植物提取物白芸豆提取物.docx

1、植物提取物白芸豆提取物C 25T中国医药保健品出入口商会集体标准 2018植物提取物白芸豆提取物Plant extractWhite Kidney BeanExtract2018-07-01 公布 2018-07-15 实行中国医药保健品出入口商会 公布 2018前 言本标准依照 GB/T 1.1 2009和 GB/T 20004.1 2016给出的规则草拟。本标准由中国医药保健品出入口商会提出。本标准由中华人民共和国商务部归口。本标准由中国医药保健品出入口商会国际商务标准化技术委员会负责解说。本标准负责草拟单位：云南天保桦生物质源开发有限企业。本标准主要草拟人：钟毓、薛佳、孙艳、迟永楠、李丽

2、波、何绍凯、张武松、任英。I 2018植物提取物 白芸豆提取物1范围本标准规定了白芸豆提取物的技术要求、查验方法、查验规则、包装、运输和储存要求。本标准合用于白芸豆的种子经粉碎、水提取、分别、干燥等工序获得的提取物。2规范性引用文件以下文件关于本文件的应用是必不行少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本合用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包含所有的改正单）合用于本文件。GB 4789.2 食品安全国家标准食品微生物学查验菌落总数测定GB 4789.4 食品安全国家标准食品微生物学查验沙门氏菌查验GB 4789.15 食品安全国家标准食品微生物学查验霉菌和酵母计数GB 4789.

3、3 食品安全国家标准食品微生物学查验大肠菌群计数GB 4789.10 食品安全国家标准食品微生物学查验金黄色葡萄球菌查验GB 4806.1 食品安全国家标准食品接触资料及制品通用安全要求食品安全国家标准食品中水分的测定食品安全国家标准食品中灰分的测定食品安全国家标准食品中蛋白质的测定GB 5009.11 食品安全国家标准 食品中总砷的测定GB 5009.12 食品安全国家标准 食品中铅的测定GB 5009.17 食品安全国家标准 食品中总汞的测定 食品中有机氯农药多组分残留量的测定GB 5749 生活饮用水卫生标准中华人民共和国药典（ 2015 版）第四部公则 2351 黄曲霉毒素测定法3技术

4、要求 工艺要求 植物原料本品以豆科植物菜豆属多花菜豆种 Phaseolus coccineus Linn. 白芸豆种子为原料。 工艺过程原料粉碎 水提取 分别干燥 产品1T/CCCMHPIE 1.26 2018产品要求感官要求应切合表 1 的要求。表 1感官要求项 目要 求组织形态细腻、平均的粉末色彩呈白色至淡黄色气味拥有白芸豆蛋白质特有气味，无异味杂质无正常视力可见外来异物理化要求应切合表 2 的规定 。表 2理化要求项 目指标鉴识加入茚三酮后显蓝紫色蛋白质含量 /%淀粉酶克制剂活性/（ U/g）1000植物凝聚素活性 /（ mg/mL ）水分 /%灰分 /%铅（以 Pb 计） /(mg/k

5、g)砷（以 As 计） /(mg/kg)汞（以 Hg 计)/(mg/kg)黄曲霉毒素 B 1/( g/kg)六六六（ HCB ） /(mg/kg)滴滴涕（ DDT ） /(mg/kg)微生物要求应切合表 3 的规定。2 2018表 3 微生物要求项 目 指 标菌落总数 /(CFU/g) 1000大肠菌群 /(MPN/g) 霉菌和酵母 /(CFU/g) 50沙门氏菌 不得检出金黄色葡萄球菌 不得检出 其余污染物其余污染物限量要求，依照不一样要求，应切合我国有关法例的规定。关于出口产品，应切合出口目的国有关法例的规定。4查验方法 感官查验启开试样后，立刻嗅其气味；另取试样适当置于白色瓷盘中，在自然

6、光芒下，察看其色彩、外观，并检查有无异物。 理化指标 鉴识称取白芸豆提取物 ，加水 10mL 让其充足溶解，离心取上清液，取 1mL 上清液加入至试管中，并在试管中加入 3mg 茚三酮，摇匀，并加热煮沸 3min ，溶液显蓝紫色 。 淀粉酶克制剂活性按第 A 章中规定的方法进行测定。 蛋白质按 GB 5009.5 中规定的方法进行测定。 植物凝聚素活性3 2018按第 B 章中规定的方法进行测定。 水分按 GB 5009.3 中规定的方法进行测定。 灰分按 GB 5009.4 中规定的方法进行测定。 砷依照 GB 5009.11 中规定的方法进行测定。 铅依照 GB 5009.12 中规定的方

7、法进行测定。 汞依照 GB 5009.17 中规定的方法进行测定。 黄曲霉毒素 B1按中华人民共和国药典（ 2015 版）第四部公则 2351 黄曲霉毒素 B1 测定法进行测定。 六六六依照 GB 5009.19 中规定的方法进行测定。 滴滴涕依照 GB 5009.19 中规定的方法进行测定。 微生物指标 菌落总数按 GB 4789.2 中规定的方法进行查验。 霉菌及酵母菌数按 GB 4789.15 中规定的方法进行查验。4 2018 大肠菌群按 GB 4789.3 中规定的方法进行查验。 沙门氏菌按 GB 4789.4 中规定的方法进行查验。 金黄色葡萄球菌按 GB 4789.10 中规定的

8、方法进行查验。5查验规则 组批同品种，同样级，以同一批投料、同一工艺生产的同一世产日期且包装完满的产品为一批。出厂查验产品须逐批查验，查验合格并签发合格证后产品方可出厂。出厂查验项目：外观、水分、灰分、蛋白质、淀粉酶克制剂活性、菌落总数、大肠菌群。型式查验型式查验项目包含本标准中规定的所有项目。正常生产时每年应进行一次型式查验。有以下状况之一时须进行型式查验。a）原料根源改动较大时；b)正式投产后，如配方、生产工艺有较大变化，可能影响产质量量时；c)出厂查验与前一次型式查验结果有较大差别时；d)产品停产 6 个月以上 ,恢复生产时；e)食品安全监察部门提出进行型式查验的要求时。 判断规则 查验

9、结果所有项目切合本标准规准时，判该批产品为合格品。因酶自己的特征决定了酶活性拥有可调理性，致使淀粉酶克制活性会跟着测准时间、环境、温度拥有必定的随机性和可调性，故对淀粉酶克制剂的活性要求是只限制了最低限，每次测定淀粉酶克制剂活性不得低于 1000U/g 即切合规定。5 2018 查验结果不切合本标准要求时，能够在原批次产品中双倍抽样复检一次，判断以复检结果为准。复检后仍有一项或一项以上不切合标准时，判该批产品为不合格品。6包装、标签、运输、储存 包装包装资料应切合 GB 4806.1 食品安全国家标准食品接触资料及制品通用安全要求。 标签应切合 GB 7718 、GB 28050 的规定。包装

10、标签上应注明：产品名称、批号、规格、净含量、执行标准、生产单位名称、厂址、产地、生产日期、保质期、储存条件、营养成分表。 运输运输时一定轻装轻卸，不得与有毒、有害、有异味、易污染物件混装载运，严防挤压、雨淋、暴晒。 储存产品应储存于阴凉、干燥的库房中。防止与有毒、有害、易腐、易污染等物件一同堆放。 保质期在切合规定的贮运条件、包装完好、未经开启封口的状况下，保质期为 24 个月。6 2018附录A（资料性附录）淀粉酶克制剂活性查验方法 合用范围本方法拟测定白芸豆提取物中淀粉酶克制剂活性。 原理淀-粉酶克制剂经过与哺乳动物 淀-粉酶形成可溶性的复合体，改变哺乳动物分泌的 淀-粉酶的构象，从而致使

11、 淀-粉酶丧失分解淀粉的能力。利用淀粉溶液在碘 -碘化钾作用下显蓝色，在必定浓度范围内， 660nm 处的吸光值和淀粉的量呈线性关系的特色，再依据加入 淀-粉酶克制剂前后 -淀粉酶分解淀粉量的差值，即可计算出淀粉酶克制剂的活性。 术语和定义以下术语和定义合用于本标准。A.3.1 淀-粉酶 alpha-amylase能水解淀粉分子链中 -1,4葡-萄糖苷键， 将淀粉链切断成麦芽糖和葡萄糖， 使淀粉不与碘液发生显色反响的酶制剂。 淀-粉酶克制剂特异糖蛋白构造能与 淀-粉酶分子上的糖苷剪切位点结归并惹起 淀-粉酶分子构象改变，使其失掉与淀粉糖苷联合的能力从而致使催化活性丧失的化合物为 淀-粉酶克制剂

12、。 淀粉酶克制剂活性1g 白芸豆提取物， 于 37、pH=6.0 条件下，1min 内克制 淀-粉酶将淀粉链切断成 1 微摩尔（ mol）7 2018麦芽糖的量，即为淀粉酶克制剂活性，以 U/g 表示。 试剂配制 可溶性淀粉溶液（ 2mg/mL ）：称取（精准至）可溶性淀粉（以绝干计）于烧杯中，用少许水调成浆状物，边搅拌边慢慢加入 70mL 开水中，而后用水分次冲刷装淀粉的烧杯，洗液倒入此中，搅拌加热至完好透明，待冷却后定容至 100mL 。溶液现配现用。 磷酸缓冲液（ pH=6.0 ）：称取磷酸氢二钠（ Na2HPO4?12H2O）和柠檬酸（C6H8O7?H2O），用水溶解并定容至1000m

13、L 。 pH计校订后使用。A.4.3 碘液：称取碘和碘化钾，用少许水使碘完好溶解，定容至500mL ，储存于棕色瓶中备用，汲取上述溶液 2.00mL ，加入碘化钾，加水溶解并定容至500mL ，储存于棕色瓶中。 仪器与设施分光光度计。电子剖析天平。标准磨口带塞容量瓶：100mL 、500mL 。A.5.4 恒温水浴锅：控温精度 。试管： 25mm200mm 。标准移液管（ 2mL 、 10mL）、微量移液枪。秒表。pH 计：分度值。离心计和离心管。超声波冲洗仪。 淀粉标准曲线的成立淀粉标准曲线的成立：按下表在各试管中挨次加入试液，混匀。各取 1mL 分别加入 10mL 稀碘8 2018液中，混

14、匀，在 660nm 下测定吸光度；同时以 0 号管作空白，以所取淀粉的质量（ g）与相对应的吸光度进行回归剖析，计算线性回归方程。A.1 淀粉标准曲线溶液配制0 号管1 号管2 号管3 号管4 号管5 号管6 号管7 号管淀粉溶液（ mL ）01234567蒸馏水（ mL ）76543210盐酸溶液（ mL）55555555磷酸缓冲液（ mL） 测定液的配制 供试品溶液的制备： 精细称取白芸豆提取物 于容量瓶中， 加水充足溶解， 定容至 100mL ，搁置 30min ，取上清液作为供试品溶液。 猪胰淀粉酶标准液的制备：精细称取标准猪胰淀粉酶加蒸馏水制成 的溶液，摇匀备用。猪胰淀粉酶液（ 淀-

15、粉酶液）与白芸豆提取物联合溶液的制备：精细量取A.7.1 和 A.7.2 各 5mL ，于 37 0.2水浴中预热 8min，临用前精细控制时间加入。白芸豆提取物淀粉酶克制剂活性测定白芸豆提取物淀粉酶克制剂活性测定：按下表挨次汲取各溶液加入各试管中，混匀，将样品管在 37水浴中正确反响5min ，加入稀盐酸停止反响。 取上述溶液各1mL ，加入 10mL稀碘液中，摇匀，并以0 号管作空白，在660nm 波长下，测定吸光度（A ），并记录数据。A.2 白芸豆提取物淀粉酶克制剂活性测准时各溶液加入量表（单位：mL）加入物空白管比较空白酶比较样品磷酸缓冲液（ pH=6.0 ）（ mL ）水（ mL

16、）7210淀粉溶液（ mL ）0555猪胰淀粉酶（ mL ）0010猪胰淀粉酶与供试品联合液（ mL ）00029 2018 结果表述白芸豆提取物淀粉酶克制剂活性以U/g 表示，按公式（）计算。U / gM1-M 2FA2A11000106M取样量 TM 取样量T.（）式中：M 1 加克制剂试管中节余淀粉量（ g）；M 2 不加克制试管中节余淀粉量（ g）；U 白芸豆提取物淀粉酶克制剂活性（ U/g ）；M 取样量 白芸豆提取物的取样量（ g）；B 淀粉标准曲线回归方程中的斜率；A 1 淀粉酶比较品的吸光度；A 2 白芸豆提取物的吸光度； 麦芽糖的摩尔质量（ g/mol ）；T 反响时间（ m

17、in ）；F 样品的转变系数， 1000；106 摩尔与微摩尔的单位转变系数。本品按干燥品计算，其淀粉酶克制活性不得低于 1000U/g 。10 2018附录 B（资料性附录）植物凝聚素活性测定 一般原理植物凝聚素是白芸豆原猜中含有的一种为抵挡虫害而存在的一种天然产物，人体过多地食用会产生必定的凝血作用，故植物凝聚素在白芸豆提取物中将作为杂质进行检查。植物凝聚素活性测定方法依据植物凝聚素的通用测定方法进行测定，用产生凝聚活性的样品浓度表示凝聚素活性。产生凝聚活性的浓度越低表示样品凝聚活性越强，反之，产生凝聚活性的浓度越高表示样品凝聚活性越弱。植物凝聚素活性：用产生凝聚活性的样品浓度表示凝聚素活

18、性的大小，单位为 mg/mL 。仪器和设施96 孔板塑料板9 孔玻璃板B.2.3 微量移液枪： 20-200 L试剂和资料植物凝聚素比较品新鲜或醛化的人、兔或小鼠血液，经惯例抗凝办理磷酸二氢钾：剖析纯磷酸氢二钠：剖析纯氯化钠：剖析纯氯化钾：剖析纯生理盐水溶液的配制PBS试剂的配制精细称取 0.2g 磷酸二氢钾（ KH 2PO4）， 磷酸氢二钠（ Na2HPO 4）， 8g 氯化钠（ NaCl ），0.2g 氯化钾（ KCl ）加水 200mL 溶解，并稀释定容至 1000mL 备用。 血球细胞溶液红细胞悬液（新鲜或醛化的人、兔或小鼠血液，经惯例抗凝办理后保留在 PBS 溶液中）使用前加入 PB

19、S 溶液混匀， 3000 转 /min 离心 5min ，弃上清液，同法频频 45 次。将最后一次离心后所得细胞液用生理盐水稀释至浓度为 3%4%。 样品溶液11 2018精细称取白芸豆提取物粉末 ，加 PBS 10mL 混匀 3min ，离心 10min （ 5000 转 /min ）。取上清液 1mL 加入 PBS 试剂稀释至 10mL 备用。 比较溶液取植物凝聚素比较品，配制成浓度为 1mg/mL 的溶液，放冰箱备用。 检查 样品溶液稀释取样品溶液 100L，加入 96 孔板第一孔板中，在第一孔板中加入 100LPBS溶液，频频吹打混匀后，拿出 100L稀释溶液至第二孔板中，再加入 10

20、0LPBS溶液，频频吹打后取 100L混淆溶液至第三孔板中，依此操作，倍比稀释，至第 7 孔板为止。 样品溶液与植物凝聚素联合另取 9 孔玻璃板， 将 96 孔板中第一孔中溶液取 50L加至 9 孔板的第一孔， 96 孔板中第二孔溶液取 50L至玻璃板的第二孔，依此操作。加至第 7 孔板。在 9 孔玻璃板中的第 8 孔板中加入 50L的植物凝聚素比较溶液， 第 9 孔板中加入 50LPBS溶液作为空白比较。 而后在 9 孔玻璃板每孔中加入配置好的血球细胞溶液 50L，混匀静置。静置 1h2h 后，察看各孔凝聚状况。B.5.3 样品与植物凝聚素联合时各孔样品浓度见下表 表 B.1 各孔中样品的稀释度及样品浓度1234567PHAPBS板号比较比较稀释度1/41/81/161/321/641/1281/256-浓度10mg/mL 限度要求凝聚素的活性不得低于 ， 9 孔板第三孔以后不得出现凝聚现象。12 20181）非商业性申明：上述所采纳的设施、色谱柱、标准比较品等，波及详细商业品牌、型号的，仅供参照，无商业目的，鼓舞标准使用者试试使用不一样品牌、型号的设施、色谱柱及标准品。13