1、生化知识点一、名词解释蛋白质变性:理化因素影响使蛋白质生物活性丧失,溶解度下降,部队称性增高以及其他理化常数改变。别构效应:某种不直接涉及蛋白质活性的物质,结合于蛋白质活性部位以外的其他部位(别构部位),引起蛋白质分子的构象变化,而导致蛋白质活性改变的现象。减色效应:变性DNA复性形成双螺旋结构后紫外吸收会降低。磷氧比值:呼吸过程中无机磷消耗量和氧原子消耗量的比值叫做氧磷比,氧磷比的数值相当于一对电子经呼吸链传递至分子氧所产生的ATP分子数。磷酸解:在分子内通过引入一个无机磷酸,形成磷酸酯键,而使原来的键断裂,实际上引入了一个磷酰基蛋白质的二级结构:指多肽链主链原子的局部空间排列,不包括与肽链
2、其他区段的相互关系及侧链构象。蛋白质的三级结构:多肽链借助非共价键弯曲折叠成特定走向的紧密球状构象。-磷酸甘油穿梭:该穿梭机制主要在脑及骨骼肌中,它是借助于-磷酸甘油与磷酸二羟丙酮之间的氧化还原转移还原当量,使线粒体外来自NADH的还原当量进入线粒体的呼吸链氧化。葡萄糖异生:以非糖物质(乳酸、丙酮酸、丙酸、甘油、氨基酸等)作为前体合成葡萄糖的作用。酶的活性中心: 酶分子中氨基酸残基的侧链有不同的化学组成。其中一些与酶的活性密切相关的化学基团称作酶的必需基团。这些必需基团在一级结构上可能相距很远,但在空间结构上彼此靠近,组成具有特定空间结构的区域,能和底物特异结合并将底物转化为产物。这一区域称为
3、酶的活性中心或活性部位波尔效应(Bohr effect):波尔效应:增加CO2的浓度,降低PH能显著提高血红蛋白亚基间的协同效应,降低血红蛋白对O2的亲和力,促进O2释放,反之,高浓度的O2也能促进血红蛋白释放H+和CO2.Hn-RNA:简称pre-mRNA,又称heterogeneous nuclear RNA,hnRNA 真核生物mRNA的前体,即最初转录生成的RNASanger试剂 二硝基氟苯(DNFBFNDB)糖酵解:缺氧的情况下,葡萄糖或糖原在胞液中通过糖酵解途径分解成乳酸,并产生能量的过程超二级结构:由若干个相邻的二级结构(-螺旋、-折叠、-转角及无规卷曲)组合在一起,彼此相互作用
4、形成有规则的,在空间上能够辨认的二级结构组合体。酶原激活:酶原向有活性的酶转化的过程,本质是酶的活性中心形成或暴露的过程。维生素:维持正常生理功能所必须的,但在体内不能合成或合成量不足,必须由食物提供的一类低分子有机物。等电点:在某一pH的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,所带静电荷为零,成电中性,此时溶液的pH称为氨基酸的等电点。激素:生物体内特殊组织或腺体产生的,直接分泌到体液中(若是动物,则指血液,淋巴液,脑脊液,肠液),通过体液运送到特定作用部位,从而引起特殊激动效应(调节控制各种物质代谢或生理功能)的一群微量的有机化合物。2、问答题1.胰岛分泌的激素有哪些,具有什么
5、作用? 胰高血糖素:促使血糖增高;促使脂肪、蛋白质分解。 胰岛素:促使血糖降低:促进脂肪、蛋白质合成及糖的氧化和贮存。2.乙酰辅酶A(乙酰CoA)和FADH的分子结构含有哪些组分?乙酰辅酶A是辅酶A的乙酰化形式,可以看作是活化了的乙酸。 基团 (CH3CO- = 乙酰基)与辅酶A的半胱氨酸残基的SH-基团相连。FADH的分子结构:3.维生素B1、B2在体内的活性形式分别是什么?维生素B6是哪些酶的辅酶?维生素A的作用是什么?可以有什么物质分界生成?维生素D的活性形式?作用是什么?维生素K的作用是什么?肾上腺髓质分泌的激素有哪些?作用是什么?维生素B1在生物体内常以硫胺素焦磷酸的辅酶形式存在。维
6、生素B2在生物体内氧化还原过程中起传递氢的作用。 维生素B6的辅酶:-氨基-酮戊酸合成酶维生素A作用:维持上皮组织的正常的结构和功能,维持正常的视觉(明视觉,暗视觉) 由异戊二烯构件分子生物合成的。维生素D活性形式:1,25-二羟胆钙化醇 作用:(1)维持血清钙磷浓度的稳定 血钙浓度低时,诱导甲状旁腺素分泌,将其释放至肾及骨细胞。 (2)促进怀孕及哺乳期输送钙到子体维生素K的作用:促进凝血,另 维生素K还参与骨骼代谢。肾上腺素和去甲肾上腺素(正肾上腺素):促进糖原分解,使血糖升高。也还可以促使脂肪、氨基酸分解。4.重金属、有机磷农药中毒机理?重金属中毒机理:蛋白质变性有机磷中毒机理:这些有机磷
7、化合物能抑制某些蛋白酶及酯酶活力,与酶分子活性部位的丝氨酸羟基共价结合,从而使酶失活。强烈地抑制对神经传导有关的胆碱酯酶活力,使乙酰胆碱不能分解为乙酸和胆碱,引起乙酰胆碱的积累,使一些以乙酰胆碱为传导介质的神经系统处于过渡兴奋状态,引起神经中毒症状。5.酶原的激活?酶的特异性是指什么?举例说明酶活性调节的几种主要方式?共价修饰有哪些方式?酶原的激活:酶原或前体再经蛋白酶切开,或 除去部分肽段,才能成为具有活性的分子。酶的特异性:1、酶容易失活2、酶具有很高的催化效率3、酶具有高度专一性4、酶活性受到调节和控制酶活性调节方式:1、调节酶的浓度2、通过激素调节酶活性3、反馈抑制调节酶活性4、抑制剂
8、和激活剂对酶活性的调节5、其他调节方式(通过别构调控、酶原的激活、酶的可逆共价修饰和同工酶来调节酶活性)共价修饰:磷酸化、腺苷酰化、尿苷酰化、ADP-核糖基化、甲基化6.丙二酸、氟化钠、碘乙酸分别是哪个酶的抑制剂?(下册79)丙二酸:琥珀酸脱氢酶 氟化钠:烯醇化酶 碘乙酸:甘油醛-3-磷酸脱氢酶7.快速平衡法和稳定法的前提条件(假设)是什么?有什么区别?(P355)答:假设:中间络合物学说。区别:假定迅速建立平衡,底物浓度远远大于酶浓度下ES分解成产物的逆反应忽略不计,快速平衡法推导的方程中米氏方程常数是Ks;稳态是指反应进行一短时间后,系统的复合物ES浓度,由零逐渐增加到一定数值,在一定时间
9、内,尽管底物浓度和产物浓度不断变化,ES也在不断地生成和分解,但当ES生存速率和ES分解速率相等时,络合物ES保持不变,用稳定法推导的米氏方程中米氏常数是Km。8.DNA一级结构的连接方式?DNA双螺旋的类型?B-DNA的具体内容是什么?P482答:DNA一级结构的连接方式:由数量庞大的四种脱氧核糖核甘酸即:腺嘌呤脱氧核糖核甘酸、鸟嘌呤脱氧核糖核苷酸、胞嘧啶脱氧核糖核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核糖核苷酸,通过3,5-磷酸二酯键连接起来的直线形或环形多聚体。类型:A型、B型、C型、D型、E型和左手双螺旋的Z型具体内容:watson和crick所建议的结构代表DNA钠盐在较高湿度下(92%)制得的纤维结构
10、,该结构称为B-DNA。它的水分含量高,可能比较接近大部分DNA在细胞中的构像。是由两条反向的多核苷酸链组成的双螺旋,右手螺旋;为C2内式,其中的碱基对倾斜角甚小,螺旋轴穿过碱基对,其大沟比小沟宽,深度则相近。9.米氏方程的计算?反应速度、米氏常数、底物浓度等?米氏常数的意义,特征?(P355)答:方程: 米氏常数: 反应速度: 底物浓度:可由米氏方程推导可得米氏常数的意义:1、Km是酶的一个特性常数:其大小只与酶的性质有关,而与酶浓度无关。2、Km值可以判断酶的专一性和天然底物,并且有助于研究酶的活性部位3、当k3k2时,Km=k2/k3,即Km=Ks,ES的分解为反应的限制速率时,Km等于
11、ES复合物的解离常数,可以作为酶和底物结合紧密程度的一个度量,表示酶和底物结合的亲和力大小。4、若已知某个酶的Km值,就可以计算出在某一底物浓度时,其反应速率相当于Vmax的百分率。5、Km值可以帮助推断某一代谢反应的方向和途径。特征:Km值随测定的底物、反应的温度、pH及离子强度而改变。10.酶的抑制剂类型?互相的异同? 酶的抑制剂类型分为不可逆抑制剂和可逆抑制剂。不可逆抑制剂与酶的必需基团以共价键结合而引起酶活力丧失,不可通过去除抑制剂使酶复活。可逆抑制剂与酶以非共价键结合而引起酶活力降低或丧失,可以通过物理方法去除抑制剂使酶复活。可逆抑制剂又分为竞争性抑制剂(Vmax不变,Km变大,Km
12、随着【I】的增加而增大);非竞争性抑制剂(Km不变,Vmax变小,当Km=Km时,Vmax随【I】的增大而减小);反竞争性抑制剂(Km和Vmax都变小,而且KmKm,VmaxVmax,即表观Km及表观Vmax都随【I】的增大而减小。11.mRNA的帽子结构和ployA尾分别是什么?功能是什么?P485 mRNA的5端帽子是一个特殊结构。它由甲基化鸟苷酸经焦磷酸与mRNA的5末端核苷酸相连,形成5-三磷酸连接。(P484)功能:增强mRNA的稳定性;有助于核糖体对mRNA的识别与结合,使翻译得以正确起始。 极大多数真核细胞mRNA 3端有一段长约20-250的聚核苷酸。Ploy(A)是在转录后经
13、ploy(A)聚合酶的作用添加上去的。ployA聚合酶专一作用于mRNA,对rRNA和tRNA无作用:ployA尾巴与mRNA从细胞核到细胞质的运输有关,还与mRNA的半寿期有关。12.核酸变性是什么,变性 双链DNA分子中Tm值与哪些因素有关?DNA的复性作图需要测定哪些指标?核酸变性指核酸双螺旋区的氢键断裂,并不涉及共价键的断裂。Tm值就是DNA熔解温度,指把DNA的双螺旋结构降解一半时的温度。影响因素:DNA的均一性、G-C之含量、介质中的离子强度。(P509)DNA的复性指变性DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。指标:核苷酸对,
14、重缔合的比例、复性反应的速度Cot(P510)13. tRNA的结构特征?携带氨基酸是哪段?具有什么特征?(1)tRNA一级结构具有以下特点:1)分子量较小,大约由7395个核苷酸组成。2)分子中含有较多的修饰成分3)3末端都具有CpCpA-OH的结构。5端多为pG,也有pC4)恒定核苷酸,有十几个位臵上的核苷酸在几乎所有的tRNA中都不变。5)tRNA约占细胞总RNA的15%(2)tRNA的二级结构呈“三叶草形”组成:氨基酸臂;反密码环;二氢尿嘧啶环;TC环;额外环。(3)tRNA的三级结构:倒挂的L字母(4)携带氨基酸的是:氨基酸臂。(5)特征:氨基酸臂由7对碱基组成,富含鸟嘌呤,末端为。
15、14. 在酶的纯化实验过程中,主要关注哪些指标?酶的激活剂有什么作用?酶的纯化指标:总活力的回收、比活力提高的倍数(P337)激活剂能提高酶活性,但是对酶的作用具有一定的选择性,即一种激活剂对某种酶起激活作用,而对另一种酶可能起抑制作用。同时,激活离子对于同一种酶,可因浓度不同而起不同的作用。(P380)15. 有两种L构型和D构型 20种:甘氨酸(Gly), 丙氨酸(Ala), 缬氨酸(Val), 亮氨酸(Lue), 异亮氨酸(Ile), 丝氨酸(Ser), 苏氨酸(Thr), 半胱氨酸(Cys), 甲硫氨酸(Met), 天冬氨酸(Asp), 谷氨酸(Glu), 天冬酰胺(Asn), 谷氨酰胺(Gln), 赖氨酸(Lys), 精氨酸(Arg),组氨酸(His),脯氨酸(Pro),苯丙氨酸(Phe),酪氨酸(Tyr),色氨酸(Trp)碱性氨基酸:赖氨酸,精氨酸 酸性氨基酸:天冬氨酸,谷氨酸,天冬酰胺,谷氨酰胺16. 蛋白质变性:蛋白质为大分子物质,有一定的空间结构和生物学功能。在各种物理因素和化学因素作用下,蛋白质生物活性丧失,溶解度降低,不对称性增高
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