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1、推荐下载高效液相色谱法测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量键入文字高效液相色谱法测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。高效液相色谱法测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量作者：李国军，毛晓霞，苏占辉，刘玉翠，陈四平【摘要】 目的测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷的含量。方法高效液相色谱法。结果野黄芩苷进样量在 0.914.55 g 范围内，峰面积积分值与进样量有良好的线性关系，r=0.999 9，平均加样回收率为 99

2、.23%，RSD=2.21%。结论该法可以用于该药的质量控制。【关键词】 注射用黄芩茎叶总黄酮 野黄芩苷 高效液相色谱法1键入文字黄芩茎叶为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥地上部分,其有效部位为黄芩茎叶总黄酮(total flavonoids from stems and leaves of Scutellaria baicalensis Georgi,SSF)，其化学成分主要包括野黄芩苷、黄芩苷、芹菜素苷、白杨素-7-O- -D-葡萄糖醛酸苷等黄酮类化合物。其中野黄芩苷具有清热解毒、扩张血管、改善体内微循环等明显药理活性1。药理学研究发现黄

3、芩茎叶总黄酮具有较强的抗病毒、抗炎、抗氧化、降血脂和较强的记忆改善作用24。为了有效地发挥黄芩茎叶的药用价值，方便急诊及不能口服药物的病人，我们将黄芩茎叶有效成分精制纯化，研制了注射用黄芩茎叶总黄酮。本实验通过建立 HPLC 法测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量的方法来控制制剂的内在质量。1 仪器与试药1.1 仪器 Shimadzu10ATvp 高效液相色谱仪，CLASSvp5.0 色谱数据工作站，瑞士产梅特 AG-245 型电子分析天平，惠普 HP-8453 紫外可见分光光度计，KQ-100E 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。1.2 试药野黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，

4、批号 110842-200504)，注射用黄芩茎叶总黄酮(承德医学院中药研究所研制)。2键入文字2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱为 Discovery C18(4.6 mm 250 mm, 5 流动相为以甲醇-0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱，030 min 由 40%的甲醇的 0.1%甲酸溶液增加到 70%甲醇的 0.1%甲酸溶液;流速 0.8 ml/min;检测波长 335 nm;柱温 26;进样量 10 l。2.2 检测波长的选择将野黄芩苷对照品溶液进行光谱扫描，结果最大吸收波长为 335nm，故选择 335 nm 为检测波长。2.3 对照品溶液的制备精密称取五氧化二磷减压干燥器中干燥

5、24 h 的野黄芩苷对照品 22.75 mg 至 50 ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液(0.455 mg/ml)，备用。精密吸取上述溶液 5 ml 至 10 ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀;作为对照品溶液(0.227 5 mg/ml)。2.4 供试品溶液的制备 取黄芩茎叶总黄酮冻干粉 10 mg,精密称定，置 10 ml 量瓶中，加甲醇适量，超声处理 20 min 使溶解，放冷，补加甲醇至刻度，摇匀，放置，取上清液用微孔滤膜(0.45 m)滤过，取续滤液，作为供试品溶液。2.5 空白试验按照样品制备工艺，制成不含黄芩茎叶总黄酮成分的空白冻干粉针，作为阴性对照

6、，同法测定。结果空白冻干粉在与野黄芩苷对照品相同保留时间处无色谱3键入文字峰，故认为无干扰。2.6 线性关系考察精密吸取浓度为 0.455 mg/ml 的野黄芩苷对照品储备液 2，4，6，8，10 l 依次注入色谱仪中，在前述色谱条件下，测定野黄芩苷的峰面积，结果见表1。以进样量 X( g)为横坐标，峰面积 Y 为纵坐标，绘制标准工作曲线，见图 1。回归处理得直线方程为 Y=5 106X-351 032，r=0.999 9。表 1 线性关系测定结果(略)x【摘要】 目的测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷的含量。方法高效液相色谱法。结果野黄芩苷进样量在 0.914.55 g 范围内，峰面积积分值

7、与进样量有良好的线性关系，r=0.999 9，平均加样回收率为 99.23%，RSD=2.21%。结论该法可以用于该药的质量控制。【关键词】 注射用黄芩茎叶总黄酮 野黄芩苷 高效液相色谱法黄芩茎叶为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi 的干燥地上部分,其有效部位为黄芩茎叶总黄酮(total flavonoids from stems and leaves of Scutellaria baicalensis Georgi,SSF)，其化学成分主要包括野黄芩苷、黄芩苷、芹菜素苷、白杨素-7-O- -D-葡萄糖醛酸苷等黄酮类化合物。其中野黄芩苷具有清热解毒、

8、扩张血管、改善体内微循环等明显药理活性1。药理学研究发现黄芩茎叶总黄酮具有较强的抗病毒、抗炎、抗氧化、降血脂和较强的记忆改善作用24。为了有效地发挥黄芩茎叶的药用价值，方便急诊及不能口服药物的病人，我们将黄芩茎叶有效成分精制纯化，研制了注射用黄芩茎叶4键入文字总黄酮。本实验通过建立 HPLC 法测定注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量的方法来控制制剂的内在质量。1 仪器与试药1.1 仪器 Shimadzu10ATvp 高效液相色谱仪，CLASSvp5.0 色谱数据工作站，瑞士产梅特 AG-245 型电子分析天平，惠普 HP-8453 紫外可见分光光度计，KQ-100E 型超声波清洗器(昆山市超声

9、仪器有限公司)。1.2 试药野黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号 110842-200504)，注射用黄芩茎叶总黄酮(承德医学院中药研究所研制)。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱为 Discovery C18(4.6 mm 250 mm, 5 流动相为以甲醇-0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱，030 min 由 40%的甲醇的 0.1%甲酸溶液增加到 70%甲醇的 0.1%甲酸溶液;流速 0.8 ml/min;检测波长 335 nm;柱温 26;进样量 10 l。2.2 检测波长的选择将野黄芩苷对照品溶液进行光谱扫描，结果最大吸收波长为 3355键入文字nm，故选择 335 nm 为检

10、测波长。tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！ 【编者按】医药论文是科技论文的一种是用来进行医药科学研究和描述研究成果的论说性文章。论文网为您提供医药论文范文参考，以及论文写作指导和格式排版要求，解决您在论文写作中的难题。短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉的挥发性成分对比研究作者：霍昕，丁丽娜，刘建华，高玉琼，刘文炜【摘要】 目的研究短柄南蛇藤中的挥发性成分。方法利用有机溶剂-水蒸气蒸馏提取短柄南蛇藤茎普通粉和超微粉挥发油，采用 GC-MS 进行测定，结合计算机检索技术对分离化合物进行结构鉴定，应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果从短柄南蛇藤茎普通粉和超微粉中分别分离

11、鉴定出 9 种和 21 种化学成分，分别占挥发油总量的 95.960%和 97.518%。短柄南蛇藤叶两种粉末挥发油成分中，含有 9 种相6键入文字同成分，其中含量最高的为油酸(普通粉 56.711%，超微粉 56.988%)。结论该文首次对短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉的挥发性成分进行对比研究。【关键词】 短柄南蛇藤茎普通粉 短柄南蛇藤茎超微粉 挥发性成分 气相色谱-质谱联用技术Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of volatile oil from Celastrusrosthornianus Loes. Methods

12、The chemical compositions of the volatile oil from the plantsobtained by Organic-team distillation with hexane were analyzed by GC-MS. Theconstituents were identified by their mass spectra. The relative percentage of the oilconstituents was calculated from the GC peak areas. Results9 and 21 chemical

13、 componentsare identified from ordinary pulverization and micro-milling of the stems of Celastrusrosthornianus Loes respectively.The amount of the identified components were accounted formore than 95.960% and 97.518% of all the volatile oil respectively. There were the same of 9components in the two

14、 oils. Olenolic acid had the highest content (ordinary pulverization56.711%，micro-milling 56.988%).ConclusionThis paper reports the comparison of volatileconstituents from the stems of Celastrus rosthornianus Loes for the first time.Key words：Ordinary powder of the stems of Celastrus rosthornianus L

15、oes; Micro-millingof the stems of Celastrus rosthornianus Loes; Volatile oil; GC-MS7键入文字短柄南蛇藤 Celastrus rosthornianus Loes 为卫矛科南蛇藤属植物，生于山坡、路旁草丛和灌丛中，分布于陕西、浙江、福建、湖北、广东、广西、四川、贵州、云南等地。其根、茎叶、果实等均可入药。短柄南蛇藤茎味辛、苦，性平、小毒，功效为祛风除湿，活血止血，解毒消肿，主治风湿痹痛，跌打损伤，脘腹痛，牙痛，疝气痛，月经不调，经闭，血崩，肌衄，疮肿，带状疱疹，湿疹1。文献资料25表明，对短柄南蛇藤的研究主要集中

16、在根皮及藤茎的化学成分和抗肿瘤、杀虫活性方面，对短柄南蛇藤茎挥发性成分及其对比研究的报道较少。本文首次利用简便的有机溶剂-水蒸气蒸馏法提取短柄南蛇藤茎的挥发油,对其化学组成进行了定性定量的研究，并对其普通粉与超微粉进行对比分析。1 仪器与材料1.1 仪器挥发油提取器;美国惠普公司( Hcwlctt Packard)HP-6890/HP5973 GC-MS 气质联用仪;SYFM-8型超微粉碎机(济南松岳机器有限责任公司)。1.2 试剂与材料蒸馏水、正己烷(重蒸馏)、无水硫酸钠(国产分析纯试剂)。短柄南蛇藤茎普通粉(80 目)、短柄南蛇藤茎超微粉(300 目)，来自贵州镇远，经贵阳中医学院孙庆文老

17、师鉴定为卫矛科植物短柄南蛇藤 Celastrus rosthornianus Loes 的干燥藤茎。8键入文字2 方法2.1 短柄南蛇藤挥发油的提取分别取短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉各 20 g，于磨口烧瓶中，加 2 000 ml 蒸馏水及适量正己烷，采用中国药典挥发油提取装置6提取，收集上层油状物，用无水硫酸钠干燥作为供试品。2.2 短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉挥发性成分定性定量分析取短柄南蛇藤茎普通粉与超微粉提取物各 1 l，进样，用 GC-MS 仪器进行分离测定。2.3 气相色谱-质谱条件2.3.1 气相色谱条件 HP-5MS 5% Phenyl Methyl Siloxane(30 m 2

18、50 m 0.25 m)弹性石英毛细管柱,柱温 50，保留 2min，以 4 min-1 升温至 280，保持 2 min;汽化室温度250;载气为高纯度氦气(99.999%);柱前压 7.62 Psi;流速 1.0 ml/min;进样量 1 分流比9键入文字401。2.3.2 质谱条件离子源为 EI 源;离子源温度 230;四级杆温度 150;电子能量 70 eV;发射电流 34.6 倍增器电压 2 013 V;接口温度 280;溶剂延迟 4 min;质量范围 10500amu 。2.4 定性与定量分析tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！2.3 对照品溶液的制备精密称取五

19、氧化二磷减压干燥器中干燥 24 h 的野黄芩苷对照品 22.75 mg 至 50 ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液(0.455 mg/ml)，备用。精密吸取上述溶液 5 ml 至 10 ml 量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀;作为对照品溶液(0.227 5 mg/ml)。2.4 供试品溶液的制备 取黄芩茎叶总黄酮冻干粉 10 mg,精密称定，置 10 ml 量瓶中，加甲醇适量，超声处理 20 min 使溶解，放冷，补加甲醇至刻度，摇匀，放置，取10键入文字上清液用微孔滤膜(0.45 m)滤过，取续滤液，作为供试品溶液。2.5 空白试验按照样品制备工艺，制成不含黄芩茎叶

20、总黄酮成分的空白冻干粉针，作为阴性对照，同法测定。结果空白冻干粉在与野黄芩苷对照品相同保留时间处无色谱峰，故认为无干扰。2.6 线性关系考察精密吸取浓度为 0.455 mg/ml 的野黄芩苷对照品储备液 2，4，6，8，10 l 依次注入色谱仪中，在前述色谱条件下，测定野黄芩苷的峰面积，结果见表1。以进样量 X( g)为横坐标，峰面积 Y 为纵坐标，绘制标准工作曲线，见图 1。回归处理得直线方程为 Y=5 106X-351 032，r=0.999 9。表 1 线性关系测定结果(略)结果表明野黄芩苷进样量在 0.914.55 g 范围内，峰面积积分值与进样量有良好的线性关系。2.7 精密度实验精

21、密吸取野黄芩苷对照品溶液(0.227 5 mg/ml)10 l，连续进样 6 次，记录对照品峰面积依次为 10 527 733，10 519 059，10 419 713，10 553 602，10 523716，10 630 278，测定结果 RSD 为 0.64%, 表明精密度良好。2.8 稳定性实验精密吸取同一供试品溶液 10 l，于制样后 0，2，4，8，24 h 连续进样测定，峰面积分别为 10 589 059，10 823 828，10 499 713，10 533 653，10 714 625，测11键入文字定结果 RSD 为 1.27%，表明供试品溶液在室温条件下 24 h 内

22、稳定。2.9 重复性实验取同批样品(批号 080718)5 份，按样品含量测定项下依法平等操作，测定每份样品中野黄芩苷含量分别为 0.221, 0.214, 0.219, 0.229, 0.218 mg/mg，测定结果RSD 为 2.52%。2.10 加样回收率实验取 6 份已知野黄芩苷含量的供试品 5 mg(批号 080718，平均含量为 0.220 mg/mg)，精密称定，各精密加入野黄芩苷储备液(0.455 mg/ml)3 ml，按供试品溶液制法制备，依法测定，计算加样回收率，结果平均回收率为 99.23%，RSD 为2.21%。结果见表 2。表 2 野黄芩苷回收率实验(略)2.11 样

23、品中野黄芩苷的含量测定精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 10 l，分别进样测定，色谱图见图 2，以外标法计算注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷的含量。测定3 批，每批测定 3 份。结果见表 3。表 3 样品中野黄芩苷含量(略)3 讨论本文采用 HPLC 法对注射用黄芩茎叶总黄酮中主要成分野黄芩苷进行含量测定，通过加样回收率及精密度实验，证明该方法简便、准确、可靠，可以用于控制该药制剂的内在质量。12键入文字通过对不同批次样品含量测定结果，建议注射用黄芩茎叶总黄酮中野黄芩苷含量应不低于 0.200 mg/mg。【参考文献】1国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册M.北京：人民卫生出版社，

24、1986:946.2Moore P B, Day J P, Taylor G A, et al. Absorption of aluminium 26in Alzheimersdisease, measured using accelerator mass spectrometryJ. Dement Geriatr cogn Disord, 2000,11(2): 66.3Shang YZ, Gong MY, Zhou XX, et al. Improving effects of SSF on memory defects andpathological changes of neural and immunological systems in senescent mice J. ActaPharmarcol Sin, 2001, 22(12):1078.4周晓霞，李素婷，周晓慧，等.黄芩茎叶总黄酮抗炎作用实验研究J.中国中医药信息杂志，2000, 7(4): 27.13键入文字医药卫生栏目tips:感谢大家的阅读，本文由我司收集整编。仅供参阅！14