肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基.docx

1、肠球菌溶血性链球菌和粪链球菌检验培养基葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌的增菌培养 配方：（g/L）牛肉粉 氯化钠 蛋白胨 磷酸氢二钾 葡萄糖 pH值7.50.13.0 5.0 10.0 2.0 10.0 25 原理： 蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钾为缓冲剂；葡萄糖提供碳源。 用法： 称取本品30.0g,煮沸溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在361培养24小时。质控菌株ATCC 生长情况 溶血性链球菌（10-8）+单增李斯特氏菌27853（10-8）+大

2、肠杆菌25922 +/-沙门氏菌14028+/-匹克氏肉汤基础APicks Broth BaseA用途：用于溶血性链球菌的增菌培养 配方：（g/L）胰蛋白胨 牛心浸粉 叠氮钠 结晶紫 pH值7.3-7.510.0 20.0 0.065 0.002 25 原理： 胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子；脱纤维兔血（或羊血）为溶血性链球菌提供大量生长因子；结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。用法： 称取本品30.0g,加热溶于 1000ml蒸馏水中,分装, 121高压灭菌15分钟, 冷至50左右时,加入脱纤维羊血,混匀。质量控制：在361培养18-24小时。质控菌株ATCC 生长情况 溶血现象溶

3、血性链球菌+（大）单增李斯特氏菌27853+（小）大肠杆菌25922 -沙门氏菌14028-肉浸液肉汤培养基Meat Infusion Broth用途：用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养（GB标准） 配方：（g/L）牛肉粉 氯化钠 蛋白胨 磷酸氢二钾 pH值7.50.13.0 5.0 12.0 2.0 25 原理： 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；氯化钠可维持均衡的渗透压。用法： 称取本品20.0g,溶解于1000ml 蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在361培养18-24小时。质控菌株菌株编号生长情况其它特征溶血性链球

4、菌ATCC32210+浑浊金黄色葡萄球菌ATCC25923+浑浊大肠埃希氏菌ATCC25922+浑浊沙门氏菌ATCC14028+浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤Azide Dextrose Broth用途：用于链球菌的增菌培养 配方：（g/L）胰蛋白胨 牛肉浸粉 氯化钠 葡萄糖 叠氮钠 pH值7.0-7.415.0 4.5 7.5 7.5 0.2 25 原理： 胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；葡萄糖提供碳源；叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌。用法： 称取本品34.7g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装，121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在361培养18-24小时。质控菌株菌株编号

5、生长情况其它特征肠球菌+/大肠埃希氏菌ATCC25922-/粪肠球菌ATCC29212+/金黄色葡萄球菌ATCC25923-/乙基紫叠氮钠肉汤用途：用于链球菌的增菌培养 配方：（g/L）酪蛋白胨 酵母浸粉 葡萄糖 氯化钠 磷酸氢二钠 磷酸二氢钠 叠氮钠 乙基紫 pH值7.00.213.5 6.5 5.0 5.0 2.7 2.7 0.4 0.00083 25 原理： 酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂；乙基紫作为指示剂。 用法： 取本品35.8g,溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭

6、菌15分钟,备用。质量控制：KF链球菌琼脂KF Streptococcus Agar用途：用于链球菌的选择性分离及计数（GB、SN标准） 配方：（g/L）月示蛋白胨 酵母粉 甘油磷酸钠 氯化钠 麦芽糖 乳糖 叠氮钠 琼脂 溴甲酚紫 pH值7.20.210.0 10.0 10.0 5.0 20.0 1.0 0.4 13.0 0.015 25 原理： 月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；麦芽糖和乳糖为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌；琼脂是培养基的凝固剂；溴甲酚紫为指示剂染料。 用法： 称取本品69.4g,加热溶解于 1000ml蒸馏水中,121高压 灭菌15分

7、钟,冷却至50-60时,加入无菌1%TTC溶液10ml, 混匀,倾入无菌平皿,备用。质量控制：在360.5下培养48h。菌 名菌 号 生长状况 培养特征粪性链球菌 CMCC(B)32223 良好 红色或粉红色中心大肠埃希氏菌ATCC25922被抑制肠球菌琼脂(胆盐七叶苷叠氮钠琼脂)Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar)用途：用于食品和水中肠球菌的计数 货号：HB0133-3配方：（g/L）牛肉浸粉 胰酪蛋白胨 酵母粉 牛胆粉 氯化钠 七叶苷 柠檬酸铁铵 叠氮化钠 柠檬酸钠 琼脂 pH值7.10.23.0 17.0 5.0 10.0 5.0 1.0

8、0.5 0.25 1.0 13.5 25 原理： 胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 称取本品56.3g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121 高压灭菌15分钟,冷至451，倾入含1ml样品液平皿中约15ml培养基，混匀，凝固。352倒置培养基培养242h。注：从保温开始至做成平板时间不要超过4h。质量控制：在360.5培养24小时。菌 名 菌 号 生长状况 培养特征粪链球菌 CMCC(B

9、)32223良好 棕黑色，具有棕色晕轮金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制 大肠埃希氏菌ATCC25922被抑制CATC琼脂CATC Agar用途：用于食品和饮料肠球菌的分离培养 配方：（g/L）胰酪蛋白胨 酵母浸粉 磷酸二氢钾 柠檬酸钠 吐温80 碳酸钠 叠氮钠 红四氮唑(TTC) 琼脂 pH值7.00.215.05.05.015.01.02.00.40.115.025原理： 胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，磷酸二氢钾是缓冲剂。琼脂是培养基凝固剂。用法： 称取本品58.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,冷至5055时，倾入无菌平皿，备用。质量控制：胆

10、盐七叶苷琼脂Bile Esculin Agar用途：用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养 配方：（g/L）蛋白胨 牛胆盐 柠檬酸铁 七叶苷 琼脂 pH值7.10.28.0 20.0 0.5 1.0 15.0 25 原理： 蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；牛胆盐为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌；琼脂是培养基的凝固剂。 用法： 称取本品44.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在361培养22-24小时。质控菌株ATCC 生长情况黑色肠球菌（10-7）+大肠杆菌25922 （10-7）+-

11、金黄色葡萄球菌25923-/哥伦比亚血琼脂基础Columbia Blood Agar Base用途：营养非常丰富，用于各种细菌的基础培养基 配方：（g/L）酪蛋白胰酶消化物 心胰酶消化物 玉米淀粉 肉胃酶消化物 酵母浸出粉 氯化钠 琼脂 PH值 10.0g 3.0g 1.0g 5.0g 5.0g 5.0g 10.0g 7.30.2 原理：酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸；淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 称取本品39克，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装，121高压灭菌15分

12、钟，冷至45-50左右时，加入相当于20mg庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素，混匀，倾入无菌平皿。质量控制：在30-35培养18-24小时。质控菌株菌株编号生长情况其它特征金黄色葡萄球菌ATCC 25923良好 有黄色色素单增李斯特氏菌ATCC 19114良好 无色透明小菌落大肠埃希氏菌ATCC 25922良好 无色透明大菌落沙门氏菌ATCC 14028良好 无色大菌落铜绿假单胞菌CMCC 10104良好 有绿色色素LIM培养基LIM Medium用途：用于链球菌的分离培养（Japan方法） 配方：（g/L）牛肉粉 胰蛋白胨 葡萄糖 碳酸氢钠 氯化钠 磷酸氢二钠 pH值7.80.110.020.02

13、.02.02.0 0.425原理： 胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供碳源；氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢二钠作为缓冲剂。用法： 取本品36.4g,溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,待培养基冷至45-50时，加入多粘素E10mg和萘啶酮酸15mg,混匀质量控制：BETA-SSA琼脂BETA-SSA Agar用途：用于链球菌的选择性分离培养 配方：（g/L）蛋白胨 大豆蛋白胨 氯化钠 麦芽糖 琼脂 抑菌剂 pH值7.1-7.515.0 5.05.00.2513.0 0.026225原理： 蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；氯化钠可维持均衡的渗透

14、压；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 取本品38.3g,溶解于1000ml 蒸馏水中,115高压灭菌20分钟,冷至50左右时，无菌加入5-10%的脱纤维羊血，混匀，倾入无菌平皿。质量控制：粪肠球菌琼脂Enterococcus faecalis Agar用途：用于粪肠球菌的选择性分离 配方：（g/L）月示胨 麦芽糖 酵母浸粉 甘油磷酸钠 氯化钠 乳糖 溴甲酚紫 叠氮钠 TTC 琼脂 pH值7.20.210.0 20.0 10.0 10.0 5.0 1.0 0.015 0.4 0.1 13.0 25原理： 月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源；乳糖是大肠菌群可发酵的糖类；叠氮化钠可抑制革兰氏

15、阴性菌；溴甲酚紫和TTC作为指示剂；琼脂是培养基的凝固剂。用法： 取本品70.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸5分钟,冷至50左右，倾入无菌平皿，备用。质量控制：缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water用途：用于阪崎杆菌前增菌培养（GB2008标准） 配方：（g/L）蛋白胨 氯化钠 磷酸氢二钠(含12个结晶水) 磷酸二氢钾 pH值7.20.210.0 5.0 9.0 1.5 25 原理： 白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求；氯化钠可维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是缓冲剂用法： 称取本品20.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟备用。

16、质量控制：在361培养18-24小时。质控菌株菌株编号生长情况其它特征单增李斯特氏菌ATCC19114+浑浊沙门氏菌ATCC14028+浑浊胆汁液态培养基Bile broth用途：用于粪链球菌的胆汁耐受试验。 配方：（g/L）猪胆粉 脑心浸液肉汤 pH值7.40.120.023.125原理： 用法： 称取本品43.1g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在361培养18-24小时。M-肠道菌琼脂M-Enterococcus Agar用途：用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数（滤膜法或划线法） 配方：（g/L）胰酪蛋白胨 大豆蛋白胨 酵母浸粉

17、葡萄糖 磷酸氢二钾 叠氮化钠 TTC 琼脂 pH值7.20.215.05.05.02.04.00.40.110.025原理： 胰酪蛋白胨、大豆蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，葡萄糖提供碳源，磷酸盐是缓冲剂，琼脂是培养基凝固剂。用法：称取本品42g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,煮沸1分钟,冷至45-50左右时,倾入无菌平皿。无需高压灭菌。质量控制：THB培养基THB Medium用途：用于链球菌增菌培养 配方：（g/L）牛肉粉 胰蛋白胨 葡萄糖 碳酸氢钠 氯化钠 磷酸氢二钠 pH值7.80.110.020.02.02.02.00.425原理： 牛肉粉、胰蛋白胨提供氮源、维生素和矿物

18、质，葡萄糖提供碳源，氯化钠维持均衡的渗透压，磷酸盐是缓冲剂。用法： 称取本品36.4g,溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,待培养基冷至45-50时,加入多粘素E10mg和萘啶酮酸15mg,混匀。PS琼脂PS Agar用途：用于消化球菌的培养 配方：（g/L）蛋白胨 牛肉浸粉酵母浸粉 葡萄糖 半胱氨酸盐酸盐 氯化钙 硫酸镁 磷酸氢二钾 磷酸二氢钾 碳酸氢钠 氯化钠 吐温80琼脂10.03.03.02.00.50.0080.0080.040.040.40.081.013.0原理： 蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质，葡萄糖提供碳源，磷酸氢二钾和磷酸二氢钾是缓冲剂。

19、氯化钠维持均衡的渗透压，琼脂是培养基凝固剂。用法： 称取本品33.1g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121高压灭菌15分钟，备用。质量控制：肠球菌肉汤Enterococcus Broth用途：用于肠球菌增菌培养 配方：（g/L）胰蛋白胨 牛肉浸粉 酵母浸粉 牛胆粉 氯化钠 柠檬酸钠 七叶苷 柠檬酸铁铵 叠氮化钠 pH值7.10.217.0 3.0 5.0 10.0 5.0 1.0 1.0 0.5 0.25 25 原理： 胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；柠檬酸钠、牛

20、胆盐和叠氮化钠为选择性抑菌剂，抑制非链球菌的细菌。 用法： 称取本品42.8g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,121 高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在360.5培养24小时。菌 名 菌 号 生长状况 培养特征粪链球菌 CMCC(B)32223良好 棕黑色，具有棕色晕轮金黄色葡萄球菌ATCC6538被抑制 大肠埃希氏菌ATCC25922被抑制脑心浸液肉汤（BHI）Brain Heart Infusion Broth用途：用于细菌的增菌培养 配方：（g/L）蛋白胨 脱水小牛脑浸粉 脱水牛心浸粉 氯化钠 葡萄糖 磷酸氢二钠 pH值7.40.210.0 12.5 5.0 5.0 2.0 2

21、.5 25 原理： 蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。用法： 称取本品38.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：质控菌株接种后于350.5培养24h，结果如下：菌 名 菌 号 生长状况 培养特征粪性链球菌CMCC(B)32223 良好 肉汤混浊乙型溶血性链球菌CMCC(B)32210 良好 肉汤混浊大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 肉汤混浊脑心浸萃液肉汤Brain Heart Infusion Broth用途：用于营养苛求细菌的增菌培养 配方

22、：（g/L）月示蛋白胨 牛脑浸出粉 牛心浸出粉 氯化钠 葡萄糖 磷酸氢二钠 pH值7.40.2 10.0 10.0 9.0 5.0 2.0 2.5 25 原理： 月示蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂。用法： 称取本品38.5g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：在350.5培养24h，菌 名 菌 号 生长状况 培养特征粪性链球菌CMCC(B)32223 良好 肉汤混浊乙型溶血性链球菌CMCC(B)32210 良好 肉汤混浊大肠埃希氏菌 ATCC25922 良

23、好 肉汤混浊脑心浸液琼脂（BHIA）Brain Heart infusion Agar用途：用于营养苛求细菌的增菌培养 配方：（g/L）牛脑浸粉 牛心浸粉 蛋白胨 酪蛋白胨 氯化钠 葡萄糖 磷酸氢二钠 琼脂 pH值7.40.2 4.0 4.0 5.0 16.0 5.0 2.0 2.5 13.5 25 原理： 牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨、酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖可为多种细菌提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸氢二钠为缓冲剂，琼脂为凝固剂。用法： 称取本品52.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,121高压灭菌15分钟,备用。质量控制：控菌株接种后于350.5培养24h菌

24、 名 菌 号生长状况 粪性链球菌CMCC(B)32223 良好乙型溶血性链球菌CMCC(B)32210良好大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好Pfizer肠球菌选择性琼脂（PSE琼脂）Pfizer Enterococcus Selective Agar用途：用于粪链球菌的选择性分离和计数（SN标准） 配方：（g/L）蛋白胨 酵母浸粉 牛胆汁物 氯化钠 柠檬酸钠 柠檬酸铁铵 叠氮化钠 七叶苷 琼脂 pH值 20.0g 5.0g 10.0g 5.0g 1.0g 0.5g 0.25g 1.0g 15.0g 7.10.2 原理： 蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；细菌水解七叶苷与柠檬酸