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推荐下载复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜.docx

1、推荐下载复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜键入文字复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要求,解决您在论文写作中的难题。复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜作者:赵佳, 沈霖, 范恒 朱锐【摘要】 目的观察复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜 K 基因结合核转录因子(NF- B)及信号转导和转录激活因子 6(STAT6)活化的影响,探讨复方苦参结肠溶胶囊的治疗该病的可能机制。方法将 34 例溃疡性结肠炎患者随机分为两组,中药组

2、22例使用复方苦参结肠溶胶囊治疗,西药组 12 例使用柳氮磺吡啶治疗。两组均治疗 8周。观察比较两组治疗前后的症状、体征、大便常规、结肠镜和病理检查,并采用免疫组化方法检测两组治疗前后的 NF- Bp65 及 STAT6 的表达情况。结果中药组临床疗效总有效率为 100 %,西药组为 75 %(P 0.05);中药组结肠黏膜病变疗效总有效率为 90.91键入文字%,西药组为 75 %(P 0.05)。两组患者治疗后 NF- Bp65 及 STAT6 的表达均降低,且中药组优于西药组(P 0.05)。结论复方苦参结肠溶胶囊抑制 NF- Bp65 及 STAT6 的活化及表达可能是其治疗溃疡性结肠

3、炎的疗效机制之一。【关键词】 结肠炎 溃疡性 复方苦参结肠溶胶囊 K 基因结合核转录因子 信号转导和转录激活因子 6Abstract:ObjectiveTo observe the effect of CSFJC on expression of NF- B and STAT6 inthe intestinal mucosa of patients with ulcerative colitis and to study the possible mechanism.Methods34 patients with ulcerative colitis were randomly divided

4、 into a tradional Chinesemedicine (TCM) group (n=22) treated by CSFJC, and a Western medicine (WM) group(n=12) treated by Sulfasalazine Tablets,both of them were treated for 8 weeks. Before andafter the treatment, the symptoms, the physical sign, the routine stool test, the colonoscopeand pathologic

5、al examination in the two groups were observed and contrasted. Moreover, theexpressions of NF- B and STAT6 were detected with immunohistochemistry in the twogroups. ResultsThe total effective rate of therapeutic effect was 100 % in the TCM group and75 % in the WM group, and the total effective rate

6、of colonic mucosa Lesion was 90.9 % inthe TCM group and 75 % in the WM group, and there were both significant differences (P0.05). After the treatment, expressions of NF- B and STAT6 in patients of the two groupswere decreased, however, the results of the TCM group were better than the results of th

7、eWM group, with significant difference (P 0.05).ConclusionCSFJC can inhibit the activationand expression of NF- B and STAT6, which may be one of the mechanisms for treatment ofulcerative colitis.2键入文字Key words:Colitis, Ulcerative; Compound Sophorae Flavescentis Jiechangrong capsule;NF - B; STAT6溃疡性结

8、肠炎是一种病因尚不十分清楚的直肠和结肠慢性非特异性炎症性疾病,病变主要限于大肠黏膜与黏膜下层,临床表现为腹泻、粘液脓血便、腹痛,病情轻重不等,多呈反复发作的慢性病程1。前期研究作者采用复方苦参结肠溶胶囊治疗本病,疗效显著2。在此基础上,本研究重点观察复方苦参结肠溶胶囊对溃疡性结肠炎患者肠黏膜 K 基因结合核转录因子(NF- B)及信号转导和转录激活因子 6(STAT6)表达的影响,并探讨其疗效机理。现报道如下。1 临床资料1.1 病例纳入及排除病例的选择参照中华医学会消化分会 2000 年成都全国炎症性肠病学术研讨会 炎症病诊断治疗规范的建议 的标准进行。34 例溃疡性结肠炎患者均为2005-

9、072006-05 间在武汉协和医院中医科门诊就诊的患者。全部病例均有持续性或反复发作的腹泻、腹痛、粘液便或脓血便的临床症状,且中医辨证为湿热内蕴证。结肠镜检查可见黏膜血管纹理模糊、紊乱、充血、水肿、出血及脓性分泌物附着。病变明显处可见弥漫性多发糜烂或溃疡。病理检查可见固有膜内有弥漫性、慢性炎症细胞及中性粒细胞,嗜酸性粒细胞浸润,隐窝有急性炎症细胞浸润, 隐窝上皮增生,杯状细胞减少。全部病例按临床严重程度分级:腹泻每日 4 次以下,便血轻或无,无发3键入文字热、脉搏加快或贫血为轻度;介于轻度和重度之间为中度;腹泻每日 6 次以上,伴明显黏液血便,体温 37.5,脉搏 90 次/min,血红蛋白

10、 100g/L 为重度。结合临床症状及实验室检查排除细菌性痢疾、阿米巴痢疾、慢性血吸虫病、肠结核等感染性结肠炎及克隆病、缺血性肠炎、放射性肠炎患者及结肠癌、直肠癌患者,并排除症状严重伴全身中毒性症状的急性爆发型患者。1.2 一般资料将 34 例患者随机分为两组。中药组 22 例中,男 5 例,女 17 例;年龄2564 岁,平均(32.51 12.46)岁;病程 1.525 年,病情程度轻度 9 例,中度 11 例,重度 2 例。西药组 12 例中,男 6 例,女 6 例;年龄 2462 岁,平均(31.73 11.58)岁;病程228 年,病情程度轻度 5 例,中度 6 例,重度 1 例。两

11、组患者的年龄、病情程度比较差异无统计学意义(P 0.05),具有可比性。所有病例均经结肠镜和病理学检查治疗前后各 1 次,所有标本均由病理活检取出,各切出 3 片,1 片行 HE 染色,另 2 片行免疫组织化学染色。2 方法2.1 治疗方法中药组口服复方结肠溶胶囊,本方由苦参、地榆、青黛、白及、甘草等组成。 该药由北京中惠药业有限公司研制的中药新药(第六类),口服 4 粒/次,0.4 g/粒,3 次/d。治疗期间停用其他治疗溃疡性结肠炎的中、西药。西药组依据病情口服柳氮磺吡啶片,4 片/次,0.25 g/片, 3 次/d,该药由上海福达制药有限公司生产。两组疗程均为 8 周。治疗前后检测血、尿

12、、大便常规,肝、肾功能,心电图,并进行结肠镜及病理检查。4键入文字2.2 NF- Bp65 及 STAT6 检测3采用链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连结法(SP法)。4 m 石蜡切片脱蜡至水,3 %过氧化氢去离子水室温孵育 10 min,将组织切片浸入组织抗原修复液(枸橼酸钠液)中,后置入微波炉内进行组织修复(高温)2 min。室温放凉15 min,PBS 洗 3 次,3 min/次,滴正常小牛血清封闭,置于恒温培养箱 37 30min,倾去血清,滴加一抗,4 冰箱孵育过夜,后用 37 恒温培养箱孵育 40min。PBS 洗 2 次,3 min/次,滴加生物素标记的二抗,37 孵育 40 mi

13、n。PBS 洗 3 次,3min/次,辣根过氧化物酶的链霉卵白素,37 孵育 30 min。倾去多余的二抗。PBS 洗3 次,3 min/次。DAB 显色液显色,显微镜下控制显色时间。用苏木素复染,乙醇脱水,二甲苯透明,中性树脂封片。两种一抗分别为兔抗人 NF- Bp65 多克隆抗体及兔抗人 STAT6 多克隆抗体(均购自武汉意德生物技术有限公司),SP 试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。每张片子随机选取 8 个高倍镜视野(200 ),用免疫组化分析软件系统 HMIAS-2000 高清晰度彩色医学图文分析系统(华中科技大学同济医学院清屏影像公司)对所选视野内的棕黄色阳性信号进行图像分析,

14、计算各组患者肠黏膜 NF- Bp65及 STAT6 的阳性表达情况,即代表阳性强度的平均光度的均值。2.3 统计学方法采用 SPSS 13.0 统计软件处理数据,使用( s)表示,治疗前后比较采用配对样本 t 检验,组间比较采用卡方检验。3 结果5键入文字3.1 疗效判定标准参照中华医学会消化分会 2000 年成都全国炎症性肠病学术研讨会对 炎症病诊断治疗规范的建议 及中药新药治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎的临床研究指导原则(2002 年试行版)进行判定。3.1.1 临床疗效判定标准临床症状消失,结肠镜检查黏膜大致正常为完全缓解;临床症状基本消失,结肠镜复查黏膜轻度炎症或部分假息肉形成为有效;临

15、床症状、内镜及病理检查无改善为无效。3.1.2 黏膜病变疗效判定标准肠镜复查黏膜病变恢复正常,或溃疡病灶已形成瘢痕;肠镜复查粘膜病变恢复程度达 2 级以上,为显效(完全缓解);肠镜复查黏膜病变恢复程度达 1 级以上为有效;肠镜复查黏膜病变改善未达到以上标准,甚至加重者为无效。3.2 两组临床疗效比较中药组 22 例治疗 8 周,显效 12 例,有效 10 例,无效 0 例,总有效率为 100 %;西药组 12 例中,显效 4 例,有效 5 例,无效 3 例,总有效率为 75%。两组临床疗效差异有统计学意义 2=5.63(P 0.05)。3.3 两组黏膜病变疗效比较中药组 22 例中,显效 9

16、例,有效 11 例,无效 2 例,总有效率为 90.9 %;西药组 12 例中,显效 4 例,有效 5 例,无效 3 例,总有效率为 75 %。两组比较差异有统计学意义 2=6.52(P 0.05)。6键入文字3.4 NF- Bp65 及 STAT6 的测定两组患者治疗后 NF- Bp65 及 STAT6 的表达均降低,中药组与西药组治疗后比较差异有统计学意义 t=2.54,P=0.02(P 0.05),且中药组优于西药组。见表 1。表 1 各组 NF- Bp65 及 STAT6 表达平均光度的比较 (略)中药组与西药组治疗后比较,差异有统计学意义(P 0.05)NF- Bp65 及 STAT

17、6 活化后阳性表达为棕黄色,主要定位于细胞核,中药组治疗前阳性表达强,中药组治疗后阳性表达明显减弱(见图 1)。4 讨论正常情况下,NF- B 与抑制蛋白 I B 结合在细胞质中,处于非活化形式。当细胞受到刺激后,I B 磷酸化并随后被降解,NF- B 就转入细胞核中并激活相关基因的转录4。STAT6 属于信号转导和转录激活因子(STATS)家族中的一员。与 STAT 家族中其他成员的结构相似,STAT6 在它的 N 末端附近有 4 个螺旋区域,中心有 DNA 结合区域,一个含磷的酪氨酸结合区域(Src 同族域或 SH2),以及在 C 的末端有转活区域5。STAT6 在胞质中以一种潜伏的单体形

18、式存在,如果某种刺激因素使 STAT6 结合在 IL-4受体上,STAT6 的 641 位点上的酪氨酸残基发生磷酸化,STAT6 被激活,进入细胞核,与特定基因的启动子结合,诱发特发基因的表达6。既往研究表明,与正常组比较,溃疡性结肠炎患者肠黏膜中 NF- Bp65 的活化及表达是增高的7。同样与正常组比较,溃疡性结肠炎患者肠黏膜中 STAT6 的表达上调7键入文字8。活化后的 NF- B 转入细胞核,刺激 IL-1、TNF- 、 IL-6、IL-8、MHC类分子、ICAM-1 及 iNOS 的表达9。 活化的 STAT6 参与了 Th2 的分化10,Th1/Th2 的平衡失调。tips:感谢

19、大家的阅读,本文由我司收集整编。仅供参阅! 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考,以及论文写作指导和格式排版要求,解决您在论文写作中的难题。关于麻疯树提取物体外抗病毒和杀菌作用的初步研究作者:刘娟,雷蕾,唐琳,李昱星,陈放【摘要】 目的研究麻疯树提取物的体外抗病毒和杀菌作用,为进一步提取分离有效成分提供实验依据。方法采用细胞培养技术,观察麻疯树 1,2,3 号提取物对单纯疱疹型病毒(HSV-)、单纯疱疹型病毒(HSV-)和流感 A3 型病毒(A3)的直接灭活作8键入文字用以及抑制它们增殖的作用;采用悬液定量杀菌法,观

20、察麻疯树 1 号提取物对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的杀灭作用。结果麻疯树 1,2,3 号提取物对细胞的毒性较小;提取物既能抑制单纯疱疹病毒在胞内的增殖,又能直接灭活该病毒;总体而言,提取物对 HSV-在胞内增殖的抑制作用略优于 HSV-,对 HSV-的直接灭活作用更是显著强于 HSV-;提取物对 A3 的直接灭活作用效果显著;3 号提取物还能抑制A3 在鸡胚内的增殖。麻疯树 1 号提取物对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有极强的杀灭作用。结论麻疯树提取物具有体外抗病毒、杀菌的作用。【关键词】 麻疯树 提取物 抗病毒 杀菌Abstract:ObjectiveTo provide

21、an experimental evidence for further extraction andseparation of active components, we investigated the antivirus and bactericidal effects ofextracts from Jatropha curcas L. in vitro. MethodsWe applied the method of cell culture toobserve extracts from Jatropha curcas L., No.1,2,3, directly killing

22、herpes simplex virus(HSV- ) and influenza virus A3, as well as inhibiting their proliferation in cells. Inanother experiment, we observed the bactericidal effect of No.1 extract from Jatropha curcasL. on Candida albicans, Staphylococcus aureaus and Escherichia coli. ResultsThe extractsfrom Jatropha

23、curcas L., No.1,2,3, had lower cytotoxicity. All the extracts could inhibit herpessimplex virus from proliferating in cells and directly kill the virus. Their inhibitory action onthe proliferation of HSV-was a little better than , while their inhibitory effect on HSV-was obviously stronger than . Al

24、l the extracts were able to kill influenza virus A3directly, and extract No.3 could inhibit the proliferation of this virus in embryonated egg.Furthermore, No.1 extract had a very strong bactericidal effect on Candida albicans,9键入文字Staphylococcus aureaus and Escherichia coli.ConclusionExtracts from

25、Jatropha curcas L.have antivirus and bactericidal effects in vitro.Key words: Jatropha curcas L.; Extracts; Antivirus; Bactericidal麻疯树 Jatropha curcas L.,又名黄肿树、芙蓉树、假花生、亮桐、吗哄罕、桐油树、南洋油桐,属于大戟科(Euphorbiaceae)麻疯树属 Jatropha 植物,主要分布于热带和亚热带地区1。麻疯树全身皆可入药,根、茎皮和叶外用具有消肿散淤、止血、杀虫止痒的功能24,可用于跌打肿痛、创伤出血、皮肤瘙痒、湿疹等;茎叶内服

26、还可以治疗胆结石2,5;另经临床试验证明6,其乳汁具有抗病毒作用。近年来还发现麻疯树种子具有显著的抗癌活性7。由此可见,麻疯树作为一种新兴的资源植物,在新药开发方面具有巨大的应用价值。1 材料1.1 细胞非洲绿猴肾(Vero)传代细胞,由中国中医科学院西苑医院基础研究中心病毒室提供。1.2 鸡胚九日龄鸡胚,购自中国农业科学院。10键入文字1.3 病毒单纯疱疹型病毒株(HSV-)、单纯疱疹型病毒株(HSV-) 和流感 A3型病毒株(A3),由中国预防医学科学院病毒所提供。HSV-和 HSV-经 Vero 细胞增毒后,分别收集,备用。A3 经九日龄鸡胚增毒后,其红细胞凝血效价为 1160,收集,备

27、用。1.4 菌种白色念珠菌(Candida albicans,ATCC10231)第 5 代培养物,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureaus,ATCC6538)第 4 代培养物,大肠杆菌(Escherichia coli,ATCC8099)第 4 代培养物,均由四川省疾病预防控制中心提供。1.5 药物麻疯树提取物:麻疯树干叶 60%乙醇的浸提液,经低压浓缩并冷冻干燥后制得黑褐色粉末,编为 1 号,含生药 10 g/g。以上述浸提液为原料,以大孔树脂吸附层析法进行梯度洗脱,收集 30%和 50%乙醇洗脱的产物,经低压浓缩并冷冻干燥后制得粉末为黄绿色和棕黄色,对应编为 2 号和

28、 3 号,分别含生药 33 g/g 和 100 g/g。阿昔洛韦滴眼液,1 mg/ml,武汉五景药业有限公司生产,批号为 07010904。病毒唑注射液,100 mg/ml,宜昌三峡制药厂生产,批号为 20070311。1.6 仪器与试剂 96 孔细胞培养板;CO2 孵箱(日本 Yamato 科学株式会社);倒置显微镜(重庆光学仪器厂,型号:1833670);微孔滤器。DMEM 干粉培养基(美国 Invitrogen 公司,批号:1290007)、胎牛血清、吐温。细胞生长液(含 10%胎牛血清)、维持液、消化液以及胰酶液(含 2%胎牛血清)等按医学病毒学基础及实验技术8配制。胰蛋白胨大豆琼脂培

29、养基(TSA)、胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB)、磷酸盐缓冲液(PBS)等按消11键入文字毒技术规范9配制。2 方法与结果2.1 药物体外抗单纯疱疹病毒(HSV)实验82.1.1 HSV 对 Vero 细胞的毒力测定将长成单层的 Vero 细胞用胰酶液消化成单个细胞,以细胞生长液调整细胞数至 8.0 104ml。按每孔 0.1 ml 加入 96 孔细胞培养板内,放在 37,5%CO2 孵箱中培养 24 h。待 96 孔细胞培养板内的 Vero 细胞长成单层后,取上述制备好的 HSV-和 HSV-毒株,用维持液将其分别做 10 倍系列稀释(10-110-10),然后按 0.1 ml/孔接种于细胞

30、培养板内的 Vero 单层细胞中,每浓度 6 个复孔,同时设细胞对照。置 37,5%CO2 孵箱中培养 7 d,每日观察并记录细胞病变(cytopathic effect,CPE),测定组织细胞半数感染量(TCID50)。结果见表 1。表 1 单纯疱疹病毒的毒力测定(略)按照 Reed-Muench 氏法8计算,HSV-和 HSV-的 TCID50 分别为 10-4.6/ml 和10-3.7/ml。在 2.1.3 和 2.1.4 项实验中,所用病毒液浓度为 100 TCID50/0.1ml。2.1.2 药物对 Vero 细胞的毒性实验用维持液分别将 1,2,3 号药物作系列倍比稀释,药液浓度梯度为 2,1,0.5,0.25,0.125,0.062 5,0.031 25 mg/ml,加入 96 孔细12键入文字胞培养板的 Vero 单层细胞中,0.1 ml/孔,每实验组 4 个复孔,同时设细胞对照和阿昔洛韦对照(阳性对照)。置 37,5%CO2 孵箱中培养,观察 CPE,并记录各药物的最大无毒浓度(TC0),共 7 d。最后,按照 Reed-Muench 氏法8计算出各药物的半数有毒浓度(TC50)。

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