常温

≤24h，4℃

≤48h，常温或4℃

≤24h，4℃

≤48h，常温

≤24h，常温

1/d

1/d

1/d

住院超过3d或入院诊断不是肠胃炎的患者不做常规粪便培养。

除婴儿和有活动性腹泻症状的患者外不推荐用拭子做常规病原检测

有腹部痉挛的患者在发病6h内采集到的血或液状便的效果最好

对淋球菌、志贺氏菌、弯曲菌、单纯疱疹病毒、及肛门携带的B群链球菌的检测，或不能留样的患者是保留的方法

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

瘘管

见脓肿

液体：

腹部的、羊膜的、腹水、胆汁、关节穿刺液、心包的、腹膜的、滑膜的、胸腔穿刺液

1．用2%的碘町充分消毒皮肤

2．经皮穿刺抽吸或外科获取标本

3．立即转运实验室

4．尽量多呈送液体；不要将拭子浸入液体内转运

用于细菌和酵母的血培养瓶或无菌旋帽管或厌氧转运系统

细菌，≥1ml

真菌，≥10ml

≤15min，常温

≤24h，常温心包液或用于真菌培养的液体，≤24h，4℃

无

羊水和后穹隆穿刺液应用厌氧系统送检，革兰氏染色前不需离心。

其他液体检测最好用细胞离心制备物做革兰氏染色

坏疽组织

见脓肿

不提倡采集表面或表皮组织标本，优选组织活检或抽取物

胃的：

洗液或灌洗液

患者早晨未进食，并卧床，采样

1用鼻胃管经口或鼻进入胃

2用25－50ml冷却的无菌蒸馏水灌洗

3获得的标本并放入到防漏的无菌容器

4在去除管子前，停止抽吸，并钳紧。

无菌，防漏容器

≤15min，常温或在采集1h内中和

≤24h，4℃

1/d

标本必须立即处理，因为分枝杆菌在胃灌洗液中死亡很快

用1.5ml40%无水Na2HPO4中和30－50ml胃灌洗液

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

生殖器：

女性羊膜

1经羊膜穿刺、剖宫产、子宫内导管抽吸

2将液体转入厌氧转运系统

厌氧转运系统，≥1ml

≤15min，常温

≤24h，常温

无

不能接受用拭子采集或抽吸的阴道膜标本，因为有潜在的阴道共生菌落的污染

宫颈

1用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见

2用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子

3用新的无菌拭子紧贴宫颈内道轻轻采样

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

后穹隆

送抽吸液

厌氧培养系统，≥1ml

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

子宫内膜的

1通过望远镜导管经宫颈采样

2将样本全量转入厌氧转运系统

厌氧培养系统，≥1ml

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

妊娠产物

1将组织的一部分送入无菌容器内

2如果从刮宫产获得，立即转入厌氧培养转运系统

无菌管或厌氧系统转运

≤2h，常温

≤24h常温

1/d

不要处理恶露，该标本的培养可能会或不会提供临床上有意义的结果，该结果可能会有误导作用

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

女性尿道

患者排尿1h后采集

1拭去尿道口的渗出物

2用拭子通过阴道，靠着耻骨联合，按摩尿道，采集尿液

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

如未获得尿液，用Betadine皂清洗外尿道，应用水冲洗，用泌尿生殖道拭子插入尿道2－4cm，旋转拭子2s

阴道

1擦除过多的分泌物和排出液

2用无菌拭子或吸管从阴道穹隆部黏膜处获取分泌物

3如果需要涂片，再用一个拭子

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

对于子宫内装置，将全装置放入无菌容器并室温转运

推荐用革兰氏染色方法确定细菌性阴道炎。

细菌培养往往不准确和容易误导

生殖：

女性或男性，损伤

1用无菌盐水清洗伤口，用解剖刀刃切去损伤表面

2使渗出液积聚

3按压损伤底部，用无菌拭子用力采渗出液

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

用暗视野检查来辨认梅毒螺旋体，用载玻片接触渗出液，加盖玻片，放在保湿的装置里（每个平皿用一个湿纱布）立即转运到实验室检测梅毒的标本不送交培养

生殖：

男性前列腺

1．用肥皂和水清洗阴茎头

2．通过直肠按摩前列腺

3．用无菌拭子收集液体或使液体进入无菌管内

拭子转运或无菌管

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

按摩前后立即采集尿标本，可获得更多表示尿道和膀胱微生物相关性的结果

精液也可培养

尿道

用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2－4cm处，旋转拭子，至少停留20s，而使之容易吸收

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

头发，皮肤真菌病

1．用镊子采集至少10－12根具有完整柄部的感染头发

2．放入清洁的管内或容器内

清洁容器10根头发

≤24h，常温

1/d/部位

在刮擦损伤的同时，如有头皮屑，应采集。

注意近期所采取的任何抗真菌治疗

指甲，皮肤真菌病

1．用浸70%乙醇的纱布（非棉花）擦指甲

2．减去感染的大部分，从指甲下收集材料或碎片

3．将材料放入清洁容器内

清洁容器

刮擦的量足以覆盖图钉头

≤2h，常温

1/d

藏毛囊肿

见脓肿

下呼吸道

下支气管肺泡灌洗、支气管刷或洗、气管抽吸物

痰，咳出

痰，诱导性

1．将抽吸物或洗出物放入痰采集器内

2．将刷出物放入有盐水的无菌容器内

1在医生或护士的直接监视下采集标本

2让患者清洗或漱口，去除表面菌落

3知指导患者深咳，产生下呼吸道标本（非鼻后液）。

采集到无菌容器内

1刷完牙龈和舌头后让患者用水漱口

2借助喷雾器使患者吸入约25ml3－10%的无菌盐水

3采集诱导的痰到无菌容器内

无菌容器>1ml

无菌容器>1ml

最小量：

细菌>1ml

真菌，≥3-5ml

分枝杆菌5-10ml

寄生虫，3－5

ml

无菌容器

≤2h，常温

≤2h，常温

≤2h，常温

≤24h，4℃

≤24h，4℃

≤24h，常温

1/d

1/d

1/d

定量分析需40－80ml液体量，作刷状物的定量分析，可将刷出物放入0.5ml的胰蛋白酶大豆肉汤中

对于不能产生标本的儿科患者，呼吸道治疗师应经抽吸获得标本，最好的标本应≤10个鳞状上皮细胞/×100视野

一旦获得标本，荚膜组织胞浆菌和皮炎芽生菌仅能短暂存活一小段时间

真菌的分离基本是隐球菌和一些丝状真菌，其他酵母菌很少引起下呼吸道感染

上呼吸道

1．用拭子拭去损伤表面的分泌物和碎片，并丢弃

2．用第二个拭子用力在损伤处采样，避免接触正常组织

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

对细菌学评价，不能采表浅组织，应选择组织活检标本或针抽吸物

鼻

1．用预先被无菌盐水湿润的拭子插入鼻孔约2cm

2．对着鼻黏膜用力旋转

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

先前的鼻培养应保存，以用于链球菌和链球菌携带者或鼻损伤的检测

可能的话用扩鼻器

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

鼻咽

1．用藻酸钙拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部

2．慢慢旋转拭子5s以吸收分泌物

3．移去拭子，立即送检。

直接培养基接种或拭子转运

平皿：

≤15min，常温

拭子：

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

喉

1．用压舌板压舌

2．用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区域采样

拭子转运

≤2h，常温

≤24h，常温

1/d

喉拭子培养不能用于会厌发炎的患者

皮肤和皮肤真菌病

1．用70%乙醇消毒患处

2．在损伤的活动边缘轻轻刮擦皮肤表面，不要出血

3．将样本置于清洁容器内或两个清洁玻片之间

清洁容器，刮擦的量足以覆盖图钉头部

≤2h，常温

1/d/部位

如标本处于两玻片之间被呈送，应将两玻片黏牢，并置于信封内

组织

1．用无菌容器呈送

2．小样本应滴加几滴无菌盐水保持湿润

3．不能使组织干涸

厌氧转运系统或无菌旋帽瓶，需氧加一些盐水

≤15min，常温

≤24h，常温

无

呈送组织的量尽可能多，如可能在－70℃保存一定量的外科组织以进一步研究之需

不要呈送在表面简单摩擦的拭子

对于定量研究，2cm×1cm也就是500mg的样本是适宜的

盐水对于一些军团菌来说可能有抑制作用

标本类型

采集

时间和温度

重复采样限制

说明

原则

装置和最小量

转运

储存

尿

女性，中段

1．用肥皂和水完全清洗尿道区域

2．用湿纱布垫漂洗

3．分开阴唇，开始排泄

4．排出几微升后，不停止尿流，采集中段尿

无菌广口容器，≥1ml，或尿运转试剂盒

未防腐：

≤2h，常温

防腐：

≤24h，常温

≤24h，4℃

1/d

女性尿道中的衣原体抗原可能难以检出。

尿对细胞系有毒，因而不能用于支原体培养之标本

中段尿部分用于细菌培养

男性，中段

1．用肥皂盒水清洗阴茎头

2．用湿纱布垫漂洗

3．回缩包皮，开始排泄

4．排出几微升后，不停止尿流，采集中段尿

无菌广口容器，≥1ml，或尿运转试剂盒

未防腐：

≤2h，常温

防腐：

≤24h，常温

≤24h，4℃

1/d

首段尿用于衣原体的探针和抗原检测。

等待至最后一次排尿2h后。

中段尿部分用于细菌培养

直导管

1．用肥皂和水清洗阴茎头

2．用湿纱布垫漂洗

3．将导管无菌插入膀胱

4．流过15ml尿后，采集尿入无菌容器内

无菌防漏容器

未防腐：

≤2h，常温

防腐：

≤24h，常温

≤24h，4℃

1/d

该程序可能导致尿道菌落进入膀胱并增加医源性感染的危险

导管内

1．用70%乙醇消毒导管采集部分

2．用针头和注射器无菌采集5－10ml尿

3．转入无菌管或容器内

无菌防漏容器

未防腐：

≤2h，常温

防腐：

≤24h，常温

≤24h，4℃

1/d

伤口

见脓肿