微生物学教案.docx

1、微生物学教案一、授课题目（教学章、节或主题）第二篇 医学微生物学 概述 ； 第十二章 细菌的形态与结构二、教学时间安排组织教学、导入新课，5分钟；讲授新课，70分钟；课堂小结、展示重点、复习巩固，10分钟；布置作业、自学提示，5分钟。三、教学目的、要求掌握微生物的分类、细菌的形态和结构；掌握质粒的概念；熟悉细菌的染色方法；了解微生物与人类的关系。四、教学重点和难点重点：细菌的基本结构和特殊结构及其功能。难点：细菌细胞壁的结构组成。五、教学方法及手段讲授、讨论六、教学过程设计医学微生物学概述1、微生物的概念、特点与分类。体积微小、结构简单。分为三大类： 非细胞型微生物，病毒；原核细胞型微生物，细

2、菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体和放线菌；真核细胞型微生物，真菌。2、微生物与人类的关系。病原微生物；具有致病性的微生物。条件致病微生物：正常情况下不致病，只是在特定情况下导致疾病。第十二章 细菌的形态与结构第一节 细菌的大小与形态1、细菌的大小。测量单位2、细菌的形态：球菌、杆菌、螺形菌第二节 细菌的结构1、细菌的基本结构细胞壁 肽聚糖，又称粘肽。革兰阳性菌：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥；革兰阴性菌：聚糖骨架、四肽侧链。聚糖骨架：N-乙酰葡糖胺、N-乙酰胞壁酸，-1,4糖苷键，三维立体结构。革兰阳性菌细胞壁特殊组分：磷壁酸革兰阴性菌细胞壁特殊组分：除含有12层的肽聚糖结构外，尚有特殊组

3、分外膜，外膜由脂蛋白、脂质双层和脂多糖三部分组成。细胞壁革兰阳性菌革兰阴性菌强度较坚韧较疏松肽聚糖层数可多达50层12层磷壁酸+外膜+对青霉素、溶菌酶敏感性敏感不敏感细胞壁的功能细菌细胞壁缺陷型(细菌L型)细胞膜细胞质 核糖体、质粒、胞质颗粒核质2、细菌的特殊结构荚膜 功能：抗吞噬、粘附作用、抗有害物质的损伤。鞭毛 运动器官，分四类。菌毛 普通菌毛、性菌毛。与致病性有关。芽胞 保存细菌全部生命功能。第三节 细菌形态检查法1、显微镜放大法2、染色法 革兰染色法(Gram stain)：步骤、意义 抗酸染色法（acid-fast stain） 七、思考题及作业免疫学与病原生物学试题精集P60-63

4、八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记一、授课题目（教学章、节或主题）第十三章 细菌的生理二、教学时间安排组织教学、复习旧课，5分钟；导入新课，2分钟；讲授新课，70分钟；课堂小结、展示重点、复习巩固，10分钟；布置作业、自学提示，3分钟。三、教学目的、要求掌握细菌生长繁殖的条件；掌握细菌的合成代谢产物及其临床意义。熟悉细菌的生长方式和速度；熟悉细菌的生长现象。了解细菌的分解代谢产物。四、教学重点和难点重点：细菌生长繁殖的条件；细菌合成代谢产物的临床意义。难点：细菌的分解代谢

5、产物。五、教学方法及手段讲授、讨论六、教学过程设计 第一节 细菌的理化性状一、细菌的化学组成水占细胞总重量的7590。二、细菌的物理性状半透明，细菌悬液呈混浊状态；相对表面积大；在近中性或弱碱性环境中，细菌均带负电荷；细胞壁和细胞膜都有半透性；菌体内的渗透压高达525个大气压。第二节 细菌的生长繁殖与人工培养 一、细菌的生长繁殖 细菌生长繁殖的条件1、充足的营养 水、碳源、氮源、无机盐、生长因子。2、合适的酸碱度 最适PH为7.27.6。霍乱弧菌pH 8.49.2生长最好，结核分枝杆菌生长的最适pH为6.56.8。3、适宜的温度 37。4、必要的气体环境 分为四类：专性需氧菌、微需氧菌、兼性厌

6、氧菌、专性厌氧菌。 细菌生长繁殖的方式与速度二分裂方式 无性繁殖。多数细菌繁殖速度2030min一代。生长曲线分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。 二、细菌的人工培养 培养基分为五类：基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。 根据培养基物理状态的不同分为液体、固体和半固体三大类。液体培养基加入0.30.5的琼脂粉，琼脂粉含量在1.52.5时，则为固体培养基。 细菌在培养基中的生长现象1、在液体培养基中：混浊、沉淀、菌膜。2、在半固体培养基中：有鞭毛 沿穿刺线呈羽毛状或云雾状扩散生长；无鞭毛 沿穿刺线生长。3、在固体培养基中：菌落、菌苔。 人工培养细菌的意义1、在医学中

7、的应用：确定病原菌、测定药物敏感性、制备生物制品。 2、在工农业生产中的应用。 3、在基因工程中的应用。第三节 细菌的代谢产物一、细菌的分解代谢产物 糖的分解产物大肠埃希菌能发酵葡萄糖和乳糖，产酸并产气；伤寒沙门菌发酵葡萄糖仅产酸不产气，且不能发酵乳糖。用于鉴别细菌。 蛋白质的分解产物大肠埃希菌、变形杆菌、霍乱弧菌等能分解培养基中的色氨酸生成吲哚(靛基质)。沙门菌、变形杆菌等能分解培养基中的含硫氨基酸(如胱氨酸、甲硫氨酸)生成硫化氢。二、细菌的合成代谢产物 热原质 耐高温，与致病性有关。 毒素与侵袭性酶 与致病性有关。 色素 用于鉴别细菌。 抗生素 用于防治疾病。 细菌素 用于鉴别细菌。 维生

8、素 用于防治疾病。七、思考题及作业免疫学与病原生物学试题精集P64-66八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记一、授课题目（教学章、节或主题）第十四章 细菌与环境(一)二、教学时间安排组织教学、复习提问，5分钟；导入新课，2分钟；讲授新课，30分钟；课堂小结、展示重点，5分钟；布置作业，3分钟。三、教学目的、要求掌握消毒、灭菌、防腐、无菌、无菌操作的概念；熟悉细菌在自然界与人体的分布。四、教学重点和难点重点：消毒、灭菌、无菌操作的概念五、教学方法及手段讨论、讲授六、教学过程设

9、计第十四章 细菌与环境 第一节 细菌的分布一、土壤 土壤中的细菌多数为非病原菌。在处理被泥土污染的伤口时应采取必要措施防止芽胞菌的感染。10-20CM二、水水中可带有伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、钩端螺旋体等病原菌，通过污染水源而引起多种消化系统传染病的流行。生活饮用水卫生标准：1ML，总数100个；1000，群数3个。三、空气空气中常见的致病菌有结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈氏菌等，可引起呼吸道传染病或伤口感染。四、生物体 体表及与外界相通的腔道中寄居着不同种类和数量的微生物。口腔：消化链球菌 牙菌斑 乳酸杆菌 龋齿。IGA第二节 消毒与灭菌一、基本概念消毒

10、：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。 灭菌：杀灭物体上所有微生物(包括细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物)的方法。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不死亡。 无菌：不存在活菌的意思。无菌操作：防止细菌进入人体或其它物品的操作技术。在外科手术、微生物学实验时，均需进行无菌操作。 七、思考题及作业免疫学与病原生物学试题精集P67-71八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记一、授课题目（教学章、节或主题）实验一 细菌形态观

11、察二、教学时间安排组织教学，2分钟；讲授新课，10分钟；学生观察实验内容，30实验小结、布置作业，3分钟；三、教学目的、要求掌握示教显微镜下所看到的细菌形态和特殊结构。熟悉显微镜油镜使用。了解实验室规则。四、教学重点和难点重点：细菌形态和特殊结构五、教学方法及手段讲授、演示、观察六、教学过程设计（一）实验室规则介绍（二）显微镜油镜的使用和保护法1、显微镜油镜的识别标有100或90；有白、黑或红色圆圈；有“油”或HI、oil字；油镜头比其它接物镜长，孔径最小。2、显微镜油镜的使用 3、油镜的保护 4、油镜加油的原理（三）细菌不染色标本检查法1、压滴法 2、悬滴法3、暗视野法（四）细菌的基本形态观

12、察（绘图）葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌、大肠埃希菌 （五）细菌的特殊结构观察（绘图）荚膜、芽胞、鞭毛七、思考题及作业1、医学免疫学与病原生物学实验教程P27-302、使用油镜时应注意哪些事项?八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记5一、授课题目（教学章、节或主题）第十四章 细菌与环境（二）二、教学时间安排组织教学、复习旧课，5分钟；讲授新课，70分钟；课堂小结、展示重点，10分钟；布置作业、自学提示，5分钟。三、教学目的、要求掌握物理消毒灭菌的方法和用途；熟悉化学消毒灭菌法

13、；了解细菌的变异。四、教学重点和难点重点：物理消毒灭菌的方法和用途。难点：细菌的变异机制。五、教学方法及手段讲授、讨论六、教学过程设计第十四章 细菌与环境 第二节 消毒与灭菌二、物理消毒灭菌法 热力灭菌法1、干热灭菌法 焚烧。 烧灼。 干烤： 160170，2小时。2、湿热灭菌法 巴氏消毒法：用于牛乳、酒类等消毒。此方法有两种：一是加热至61.162.8，30分钟；另一是71.7经1530秒。 煮沸法：杀死一般细菌的繁殖体，加入2碳酸钠沸点达105。间歇蒸气灭菌法：用于一些不耐高热的含糖、牛奶等培养基的灭菌。高压蒸气灭菌法：最常用、最有效。103.4KPa (1.05kgcm2)、温度可达到1

14、21.3，维持1520min，可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。 辐射杀菌法1、日光与紫外线 265266nm杀菌作用最强。紫外线穿透力较弱，用于手术室、传染病房、细菌实验室的空气消毒。形成胸腺嘧啶双聚体，干扰DNA复制。2、电离辐射。破坏DNA 滤过除菌法 用于不耐高温灭菌的血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。蔡氏三、化学消毒灭菌法 常用消毒剂的作用机制促进菌体蛋白质变性或凝固；干扰细菌的酶系统和代谢；损伤菌细胞膜。 常用消毒剂的种类表14-1。 影响消毒灭菌效果的因素 1、消毒剂的性质、浓度与作用时间 70乙醇或5080异丙醇的消毒效果最好。 2、微生物的种类与数量。3、有机物的存在。

15、第三节 细菌的变异 一、细菌的变异现象 形态结构的变异细菌L型。 菌落变异S-R变异。 毒力变异卡介苗(BCG)。 耐药性变异二、细菌遗传变异的物质基础 细菌染色体 质粒 重要的质粒有：1、致育质粒或F质粒 2、耐药性质粒或R质粒3、毒力质粒或Vi质粒 4、细菌素质粒 转位因子 转位因子主要有三类：插入序列、转座子、转座噬菌体。 噬菌体噬菌体：是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒，具有病毒的特性如个体微小，可以通过滤菌器；无完整的细胞结构；只能在活的微生物细胞内复制增殖等。细菌与噬菌体的相互关系：毒性噬菌体、温和噬菌体或溶原性噬菌体。三、细菌变异的机制 基因的突变 基因的转移与重组

16、转化：是受体菌直接摄取供体菌裂解后游离出的DNA片段，从而获得新的性状的过程。 接合：是细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质(主要是质粒DNA)从供体菌转移给受体菌的过程。转导：是以温和噬菌体为载体，将供体菌的一段DNA转移到受体菌内，使其获得新的性状的过程。可分为普遍性转导和局限性转导。 溶原性转换：是当噬菌体感染细菌时，噬菌体DNA整合于宿主菌DNA上，使其成为溶原状态时而使细菌获得新的性状的过程。四、细菌变异的实际意义 在疾病的诊断、治疗与预防中的应用防止耐药菌产生：合理使用抗生素、防止交叉感染、做药敏试验。 在测定致癌物质中的应用 在基因工程中的应用 七、思考题及作业免疫学与病原生物

17、学试题精集P67-71八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记一、授课题目（教学章、节或主题）第十五章 细菌的致病性二、教学时间安排组织教学、复习提问，5分钟；导入新课，2分钟；讲授新课，70分钟；课堂小结、展示重点，10分钟；布置作业，3分钟。三、教学目的、要求掌握细菌的致病因素；掌握基本概念。熟悉细菌内毒素与外毒素的区别。四、教学重点和难点重点：基本概念、细菌的致病因素五、教学方法及手段讨论、讲授六、教学过程设计 一、正常菌群正常人的体表及与外界相通的口腔、鼻咽腔、肠道、泌

18、尿生殖道等腔道中都寄居着不同种类和数量的微生物，当人体免疫功能正常时，这些微生物对宿主无害，有些对人还有利，称为正常菌群。人体各部位常见的正常菌群。生理意义： 1、生物拮抗作用 2、营养作用 大肠埃希菌能合成维生素B、K。 3、免疫作用 4、抗衰老作用 双歧杆菌有抗衰老作用。二、机会致病菌条件：1、寄居部位的改变 2、免疫功能低下 3、菌群失调 菌群失调：是宿主某部位正常菌群中各菌种间的比例发生较大幅度变化而超出正常范围的状态。由此产生的疾病，称为菌群失调症。 第二节 细菌的致病因素 毒力强弱、侵入数量、侵入部位。一、细菌的毒力毒力：致病菌的致病性强弱程度。构成细菌毒力的物质是侵袭力和毒素。

19、侵袭力 侵袭力(invasiveness)是指致病菌突破宿主防御机能，进入机体并在体内定植、繁殖和扩散的能力。 1、荚膜和微荚膜 2、粘附素 3、侵袭性酶 毒素 1、外毒素 2、内毒素 由内毒素引起的毒性作用基本相同。 发热反应 白细胞反应 内毒素血症与内毒素休克弥散性血管内凝血（DIC）： 细菌外毒素与内毒素的主要区别外毒素和内毒素的主要区别区别点外毒素内毒素来源革兰阳性菌与部分革兰阴性菌革兰阴性菌存在部位从活菌分泌出，少数菌崩解后释出细胞壁组分化学成分蛋白质脂多糖毒性作用强，对组织器官有选择性毒害效应，引起特殊临床表现较弱，各菌毒性效应大致相同，引起发热、白细胞增多、微循环障碍、休克、DI

20、C等抗原性强，刺激机体产生抗毒素；甲醛液处理脱毒形成类毒素弱，刺激机体产生的中和抗体作用弱；甲醛液处理不形成类毒素二、细菌侵入的数量三、细菌侵入的部位第三节 感染的发生与发展 一、感染的来源 外源性感染传染源： 1、患者 2、带菌者 危害更大 3、病畜和带菌动物 内源性感染二、传播方式与途径 呼吸道感染 消化道感染 创伤感染 接触感染 节肢动物叮咬感染 三、感染的类型 隐性感染 感染后致病菌对机体损害较轻，不出现或出现不明显的临床症状，为隐性感染，或称亚临床感染。 显性感染 出现一系列的临床症状和体征。显性感染分为： 1、急性感染 2、慢性感染 根据临床上感染部位不同，显性感染又分为： 1、局

21、部感染 2、全身感染 有几种情况： (1)毒血症：致病菌侵入宿主后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，但其产生的外毒素入血，经血到达易感的组织细胞，引起特殊的毒性症状。 (2)菌血症：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只是短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位后再进行繁殖而致病。 (3)败血症：致病菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性产物，引起全身性中毒症状。 (4)脓毒血症：指化脓性病菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通过血流扩散至宿主的其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。(5)内毒素血症(endotoxemia)：革兰阴性菌侵入血流，并大量繁殖、崩解后释放出大量内毒素入血所

22、致。 带菌状态 有时致病菌在显性或隐性感染后并未立即消失，在体内继续留存一定时间，与机体免疫力处于相对平衡状态，称为带菌状态。处于带菌状态的人称为带菌者。七、思考题及作业免疫学与病原生物学试题精集P72-74八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记7(实)一、授课题目（教学章、节或主题）实验二 细菌形态检查二、教学时间安排组织教学，2分钟；讲授实验内容，10分钟；操作示教，10分钟；学生操作、观察、绘图，60分钟；实验小结、布置作业，8分钟；三、教学目的、要求掌握细菌涂片制作，

23、革兰染色操作。娴熟应用油镜观察细菌形态结构。四、教学重点和难点重点：革兰染色操作。五、教学方法及手段讲授、演示、观察、学生操作六、教学过程设计（一）细菌涂片的制作【目的】细菌材料须涂布固定于玻片上，染色后观察其形态、结构及染色反应。【原理】【材料】 【方法】 （1）涂片（2）干燥（3）固定【注意事项】玻片要洁净无油，否则菌液不易涂开。 取菌量宜少，涂片要匀而薄。切勿将未经火焰固定的标本立即染色水洗。六、革兰染色【材料】【方法】 【注意事项】要掌握好染色时间。【镜检结果】 葡萄球菌 大肠埃希菌 呈 色 呈 色 为革兰 性菌 为革兰 性菌七、思考题及作业1、医学免疫学与病原生物学实验教程P27-3

24、02、对革兰染色的成败你有何体会?八、主要参考书目免疫学与病原生物学， 吴松泉主编，浙江科学技术出版社， 9月第7次印刷；医学微生物学，周正任主编，人民卫生出版社， 12月第6版。九、教学后记23一、授课题目（教学章、节或主题）第十六章 病原性细菌第一节球菌二、教学时间安排组织教学、复习旧课，5分钟；导入新课，2分钟；讲授新课，70分钟；课堂小结、展示重点、复习巩固，10分钟；布置作业、自学提示，3分钟。三、教学目的、要求掌握病原性球菌的致病物质和所致疾病；熟悉病原性球菌的生物学性状；了解病原性球菌的微生物学检查和防治原则。四、教学重点和难点重点：病原性球菌的致病物质和所致疾病难点：病原性球菌

25、的致病机制五、教学方法及手段讲授、讨论六、教学过程设计 第十六章 病原性细菌第一节球菌病原性球菌主要引起化脓性感染，又称为化脓性球菌。分革兰阳性球菌与革兰阴性球菌两大类。前者主要包括葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等；后者主要包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。一、葡萄球菌是医院内感染的重要传染源。（一）生物学性状1、形态与染色2、培养特性3、生化反应4、抗原构造（1）葡萄球菌A蛋白（SPA）：协同凝集试验。（2）多糖抗原5、分类分为金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌与腐生葡萄球菌。其中金黄色葡萄球菌多为致病菌，表皮葡萄球菌偶可致病，腐生葡萄球菌一般不致病。6、抵抗力 葡萄球菌是无芽胞细菌中抵抗力最强的细胞

26、之一。金黄色葡萄球菌耐青霉素G的菌株已高达90%以上，医院内感染最常见的致病菌。（二）致病性与免疫性1、致病物质（1）血浆凝固酶（2）葡萄球菌溶素（3）杀白细胞素（4）肠毒素 （5）表皮剥脱毒素，又称表皮溶解毒素（。（6）毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）：引起毒性休克综合征（TSS）的主要病因之一。2、所致疾病 （1）侵袭性疾病：主要引起化脓性感染。1）局部感染疖、痈、毛囊炎、麦粒肿、伤口化脓、脓肿等，脓汁黄而粘稠，病灶界限清楚，多为局限性。2）全身感染（2）毒素性疾病：1）食物中毒2）假膜性肠炎长期使用或滥用抗生素引。3）烫伤样皮肤综合征由表皮剥脱毒素引起。4）毒性休克综合征主要由TS

27、ST-1引起。3、免疫性（三）微生物学检查法1、标本2、直接涂片镜检3、分离培养与鉴定血浆凝固酶与甘露醇发酵试验。4、葡萄球菌肠毒素的测定通（四）防治原则自身菌苗疗法。二、链球菌（一）生物学性状1、形态与染色2、培养特性营养要求较高。3、生化反应4、抗原构造（1）多糖抗原：（2）蛋白质抗原：与致病性有关的是M抗原。（3）核蛋白抗原：5、分类（1）根据溶血现象分类： 1)甲型溶血性链球菌溶血。亦称草绿色链球菌，可致亚急性细菌性心内膜炎。2）乙型溶血性链球菌 溶血，亦称溶血性链球菌。病力强。3）丙型链球菌不溶血，一般不致病。（2）根据抗原结构分类：对人致病的链球菌菌株90属A群。6、抵抗力（二）致病性与免疫性1、致病物质A群致病力最强，也称化脓性链球菌，是人类细菌感染常见的病原菌之一。（1）链球菌溶素（streptolysin）：分为链球菌溶素O（SLO）与链球菌溶素S（SLS）。SLO抗体的测定可作为链球菌新近感染指标之一或作为链球菌感染后超敏反应性疾病的辅助诊断。