新项目方法验证能力确认报告新版HJ168重制版水质 总磷的测定GB 118931989.docx

1、新项目方法验证能力确认报告新版HJ168重制版水质 总磷的测定GB 118931989XXXX有限公司新项目方法验证能力确认报告项目名称：水质 总磷的测定 钼酸铵分光光度法GB 11893-1989项目负责人：项目审核人：项目批准人：批准日期： 年 月 日实验室参加验证相关信息表1参加验证的人员情况登记表姓名性别年龄职务或职称所学专业从事相关分析工作年限表2使用仪器情况登记表仪器名称型号规格仪器出厂编号性能状况（计量/校准状态、量程、灵敏度等）备注表3使用试剂及溶剂登记表名称生产厂家规格纯化处理方法备注水质 氨氮的测定 纳氏试剂分光光度法GB 11893-1989方法验证能力确认报告1. 方法

2、依据及适用范围本方法依据水质 总磷的测定 钼酸铵分光光度法（GB 11893-1989）。本方法适用于地表水、生活污水和工业废水中总磷的测定，应随后续标准版本更新而更新。当试样体积为 25 ml，使用 30 mm 比色皿时，本方法的检出限为 0.01 mg/L，测定上限为 0.6 mg/L。2.方法原理及干扰2.1方法原理在中性条件下用过硫酸钾（或硝酸-高氯酸）使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。2.2干扰在酸性条件下，砷、铬、硫会干扰测定。砷大于2mg/L干扰测定，可用硫代硫酸钠去除；

3、硫化物大于2mg/L干扰测定，可通氮气去除；铬大于50mg/L干扰测定，可用亚硫酸钠去除。3. 主要仪器、设备及试剂3.1试剂和材料除非另有说明，分析时所用试剂均使用符合国家标准的分析纯化学试剂，实验用水为蒸馏水或同等纯度的水3.1.1硫酸（H2SO4），(H2SO4)=1.84 g/mL。3.1.2硝酸（HNO3），(HNO3)=1.4 g/mL。3.1.3高氯酸（HClO4），优级纯，(HClO4)=1.68 g/mL。3.1.4氢氧化钠（NaOH）。3.1.5过硫酸钾（K2S2O8）。3.1.6抗坏血酸（C6H8O6）。3.1.7钼酸铵(NH4)8Mo7O244H2O。3.1.8酒石酸锑

4、钾KSbC4H4O71/2H2O。3.1.9磷酸二氢钾（KH2PO4）。3.1.10酚酞。3.1.11乙醇，95%。3.1.12硫酸溶液：1+1。3.1.13硫酸溶液：c(1/2 H2SO4)=1 mol/L。将27 ml硫酸缓慢加入到973 ml水中。3.1.14氢氧化钠溶液，c(NaOH)=1 mol/L。称取 40 g 氢氧化钠溶于水中，并稀释至 1000 ml。3.1.15氢氧化钠溶液，c(NaOH)=6 mol/L。称取 240 g 氢氧化钠溶于水中，并稀释至 1000 ml。3.1.16过硫酸钾溶液，=50 g/L。称取 5 g 过硫酸钾溶于水中，稀释至 100 ml。3.1.17

5、抗坏血酸溶液，=100 g/L。称取 10 g 抗坏血酸溶于水中，稀释至 100 ml。贮存于棕色的试剂瓶中，于冰箱中保存，可稳定几周，如不变色可长时间使用。3.1.18钼酸盐溶液。称取13g钼酸铵于100ml水中。再称取0.35g酒石酸锑钾溶于100ml水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300ml 1+1硫酸溶液中，再加酒石酸锑钾溶液，混合均匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中，在冰箱内可保存两个月。3.1.19浊度-色度补偿液混合两个体积的1+1硫酸溶液和一个体积的抗坏血酸溶液。临用现配。3.1.20磷标准贮备溶液，=50.0 g/mL。称取 0.21970.001 g 磷酸二氢钾，用水溶解后

6、转移至1000 ml 容量瓶中，加入大约800 ml 水、加5ml 1+1硫酸溶液，再用水稀释至标线并混匀。此溶液贮存于玻璃瓶中，可至少保存六个月。3.1.21磷标准使用溶液，=2.0 g/mL。将10.0ml的磷标准贮备溶液转移至250ml容量瓶中，用水稀释至标线并混匀。临用现配。3.1.22酚酞溶液=10 g/L。称取 0.5g酚酞溶于50ml 95%乙醇中。3.2仪器和设备3.2.1 XX型分光光度计：具 30 mm 比色皿，1台，型号：XXXXXX，编号：XXXXXXXX，检定证书编号：XXXXXXXX，检定有效日期：XXXX年XX月XX日。3.2.2一般压力锅：1.1到1.4kg/c

7、m2。注：亦可使用医用手提式消毒器。3.2.3具塞（磨口）刻度管，50mL。3.2.4一般实验室常用器皿和设备。注：所有玻璃器皿均应用稀盐酸或稀硝酸浸泡。4.样品4.1样品采集和保存水样采集在玻璃瓶内，采取500ml水样后加入1ml硫酸调节pH1，或不加任何试剂于冷处保存。注：含磷量较少的水样，不要用塑料瓶采样，因磷酸盐易吸附在塑料瓶壁上。4.2试样的制备取25ml样品于具塞刻度管中，量取前应先仔细摇匀，以得到溶解部分和悬浮部分均具有代表性的试样。如样品中含磷量较高，试样体积可以减少。5. 分析步骤5.1工作曲线的绘制取7支具塞刻度管，分别加入 0.00、0.50、1.00、3.00、5.00

8、、 10.00和 15.00 ml 磷酸盐标准使用溶液，加水至25ml，其所对应的磷含量分别为 0.0、1.0、2.0、6.0、10.0、20.0 和 30.0 g。按照5.2的步骤进行处理，以水做参比，测定吸光度，扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量（g）绘制工作曲线。5.2样品测定5.2.1消解5.2.1.1过硫酸钾消解向试样中加4ml过硫酸钾溶液，将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线将玻璃塞扎紧，放在大烧杯中置于高压压力锅中加热，待压力达到1.1 kg/cm2，相应温度为120时，保持30分钟后停止加热。待压力表读数降至零后，取出放冷。然后用水稀释至标线。注：如用硫酸保存水样。当用

9、过硫酸钾消解时，需先将试样调至中性。5.2.1.2硝酸-高氯酸消解取25ml试样于锥形瓶中，加数粒玻璃珠，加2ml硝酸，在电热板上加热浓缩至10ml。冷却后加5ml硝酸，再加热浓缩至10ml，放冷。加3ml高氯酸，加热至高氯酸冒白烟，此时可在锥形瓶上加小漏斗或调解电加热板温度，使消解液在锥形瓶内壁保持回流状态，直至剩下3到4ml，放冷。加水10ml，加1第酚酞指示剂，滴加氢氧化钠溶液至刚呈微红色，再滴加 1mol/L硫酸溶液使微红色刚好褪去，充分混匀。移至具塞刻度管中，用水稀释至标线。注：1用硝酸-高氯酸消解需要在通风橱中进行。高氯酸和有机物的混合经加热已发生危险，需将试样先用硝酸消解，然后再

10、加入硝酸-高氯酸进行消解。2绝不可把消解的试样蒸干。3如消解后有残渣时，用滤纸过滤于具塞刻度管中，并用水充分清洗锥形瓶及滤纸，一并转移到具塞刻度管中。4水样中的有机物用过硫酸钾氧化不能完全破坏时，可用此法消解。5.2.2显色分别向各份消解液中加入1ml抗坏血酸溶液后混匀，30秒后加2ml钼酸盐溶液充分混匀。注：如试样中含有浊度或色度时，需配制一个空白试样（消解后用水稀释至标线），然后向试剂中加入3ml浊度-色度补偿液，但不加抗坏血酸溶液和钼酸盐溶液，然后从试料的吸光度中扣除空白试料的吸光度。5.2.3测量室温下放置15分钟后，使用光程为30mm比色皿，在700nm波长下，以水做参比，测定吸光度

11、，扣除空白试验的吸光度后，从工作曲线上查得磷的含量。如显色时室温低于13，可在20到30水浴上显色15分钟即可。5.3空白试验用水代替水样，按与样品相同的步骤进行前处理和测定。6. 结果计算与表示6.1结果计算试样总磷含量的质量浓度按下式计算： 式中：c试样总磷的质量浓度，mg/L；m试样测得含磷量，g；V测定用试样体积，ml；6.2结果表示当测定结果小于1.00 mg/L时，保留小数点后2位数字；当测定结果大于等于1.00 mg/L时，保留3位有效数字。注：标准未明确结果表示。根据HJ168-2020要求，结果与检出限小数位数保持一致，但一般不超过3位有效数字。7.方法能力验证7.1过硫酸钾

12、消解法7.1.1工作曲线按照5.1和5.2的操作步骤，以水做参比，测定吸光度，扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量（g）绘制工作曲线。曲线信息如表1所示：表1校准曲线标准曲线1234567磷标准使用溶液体积（ml）0.000.501.003.005.0010.0015.00氨氮含量（g）0.01.02.06.010.020.030.0吸光度值A（A-A0）由表1可知，实验室校准曲线Y= aX + b ，r = 0.999，满足本方法要求。图1 校准曲线7.1.2检出限和测定下限按照样品分析的全部步骤，实验室重复测定7个空白试样。在仪器最佳稳定状态下测定空白值，统计其标准偏差并计算其检出限，

13、检出限=t(n-1,0.99)S（其中t(n-1,0.99)=3.143），结果如表2所示：表2 方法检出限测定数据空白试样1234567样品浓度（mg/L）平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）检出限MDL（mg/L）由表2可知，当试样体积为 25 ml，使用 30 mm 比色皿时，实验室检出限为0.00x mg/L（测定下限为4倍检出限），大于仪器检出限0.00x mg/L，所以检出限为实验室检出限计算值，该值小于方法检出限0.01 mg/L（测定下限0.04 mg/L），符合标准方法要求。注：方法检出限测定次数最少7次，可以适当增加测定次数，t值取值见HJ 168-2020。7.1.3

14、准确度7.1.3.1精密度实验室分别对磷浓度为0.04 mg/L、0.30 mg/L和0.54 mg/L的水质标准样品进行了 6 次重复测定，结果如表3所示：表3 方法精密度测定数据（标准物质）标准物质测定结果标准值（mg/L）0.040.300.54测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）相对标准偏差RSD（%）注：精密度验证根据HJ168-2020选择验证标准物质浓度。由表3可知，本实验室的6次测试结果所得的相对标准偏差为x.x%至x.x%，精密度符合标准方法要求。实验室分别对氨氮浓度为0.20 mg/L的地表水实际样品，0.50 mg/L的生活污水实际样品

15、和1.00 mg/L工业废水实际样品进行了 6 次重复测定，结果如表4所示：表4 方法精密度测定数据（实际样品）实际样品测定结果样品类型地表水生活污水工业废水实际值（mg/L）0.200.501.00测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）相对标准偏差RSD（%）注：实际样品精密度验证应选择对适用范围内每个样品类型的13 个浓度或含量（应尽可能包含适用的生态环境质量标准、生态环境风险管控标准、污染物排放标准限值的浓度或含量）的样品。由表4可知，本实验室6次测试结果所得的相对标准偏差为x.x%至x.x%，精密度符合标准方法要求。7.1.3.2正确度实验室分别对磷浓

16、度为0.04 mg/L、0.30 mg/L和0.54 mg/L的水质标准样品进行了 6 次重复测定，结果如表5所示：表5 方法正确度测定数据（标准物质）标准物质测定结果标准值（mg/L）0.040.300.54测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）相对误差RE（%）注：正确度验证根据HJ168-2020选择验证标准物质浓度。由表5可知，本实验室的6次测试结果所得的相对误差为x.x%至x.x%，正确度符合标准方法要求。实验室分别对氨氮浓度为0.20 mg/L的地表水实际样品，0.50 mg/L的生活污水实际样品和1.00 mg/L工业废水实际样品进行加标回收率测定，进行6 次重复测定

17、，结果如表6所示：表6 方法正确度测定数据（实际样品）实际样品测定结果样品类型地表水生活污水工业废水实际值（mg/L）0.200.501.00加标浓度（mg/L）/0.20/0.50/1.00测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）加标回收率（%）注：实际样品正确度验证应选择对适用范围内每个样品类型的13 个浓度或含量（应尽可能包含适用的生态环境质量标准、生态环境风险管控标准、污染物排放标准限值的浓度或含量）的样品进行加标回收率测定。加标浓度一般为0.33倍样品浓度，具体见HJ 168-2020。由表6可知，本实验室的6次测试结果所得的加标回收率为x.x%x.x%，正确度符合标准方法

18、要求。7.2硝酸-高氯酸消解法7.2.1校准曲线按照5.1和5.2的操作步骤，以水做参比，测定吸光度，扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量（g）绘制工作曲线。曲线信息如表7所示：表7校准曲线标准曲线1234567磷标准使用溶液体积（ml）0.000.501.003.005.0010.0015.00氨氮含量（g）0.01.02.06.010.020.030.0吸光度值A（A-A0）由表1可知，实验室校准曲线Y= aX + b ，r = 0.999，满足本方法要求。图2 校准曲线7.2.2检出限和测定下限按照样品分析的全部步骤，实验室重复测定7个空白试样。在仪器最佳稳定状态下测定空白值，统计其

19、标准偏差并计算其检出限，检出限=t(n-1,0.99)S（其中t(n-1,0.99)=3.143），结果如表8所示：表8 方法检出限测定数据空白试样1234567样品浓度（mg/L）平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）检出限MDL（mg/L）由表8可知，当试样体积为 25 ml，使用 30 mm 比色皿时，实验室检出限为0.00x mg/L（测定下限为4倍检出限），大于仪器检出限0.00x mg/L，所以检出限为实验室检出限计算值，该值小于方法检出限0.01 mg/L（测定下限0.04 mg/L），符合标准方法要求。注：方法检出限测定次数最少7次，可以适当增加测定次数，t值取值见HJ 16

20、8-2020。7.2.3准确度7.2.3.1精密度实验室分别对磷浓度为0.04 mg/L、0.30 mg/L和0.54 mg/L的水质标准样品进行了 6 次重复测定，结果如表9所示：表9 方法精密度测定数据（标准物质）标准物质测定结果标准值（mg/L）0.040.300.54测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）相对标准偏差RSD（%）注：精密度验证根据HJ168-2020选择验证标准物质浓度。由表9可知，本实验室的6次测试结果所得的相对标准偏差为x.x%至x.x%，精密度符合标准方法要求。实验室分别对氨氮浓度为0.20 mg/L的地表水实际样品，0.50 m

21、g/L的生活污水实际样品和1.00 mg/L工业废水实际样品进行了 6 次重复测定，结果如表10所示：表10 方法精密度测定数据（实际样品）实际样品测定结果样品类型地表水生活污水工业废水实际值（mg/L）0.200.501.00测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）标准偏差S（mg/L）相对标准偏差RSD（%）注：实际样品精密度验证应选择对适用范围内每个样品类型的13 个浓度或含量（应尽可能包含适用的生态环境质量标准、生态环境风险管控标准、污染物排放标准限值的浓度或含量）的样品。由表4可知，本实验室6次测试结果所得的相对标准偏差为x.x%至x.x%，精密度符合标准方法要求。7.2.

22、3.2正确度实验室分别对磷浓度为0.04 mg/L、0.30 mg/L和0.54 mg/L的水质标准样品进行了 6 次重复测定，结果如表11所示：表11 方法正确度测定数据（标准物质）标准物质测定结果标准值（mg/L）0.040.300.54测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）相对误差RE（%）注：正确度验证根据HJ168-2020选择验证标准物质浓度。由表11可知，本实验室的6次测试结果所得的相对误差为x.x%至x.x%，正确度符合标准方法要求。实验室分别对氨氮浓度为0.20 mg/L的地表水实际样品，0.50 mg/L的生活污水实际样品和1.00 mg/L工业废水实际样品进行

23、加标回收率测定，进行6 次重复测定，结果如表12所示：表12 方法正确度测定数据（实际样品）实际样品测定结果样品类型地表水生活污水工业废水实际值（mg/L）0.200.501.00加标浓度（mg/L）/0.20/0.50/1.00测定结果（mg/L）123456平均值（mg/L）加标回收率（%）注：实际样品正确度验证应选择对适用范围内每个样品类型的13 个浓度或含量（应尽可能包含适用的生态环境质量标准、生态环境风险管控标准、污染物排放标准限值的浓度或含量）的样品进行加标回收率测定。加标浓度一般为0.33倍样品浓度，具体见HJ 168-2020。由表12可知，本实验室的6次测试结果所得的加标回收

24、率为x.x%x.x%，正确度符合标准方法要求。8. 监测实例本单位实验室两组人员分别对某河道地表水、某食品厂工业废水、员工生活污水进行采样，监测水中总磷，同时进行加标回收测定（加标浓度接近样品浓度），测定结果见表13至18所示：表13监测实际样品测定数据（地表水过硫酸钾消解法）实际样品测定结果人员1人员2试剂空白加标浓度（mg/L）/合格 不合格测定结果（mg/L）加标回收率（%）人员相对误差（%）注：试剂空白不超过方法检出限。由表13可知，本实验室两组人员测定结果相对误差为x.x%，符合实验室人员比对分析质量控制要求。加标回收率分别为x.x%和x.x%，符合标准要求。表14监测实际样品测定数

25、据（地表水硝酸-高氯酸消解法）实际样品测定结果人员1人员2试剂空白加标浓度（mg/L）/合格 不合格测定结果（mg/L）加标回收率（%）人员相对误差（%）注：试剂空白不超过方法检出限。由表14可知，本实验室两组人员测定结果相对误差为x.x%，符合实验室人员比对分析质量控制要求。加标回收率分别为x.x%和x.x%，符合标准要求。表15监测实际样品测定数据（生活污水过硫酸钾消解法）实际样品测定结果人员1人员2试剂空白加标浓度（mg/L）/合格 不合格测定结果（mg/L）加标回收率（%）人员相对误差（%）注：试剂空白不超过方法检出限。由表15可知，本实验室两组人员测定结果相对误差为x.x%，符合实验室人员比对分析质量控制要求。加标回收率分别为x.x%和x.x%，符合标准要求。表16监测实际样品测定数据（生活污水硝酸-高氯酸消解法）实际样品测定结果人员1人员2试剂空白加标浓度（mg/L）/合格 不合格测定结果（mg/L）加标回收率（%）人员相对误差（%）注：试剂空白不超过方法检出限。由表16可知，本实验室两组人员测定结果相对误差为x.x%，符合实验室人员比对分析质量控制要求。加标回收率分别为x.x%和x.x%，符合标准要求。表17监测实际样品测定数据（工业废水过硫酸钾消解法）实际样品测定结果人员1人员2试剂空白加标浓度（mg/L）/合格 不合格测定结果（mg/L）加标回收率（%）