无菌模拟分装试验验证方案.docx

1、无菌模拟分装试验验证方案有限公司验证文件文 件 名 称无菌模拟分装试验验证方案 文 件 编 号起 草 人起草日期年 月 日起 草 部 门验证方案会签单会签部门签 名日 期质监部QA年 月 日质监部QC年 月 日生产部年 月 日物控部年 月 日设备部年 月 日生产车间年 月 日验证领导小组审批审批意见： 批准人 ： 年 月 日 审批意见： 批准人： 年 月 日 1.概述2.再验证目的3.再验证项目中各部门及人员责任4.确定可接受标准5.验证内容及记录6.验证结果评价及再验证周期的确定7.附录（试验记录）1.概述：培养基模拟无菌分装是在与实际生产相同的工艺条件和操作方法下，模拟分装经灭菌的胰酶酪胨

2、大豆培养基到2ml安瓶中，经拉丝、封口后，按规定条件进行培养，以确认无菌分装工艺的可靠性。在此验证之前，空气系统、水处理系统、灭菌系统等验证工作均应结束。2.验证目的： 通过培养基模拟无菌药品分装试验证明，在无菌溶液分装过程中所采用的各种方法和规程，可使微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，并提供保证所生产产品的无菌性的可信度达到可接受的合格标准的证据。对整个无菌分装过程进行验证试验，根据验证结果来评估生产线正常运转时对微生物控制的状况，判断生产过程的可靠性，利用培养基模拟分装试验来证明，在正常状态下，生产过程是可靠的，满足当产品污染的概率为小于0.1%时，无菌可信度为95%的要求。3.

3、再验证项目中各部门及人员责任3.1再验证项目小组成员部门姓 名部门姓名生产部生产部质监部质监部质监部质监部设备部设备部水针车间水针车间3.2.验证工作中各部门责任质监部： QA：负责验证过程的协调工作；负责掌握验证工作进度；负责验证过程中的质量监控；负责公司有关的验证培训工作；负责验证的归档工作。QC：负责验证过程中取样、检验及验证记录和检验原始记的填写，并出具检测报告。生产部：组织验证全过程的实施，负责验证过程中工艺参数检查。生产车间：负责起草验证方案；负责验证过程中各岗位操作及记录的填写。设备科：负责设备的安装、调试，并做好相应的记录；负责建立设备档案；负责验证前的仪器、仪表的校验工作。3

4、.3 验证依据及相关文件文 件 名 称存 放 地 点水针车间配制岗位的标准操作规程质量部水针车间灌封岗位（安瓶）的标准操作规程质量部真空检漏灭菌工序岗位的标准操作程序质量部水针车间真空灭菌岗位的标准操作规程质量部水针车间洗瓶岗位的标准操作规程质量部检查人：QA 日期： 年 月 日4.确定可接受的合格标准： 警戒限： 可信限为95%时污染概率大于0.05%； 合格限： 可信限为95%时污染概率小于0.1%； 分装量与污染控制数关系表模拟分装数量/瓶污染控制数量/瓶模拟分装数量/瓶污染控制数量/瓶30004742047436294小于162957751小于277529151小于3 5.验证内容及记

5、录： 5.1相关物料的预处理 5.1.1胰酶酪胨大豆培养基（即TSB/SCDM）：将胰酶酪胨大豆培养基（共1瓶）紫外灯照射灭菌。将经灭菌后胰酶酪胨大豆培养基称量224g,溶于7000ml注射用水中，搅匀，经除菌过滤到灌装室。5.1.2安瓿瓶2ml安瓶经超声波清洗后，300、大于8分钟干热灭菌。灭菌后做无菌检查，应符合规定。5.2培养基性能测试：5.2.1微生物生长性能测试：将灭菌后的培养基分装于40支的安瓶中，在一半数量的安瓶中接种枯草杆菌，接种量为100CFU；在另外一半安瓶中接种白色念珠菌，接种量100CFU。接种后进行拉丝、封口，分别在3035和2025培养7天，7天内至少50%以上接种

6、的安瓶的TSB/SCDM培养基中应出现明显的所接种的微生物的生长。5.2.2培养基无菌性试验：在证明了培养基的无菌性之后进行模拟分装的方法，以排除培养基无菌性对此项验证试验的影响，从而确认模拟分装试验中的污染来源于分装过程。培养基无菌性试验的主要方法是将灭菌后用于模拟分装的培养基分装于100支无菌安瓶中，拉丝、封口。其中50支安瓶放到3035下培养7天，同时将另外50支安瓶放于2025下培养7天。7天内安瓶TSB/SCDM培养基中应无任何微生物生长。5.3操作过程及无菌环境控制与监控5.3.1微生物控制与检测5.3.1.1洁净区人员无菌服表面微生物检查：用无菌取样擦签分别在操作人员的手套、前胸

7、、手臂进行擦拭做微生物检查（每次试验不少于三人次）。5.3.1.2无菌区微生物检查：应对无菌区内的墙壁、门、设备及操作者可能接触的各种表面应进行无菌程度检验。用无菌取样签擦拭取样的方法取样，取样面积为25cm2。5.3.1.3空气中微生物数量监测：生产前的静态沉降菌测试和生产过程中的动态沉降菌测试，在分装机附近放2个平皿连续暴露取样（每一小时放2个平皿）；一个平皿应放置于灌装室环境最差的部位（如回风口）5.3.2 尘埃粒子监测：检测的结果能证明分装生产的关键区域空气质量达到了100级洁净区的空气质量标准。5.4培养基模拟分装试验操作：按每批不少于3200支的批量进行模拟无菌分装。分装已除菌过滤

8、的培养基于2ml安瓿瓶中，装量为2ml。机器每灌650支后，机器打到全不灌运行一小时后，继续进行灌装，在6小时内灌完。灌装时，洁净区内5人同时进行操作。灌装结束后，进行灭菌检漏，100，30分钟。（见附表1、2、3、4）5.5取样及判断标准：5.5.1安瓿瓶无菌检测：评价方法：在灌封时，每灌650支取一次样，随机取样，每次取样10支。判断标准：应无细菌生长。5.5.2操作人员无菌性检查：评价方法：在灌装前，中，后分别对操作人员进行取样检查。取样时，用已灭菌的棉签擦拭前胸、手臂，手套。判断标准：手套检出菌数2个CFU，霉菌1个CFU；前胸、手臂检出菌数之和10个CFU。5.5.3无菌区检查：5.

9、5.3.1门、墙壁、设备及操作者可能接触的表面：评价方法：用已灭菌的棉签擦拭分别擦拭门、墙壁、设备及操作者可能接触的表面，擦拭面积为25cm2。判断标准：门、墙壁、设备及操作者可能接触的表面检出菌数3个CFU5.5.3.2空气中微生物数量检查：评价方法：在分装前1小时开始，在分装机附近放2个平皿（一个放到与洗瓶机相连处，另外一个放到回风口处），每隔一小时换2个平皿，直到生产结束后。判断标准：每个平皿暴露1小时的微生物数：100级细菌、霉菌数均为0；万级区域细菌10个、霉菌数5m粒子数为0；0.5m粒子数3500。（见附表7）5.5.4微生物生长性能测试：评价方法：在灭菌后随机抽取培养基40支，

10、其中20支用于接种枯草杆菌，标记为样1；另外20支接种白色念珠菌，标记为样2。判断标准：培养7天后，样1、样2应至少有50%生长所接种的微生物。（见附表8）5.5.5培养基无菌性试验：评价方法：在灭菌前随机抽取培养基100支，做无菌检查。判断标准：培养7天后，应无任何微生物生长。(见附表9)5.5.6灭菌后培养基无菌检测：评价方法：对灭菌后胰酶酪胨大豆培养基做无菌检测。判断标准：在2025培养7天后，再在3035培养7天，应无菌生长。（见附表11）5.5.7棉签取样法擦拭操作：棉签擦试方法：试验者手戴灭菌后的橡胶手套，拿着润湿的棉签平稳而缓慢地擦拭取样表面，在向前移动的同时将其从一边移到另一边

11、，擦拭过程覆盖整个表面。然后翻转棉签，让棉签的另一面也进行擦拭，但与前次擦拭移动方向垂直，每个棉签擦拭面积不超过25cm2见图：5.6 试验结果计算微生物污染率（%）可用下列公式计算：污染数污染率%= 100%总分装数量破损瓶数试验结果汇总：时间总分装数破损数培养数污染数污染率结论（见附表10）6 验证结果评价及再验证周期的确定 评价无菌模拟分装试验结果的主要指标之一是微生物污染水平，如果试验结果证明其污染水平超过规定的合格限度，（参照4），则应立即停止生产，调查并记录污染产生的原因。在调查结束并采用相应的措施后应重复进行培养基无菌模拟分装试验。如果试验结果证明污染在规定的合格限度内，证明按照

12、操作方法及规程可以保证产品合格。7 附录表1品名 规格 批号 批量工序名称洗瓶工序室内温度： 相对湿度： % 压差： Pa安瓶规格生 产 日 期 年 月 日1.设备、公用系统确认设备完好完善状态 完好 不完好 完善 不完善领瓶数量理瓶数量洗瓶数量废瓶数量出瓶数量注射用水压力压缩空气压力洗瓶开机时间洗瓶关机时间网带速度 MPa MPa灭菌段设定温度瓶灭菌的时间备注：操作者： 复核者： QA检查员：附表2品名 规格 批号 批量工序名称配制工序室内温度： 相对湿度： % 压差： Pa配制总体积生 产 日 期 年 月 日1.设备、公用系统确认设备完好完善状态 完好 不完好 完善 不完善原辅料称量胰酶酪

13、胨大豆培养基(g)注射用水（ml）操作者： 复核者： QA检查员：除菌前起跑点压力为：0.45m滤芯 Mpa0.22m滤芯 MPa配制时间：过滤时间：过滤后的体积除菌后气泡点压力分别为 Mpa; Mpa备注：操作者： 复核者： QA检查员：附表3品名 规格 批号 批量工序名称灌封工序室内温度： 相对湿度： % 压差： Pa灌封装量生 产 日 期 年 月 日1.设备、公用系统确认设备完好完善状态 完好 不完好 完善 不完善分装开始时间：分装结束时间：接收药液： 接收安瓶： 装量：装量123456789101234567调试支数：分装合格数分装破损数剩余药液破瓶数返瓶数操作者： 复核者： QA检查

14、员：附表4品名 规格 批号 批量工序名称检漏工序生 产 日 期 年 月 日1.设备、公用系统确认设备完好完善状态 完好 不完好 完善 不完善灭菌支数灭菌温度灭菌时间灭菌开始时间灭菌结束时间备注：操作者： 复核者： QA检查员：附表5品名： 批号： 规格： 生产日期：项目标准检验结果安瓶无菌检测7天无任何微生物生长操作人员无菌检查手套检出细菌2个霉菌1个CFU前胸、手臂检出菌数之和10CFU无菌区检查门检出菌数3CFU墙壁检出菌数3CFU设备检出菌数3CFU检验人： 复核人：附表6空气中的微生物数量检测：时间平皿1小时2小时3小时4小时5小时6小时7小时与洗瓶连接处回风口检验人： 复核人：附表7

15、尘埃粒子检测：项 目标 准检 验 结 果百级洁净区5m粒子数为00.5m粒子数3500检验人： 复核人附表8：微生物生长性能测试：品名： 批号： 规格： 生产日期：样1：安瓶1-11-21-31-41-51-61-71-81-91-10菌 检安瓶1-111-121-131-141-151-161-171-181-191-20菌 检样2管 号2-12-22-32-42-52-62-72-82-92-10菌 检管 号2-112-122-132-142-152-162-172-182-192-20菌 检检验人： 复核人： 日期： 年 月 日 附表9品名： 批号： 规格： 生产日期：项目标准检验结果培

16、养基无菌性试验培养7天后无菌检验人： 复核人： 日期： 年 月 日附表10试验结果计算时间总分装数破损数培养数污染数污染率结论操作人： 复核人： 日期： 年 月 日附表11灭菌后培养基无菌检测：管 号2-12-22-32-42-52-62-72-82-92-10菌 检管 号2-112-122-132-142-152-162-172-182-192-20菌 检管 号2-212-222-232-242-252-262-272-282-292-30菌 检管 号2-312-322-332-342-352-362-372-382-392-40菌 检管 号2-412-422-432-442-452-462

17、-472-482-492-50菌 检管 号2-512-522-532-542-552-562-572-582-592-60菌 检管 号2-612-622-632-642-652-662-672-682-692-70菌 检管 号2-712-722-732-742-752-762-772-782-792-80菌 检管 号2-812-822-832-842-852-862-872-882-892-90菌 检管 号2-912-922-932-942-952-962-972-982-992-100菌 检管 号2-1012-1022-1032-1042-1052-1062-1072-1082-1092-110菌 检管 号2-1112-1122-1132-1142-1152-1162-1172-1182-1192-120菌 检管 号2-1212-1222-1232-1242-1252-1262-1272-1282-3000菌 检