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1、推荐下载关于板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究键入文字关于板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。关于板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究作者：张体祥，刘捷，张萍，马丽，卢奎【摘要】 目的研究板蓝根水溶性多糖的提取纯化工艺条件。方法通过正交实验，考察液料比、提取时间、提取温度、醇沉时间、醇液比对多糖得率的影响。结果液料比是影响提取工艺的主要因素，最佳工艺条件为：液料比 301，提取温度 90，提取时间 6 h。三氯乙酸法脱蛋白，葡聚糖凝胶柱层

2、析纯化分离。结论板蓝根多糖得率25.63%，多糖含量 76.42%。纯化后的板蓝根多糖为分子大小均一的单一组分多糖，不含核酸和蛋白质。1键入文字【关键词】 板蓝根多糖 正交试验 提取 纯化 分离板蓝根为中国传统中药，有清热解毒、凉血利咽的功能。用于瘟毒发斑、舌绛紫暗、痄腮、喉痹、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒、痈肿等症1。板蓝根多糖是板蓝根的主要化学成分之一。研究发现, 板蓝根多糖具有免疫调节作用, 对特异性免疫和非特异性免疫均有一定的促进作用2，3, 此外还有降血脂作用。 随着人们对多糖生物活性和特殊药用功能认识的进一步加深，意识到板蓝根多糖可能是板蓝根生物活性和特殊药用功能的主要作用因子之一。目

3、前, 板蓝根多糖的提取大多采用水煮醇沉法4，5, 提取的粗多糖溶液为胶体溶液,性质差别很大, 提取得率和多糖含量并不理想，这为多糖的的进一步开发造成了困难。为了提高多糖的活性, 本实验以北板蓝根为原料, 采用正交实验对板蓝根的提取工艺进行优化, 对提取的粗多糖脱蛋白, 通过 Sehadex G-100 凝胶色谱柱进一步分离纯化, 以期为板蓝根多糖的开发利用提供理论基础。1 材料板蓝根，购自郑州仟僖堂药店。2键入文字2 方法2.1 板蓝根多糖的提取纯化工艺路线6，7其流程如下所示：提取：板蓝根 粉碎 称量 乙醚脱脂 热水浸提 离心取上清液 残渣重复浸提两次 合并上清液 减压浓缩 透析 测含糖量

4、乙醇沉淀 有机溶剂洗涤 真空干燥 板蓝根粗多糖纯化：粗多糖溶液 Sehadex G-100 柱层析 洗脱液浓缩 乙醇沉淀 冷冻干燥 精制板蓝根多糖2.2 正交实验优化板蓝根多糖的提取工艺选择液料比、提取温度和提取时间 3 个因素，以多糖得率为考察指标进行 3 因素 3 水平的正交实验，对板蓝根多糖的提取工艺条件进行优化。2.3 多糖含量的测定8苯酚-硫酸法，以葡萄糖为基准物作标准曲线。根据标准曲线计算多糖含量。板蓝根多糖得率的计算公式:3键入文字粗多糖得率(%)=多糖质量板蓝根粉末的质量 100%2.4 脱蛋白方法称取一定量板蓝根粗多糖，加入蒸馏水溶胀 2 h，在 100下煮沸 1.5h，离心

5、，浓缩。本实验采用了 4 种去蛋白方法：Sevage 法：在粗多糖浓缩液中加入等体积的一定浓度的氯仿-正丁醇溶液，混合振摇，离心除去沉淀，经透析、醇沉、洗涤、干燥，即得脱蛋白多糖。三氯乙酸法：在粗多糖浓缩液中滴加一定量的三氯乙酸，剧烈搅拌 2030 min，离心除去沉淀，经透析、醇沉、洗涤、干燥，即得脱蛋白多糖。HCl 法：用 HCl 调节粗多糖浓缩液至 pH=3，1020静置过夜，离心除去沉淀液，再透析醇沉、洗涤、干燥，即得脱蛋白多糖。正丁醇-三氯乙酸法：在粗多糖浓缩液中加入等体积的三氯乙酸-正丁醇试剂，振摇10 min，于分液漏斗中静置分层，收集下层的水溶液，经透析醇沉、洗涤、干燥，即得脱

6、蛋白多糖。4键入文字2.5 板蓝根多糖的纯化将一定量的脱蛋白多糖，用蒸馏水溶解后上样，0.15 mol L-1NaCl 进行洗脱，流速控制在 0.3 ml min-1，洗脱液由分布收集器进行收集，苯酚-硫酸法跟踪检测，分别合并出峰的流出液，减压浓缩至一定体积，醇沉、过滤、干燥，即得精制多糖。2.6 纯度鉴定将 Sephadex G-100 装柱，用 NaCl 平衡 1 d。上样，NaCl 洗脱，按 3 ml体积部分收集，用苯酚-硫酸法跟踪检测。配制一定浓度的板蓝根多糖溶液，以二次重蒸水为空白， TU-1800PC 紫外分光光度计于 190800 nm 的范围进行扫描。3 结果3.1 液料比对多

7、糖得率的影响固定提取温度为 90，提取时间为 7 h，醇沉比 41，醇沉时间 24 h, 称取一定量板蓝根分别在 51，101，201，301，401 条件下提取。结果见图 1。由图 1 可以看出，随着液料比的增大，多糖得率呈上升趋势，当液料比达到 251，多糖得率变化不大。如果水用量过多, 不利于以后的浓缩分离。因此, 选择液料比在251 左右。3.2 提取温度对多糖得率的影响按照液料比 251，提取时间 7h，醇沉比 41，醇5键入文字沉时间 24 h, 称取一定量板蓝根分别在 60，70，80，90，95，100温度下提取。结果见图 2。由图 2 可以看出，提取温度从 60升高到 90时

8、，多糖的得率迅速增加，超过 90则多糖的得率变化平缓，而温度达到 95之后多糖的得率反而有所下降。若温度过低，溶剂的渗透能力和溶解能力差，多糖不能有效溶出;温度过高虽对细胞的破坏作用增大，有利于多糖的浸出，但是会导致多糖裂解，使得多糖得率降低。所以, 提取温度选择 8095时效果较好。tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。关于野鸦椿提取物抗炎镇痛效应的研究6键入文字作者：李先辉，李春艳，贾薇，吕江明【摘要

9、】 目的研究野鸦椿(EJK)水提取物的抗炎镇痛效应。方法采用 4 种急性炎症模型和两种疼痛模型，包括角叉菜胶及蛋清诱导大鼠足趾肿胀、二甲苯致小鼠耳片肿胀、1%冰醋酸致小鼠腹腔渗出模型及扭体、热板法疼痛模型，观察 EJK 水提取物的抗炎镇痛作用。结果 EJK 水提取物小、中、大( 2，4，8 g/kg)3 个剂量组对二甲苯致小鼠耳片肿胀，对角叉菜胶和蛋清引起的大鼠足跖肿胀，对急性炎症导致的皮肤和腹腔毛细血管通透性，对冰醋酸导致的慢性炎性疼痛、热板导致的疼痛均有不同程度抑制作用,其中 EJK 水提取物两个剂量( 4，8 g/kg)组与模型组相比有显著性差异(P 0.01)。结论EJK 水提取物具有

10、较强的抗炎镇痛效应。【关键词】 野鸦椿 抗炎 镇痛野鸦椿(药材名为鸡眼睛)来源于省沽油科植物野鸦椿 Euscaphis japoneca Kantiz，(EJK)的带花或果的枝叶，为贵州、湘西苗族常用药。味辛、甘，性平,具理气止痛、消肿散结的功效1，已有文献报道野鸦椿的枝叶有明显的抗炎作用2 。但与野鸦椿 理气止痛，消肿散结 功效密切相关的抗炎镇痛作用系统研究还不够。本文采用实验性急性炎症动物模型及疼痛模型，观察 EJK 水提取物抗炎镇痛效果,为其临床应用提供理论提供依据。1 材料与仪器7键入文字1.1 动物昆明种小鼠, 1822 g，雌雄各半，合格证号：001847;SD 大鼠, 18020

11、0g，雌雄各半，合格证号：001847，由湖南长沙开福区东创实验动物服务部提供。1.2 药物及试剂 EJK 水提取物由吉首大学药理实验室提供,传统方法水提、浓缩，临用时用蒸馏水稀释成所需浓度(实验所用剂量均以生药计);吲哚美辛，山西临汾奇林药业有限公司生产，批号 201005。二甲苯，江苏徐州试剂二厂产品，批号 050720;角叉菜胶，青岛海洋所提供，用前 1 天以无菌生理盐水配制成 10 g/L，放置 4冰箱过夜备用;甲醇，甲酰胺，冰醋酸、氢氧化钾为分析纯。1.3 仪器 UV-260 可见-紫外分光光度计(日本岛津公司);721 可见分光光度计(上海亚研电子科技有限公司);FA/JA 型电子

12、天平(上海精密科学仪器有限公司);精度 0.02 mm 的游标卡尺(上海量具刃具厂);SHH.W21.420 型电热恒温水箱(天津市泰斯特仪器有限公司);LXJ-B 型离心机(上海安亭科学仪器厂)。2 方法2.1 EJK 水提取物对二甲苯诱导小鼠耳肿胀模型的影响3，4昆明种小鼠 50 只，雌雄各半，随机分为 5 组：模型组(生理盐水)，EJK 小、中、大( 2，4，8 g/kg)3 个剂量组，阳性药组(吲哚美辛，125 mg/kg)。每组动物按 0.1 ml/10g 连续灌胃给药 5 d，模型8键入文字对照组给予相同体积的生理盐水。末次给药 30 min 后，于小鼠右耳前后两面均匀涂抹二甲苯

13、0.02 ml/只,左耳作对照，45 min 后脱颈处死小鼠，沿耳廓基线剪下两耳，用直径为 9 mm 的打孔器沿左右耳片同一部位打下圆耳片，电子天平称重，计算肿胀度和抑制率(下式中给药组包括阳性药组和 EJK 水提取物组，肿胀度以每鼠左右耳片重量差表示。下同)。抑制率(% ) =(模型对照组肿胀度-给药组肿胀度) / 模型对照组肿胀度100 %。2.2 EJK 水提取物对小鼠毛细血管通透性的影响3接上实验，于涂抹二甲苯后，立即尾静脉注射 0.5%伊文思蓝溶液 0.1 ml/10 g，同时腹腔注射 1 %冰醋 10 ml/kg ，45 min后脱颈椎处死动物，用 5 ml 生理盐水冲洗腹腔,吸管

14、收集腹腔液，离心取上清液于 590nm 处可见分光光度计测定吸光度 A 值 。按公式计算小鼠腹腔毛细血管通透性抑制率。腹腔毛细血管通透性抑制率( %) = (模型对照组腹腔液 A 590 - 给药组腹腔液 A590 )/模型对照组腹腔液 A 590 100 %;待 2.1 项实验中耳片称毕，将致炎右耳片浸入 1ml 甲酰胺中, 38水浴 48 h 将染料渗出，离心取上清液于 620 nm 处可见分光光度计测吸光度 A 值。按公式计算小鼠皮肤毛细血管通透性抑制率。皮肤毛细血管通透性抑制率( %) = (模型对照组液 A620 - 给药组液 A620 )/模型对照组液 A620 100 %2.3 EJK 水提取物对角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀模型的影响3，4大鼠 50 只, 雄性,随机分为 5 组：模型组(生理盐水)，EJK 水提取物小、中、大( 0.4，0.8，1.6 g/kg)3个剂量组，阳性药组(吲哚美辛，25 mg/kg)，每组动物按 2 ml/100 g 连续灌胃给药 5d，模型组给予相同体积的生理盐水。实验当天先用游标卡尺(精度 0.02 mm)测所有大鼠右后肢足跖厚度作为造模前的正常值，末次给药 1 h 后,于每鼠右足趾皮下注射 1%角叉菜胶 0.1 ml