柱压问题 文档.docx

1、柱压问题 文档色谱柱在HPLC中是非常关键的部件。一台色谱仪如果没有色谱柱几乎什么工作也做不了。色谱柱是消耗品，有一定寿命，使用中也非常容易出问题。普通的正相反相色谱柱使用得当可用一、两年。使用不得当用两、三个月就可能损坏。所以使用中应该非常注意。1.在使用一根新的色谱柱之前，一定要看柱说明书，将柱子的使用压力、pH值、温度范围和所用流动相种类都要弄清楚。接触最多的是C18色谱柱，它对试剂应用的范围非常广，甲醇、水、乙腈、四氢呋喃、三氯甲烷、正乙烷、各种缓冲盐都适用。但其他的色谱柱所使用的试剂就有一定的要求，有的色谱柱只能使用水，不能使用有机试剂，有的色谱柱只能使用有机试剂，而且使用指定是某一

2、种，象GPC色谱柱。这些事情一定搞清楚，如果流动相使用不对，柱子很快会损坏。另外在更换柱子时不能让不能使用的流动相进入柱子。2.柱子是有方向的，柱子上箭头的方向就是流动相流动的方向。当换新柱子时，不要马上就接到检测器上使用。将柱子入口处接在进样器的出口，柱子出口处（即箭头的一端）先不接检测器，按箭头方向垂直朝上，用流动相（甲醇）以1ml/min的流速冲洗1min左右。将柱子里的小气泡全部赶走以后再接到检测器上，否则小气泡跑到检测池里，就很难赶走，检测器产生噪声信号，基线也就走不好。3.关于压力对色谱柱的影响：常用的正反两相色谱柱一般耐压在1220MPa之间，生产厂家不同，耐压也不同，从理论上讲

3、耐压高的色谱柱柱效就高，但柱效高低不仅与耐压的高低有关，还有其他因素。从使用中看，在保证柱效的同时，耐压不要太高，仪器所显示的压力是流路、混合器、自动进样器、柱压、流通池总体的压力，检查柱压力应分段检查。压力过高不仅柱子受不了，其他的部件也会出问题，例如自动进样器。4.色谱柱对pH值是有一定的使用范围。以硅胶为担体的柱子一般使用范围在27pH。耐碱性能不太好，流动相的pH大于8会使硅胶溶解。有些分析条件须用碱性流动相，这时一定要选耐碱性好的色谱柱，流动相的PH值过高或过低，流动相使用纯水，使用高浓度磷酸盐缓冲溶液，使用离子对试剂等，均可能造成色谱柱填料被化学破坏，这种对色谱柱固定相及键合相的破

4、坏通常是不可修复的。5.色谱柱的使用温度不要超过说明书上规定的温度。一般使用温度在60以下，典型硅胶基质色谱柱的使用温度在5与60之间，高温使用会缩短柱寿命。6.色谱柱使用过程中压力的骤然波动，温度的骤然变化或机械撞击都会对色谱柱床产生影响。进样过程中，进样阀转动太慢引起压力波动；流速的突然增大都应在日常分析中尽量避免。一般说来，在低柱压下操作可大大减少由压力波动造成的柱效损失。这种问题是不可修复的7.色谱柱内存在缓冲盐时，如果用高浓度甲醇或其他有机溶剂冲洗色谱柱，会导致柱内缓冲盐结晶析出，造成柱压明显升高。出现该问题时，反相色谱柱首先应使用20%左右有机溶剂的水溶液低流速冲洗色谱柱，使柱内的

5、盐全部溶解冲出，再换成高浓度甲醇或其他有机溶剂的流动相。8.样品的预处理，许多样品，特别是生物样品与中药材，其组分复杂，样品预处理是影响色谱柱寿命的关键。样品经过常规的前处理后，进样前还需进行以下步骤：a.用微孔过滤膜出除去样品中的不溶颗粒，以免赌塞柱头筛板及柱内填充床，使柱压升高。b.将样品用流动相溶解或用与流动相互溶的溶剂溶解。9.为了保护色谱柱，在色谱柱前接了一个保护柱。保护柱通常是比较短的分析柱，通过吸附可能污染分析柱的强保留杂质，达到保护色谱柱的目的。保护柱的筛板与在线过滤器一样可以阻挡微粒杂质。为了达到最好的保护效果同时避免导致色谱结果的改变，最好选用与分析柱相同或相似的填料填充保

6、护柱。10.色谱柱用合适的溶剂保存，若为C18柱推荐用甲醇保存。在日常分析中，流动相含有的不纯物质和样品中的某些组分会吸附在色谱柱中，随着分析时间的延长，吸附量会越多，所以柱子要经常清洗，一般柱子使用一两个星期洗一次，柱子不同清洗的流动相就不同，C18柱子常用甲醇清洗，不要用水清洗这对柱子不好，一般清洗34小时，另外色谱柱长时间不用，存放时要将柱子洗干净，脏柱子放置时间越长，柱效会大大降低。存放时，柱内应充满溶剂（甲醇或乙腈），两端封死。影响柱压的因素一般有这样几种：1、流动相的配比（如甲醇水体系在50：50附近柱压是最大的）；2、流速的影响，流速越大柱压越高；3、使用的溶剂，特别是水一般不应

7、该超过一周（最好23天就换一次），水很容易生细菌从而堵掉系统的（不知道楼主用的是什么水，最好用二次蒸馏水或娃哈哈也行）；4、整个色谱系统有三重防堵措施，一是溶剂瓶中的砂心过滤，二是两种溶剂混合后有个过滤器，三是进柱子之前有个保护柱（不知楼主的色谱装了保护柱没有，很重要的，否则柱子寿命会缩短很多，有些柱子有保护柱可用400h还没问题,而没保护柱使用不到100h就不行了，当然，保护柱有好几种功能的），前两个地方一般因为溶剂不纯（包括前面讲的水生细菌）而堵，而保护柱前则会因为前面的原因与所分析的样品性质共同影响而堵，所以每次分析完后一定要先用水冲洗，再用甲醇冲洗（一般各为20分钟左右，冲到柱压不变，

8、像分析专业的一般都会冲洗过夜），一定要冲洗干净，否则用一次下次就会堵了！近几年化验室用的液相色谱仪是越来越多，所用色谱柱的种类也越来越多，问题出的也较多，值得注意的是，不论怎样对色谱柱进行处理，一般都很难恢复到原有水平，因此，大家再使用色谱柱之前一定要看说明书，把以上几项问题搞清楚后再使用，尽量避免发生如上问题。色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：（1）、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；（2）、色谱柱头的填料被样品污染；（3）、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓

9、度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；（4）、流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。解决办法如下：（1）、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。（2）、如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。（3）、如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。（4）、如果因PH值使用不当，很难恢复。 色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是

10、在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：（1）、色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；（2）、色谱柱头的填料被样品污染；（3）、色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；（4）、流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。解决办法如下：（1）、如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。（2）、如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，

11、用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。（3）、如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。（4）、如果因PH值使用不当，很难恢复。 高效液相色谱中常遇见的问题及处理方法 (申请加分)1 色谱柱跑干了，处理方法：将贮液瓶装入重蒸水，首先按purge键，将柱前气柱排出，若无法排出，可将色谱柱前拆下，用注射器抽吸。待柱前气体排空后，连接色谱柱，用水高低流速交替冲洗色谱柱，直至柱压稳定为止。 2.基线不稳，有静电，处理方法：检查接地是否良好。 3.峰面积变化非常大，处理方法：检查是否进样阀堵塞。 4.基线突然提高，变粗，处理方法：检查样品池能量，若

12、低于正常值，说明检测器污染。 5.柱压变动范围较大，处理方法：多为进气泡。高低流速交替冲洗。 6.柱效或峰形突然变差，处理方法：更换预柱。 7塔板数低 ：色谱柱选择不对，二次保留、峰形不好的影响 8色谱柱易变性：色说柱选择不对，二次保留的影响 9色谱柱寿命短：色谱柱选择不对，样品需预处理（PH7） 10保留值变化：色谱柱平衡不够，流动相比例改变 11出现新的干扰峰：初始分离不够或初始样品无代表性 选择波长要从以下几个方面考虑： 1. 检测波长要大于溶剂截止波长。如果所选择的波长下溶剂有很强的吸收当然是不合适的。溶剂有强吸收后，基线抬高，减小检测的线性范围而且会加大基线噪声，对溶质的检测灵敏度下

13、降。 2. 对各组分都要有适当的吸收。一般是不可能做到的。所以只要选择一个对大多数组分都有较大吸收的波长就可以了。 3. 外标法定量时，要选择被测组份最大吸收波长。 254nm 对常见的共轭结构和羰基官能团都有吸收。对饱和基团也有弱的吸收。而对于常见的乙腈、甲醇的透过率很高。是在不知道用什么波长时最理想的试验波长。 （一）涡流扩散（Eddy diffusion） 流动相碰到较大的固体颗粒，就像流水碰到石头一样产生涡流。如果柱装填得不均匀，有的部分松散或有细沟，则流动相的速度就快；有的部位结块或装直紧密则流就慢，多条流路有快有慢，就使区带变宽。因此，固相载体的颗粒要小而均匀，装柱要松紧均一，这样

14、涡流扩散小，柱效率高。 （二）分子扩散（Molecular diffusion） 分子扩散就是物质分子由浓度高的区域向浓度低的区域运动，也称纵向分子扩散。要减少分子扩散就要采用小而均匀的固相颗粒装柱。同时在操作时，如果流速太慢，被分离物质停留时间长，则扩散严重。 （三）质量转移（Mass transfer） 被分离物质要在流动相与固定相中平衡，这样才能形成较窄的区带。在液相色谱中，溶质分子要在两个液相之间进行分配，或在固相上被吸附和解吸附均需要一定的时间。当流速快时，转移速度慢，来不及达到平衡动相就向前移，这各物质的非平衡移动，使区带变宽。 四）动相流速 当流速太低时，分子扩散严重，特别是在气

15、相色谱中尤为突出。如将理论塔板高度对流速作图，理论塔板高度随流速增加而急速下降，当达到最低值时，流速再加大则质量转移起主要作用，理论塔板高度又加大。在高效液相色谱中，流速稍快影响不大，但在凝胶过滤色谱中，因为物质要渗透到凝胶内部，所以质量转移影响大，流速咖大会降低柱效率。 五）固定相颗粒大小 定相颗粒越小柱效率越高，对流动相流动的阻力越大，需要加大压力才能使它流动。 1、开泵后压力即升高至最高限度，经过对色谱柱前，色谱柱，色谱柱后的分段测试，确定为检测池堵塞。 2、换检测波长后，色谱峰面积比以前做的小很多，怀疑进样环或管路漏夜，经检查，排除，最后确定为，检测波长的显示值和实际值不符。 由气味、

16、景象和声音可以发现的问题 你需要运用你所有的感官去发现液相色谱的问题。你最好养成习惯，每天花上几分钟运用你的感官（除了味觉）来“感觉”你的液相色谱是否存在问题，这样可以帮助你迅速找到问题所在。例如：在你看到漏液之前，你可能首先闻到它的气味。大部分的问题是可以通过眼睛看到。 A、溶剂的气味 原 因解决方法 1、漏液1、见前 2、溅出2、a、检查废液瓶是否已满 b、找到溅出的部位并清洗干净 B、热气味 原 因解决方法 1、仪器过热1、a、检查并调节通风设施 b、检查并调节温度设定 c、关掉仪器，查找维修手册 C、读数不正常 原 因解决方法 1、压力不正常1、见前 2、柱温箱问题2、a、检查并调节设

17、定 b、参照用户手册 3、检测器灯失效3、更换灯 D、灯警告 原 因解决方法 1、压力超出极限值1、a、检查是否阻塞 b、检查并调节极限值的设定 2、其它警示灯2、见用户手册 E、警告音 原 因解决方法 1、溶剂泄漏/溅出1、找到并解决 2、其它警告音2、见用户手册 F、刺耳的短音或长音 原 因解决方法 1、轴承失效1、见用户手册 2、润滑不够2、进行恰当的润滑 3、机械故障3、见用户手册 进样阀可能发生的问题 A、手动进样阀，转动不灵 原 因解决方法 1、转子密封损坏1、更换或调整转子密封 2、转子太紧2、调整转子的松紧度 B、手动进样阀，载样困难 原 因解决方法 1、进样阀安装不当1、重新

18、安装 2、定量环阻塞2、清洗或更换定量环 3、进样器污染3、清洗或更换进样器 4、管路阻塞4、清洗或更换管路 C、自动进样阀，不能转动 原 因解决方法 1、无压力（或电源）1、提供恰当的压力（电源） 2、转子太紧2、调整转子的松紧度 3、进样阀安装不当3、重新安装 D、自动进样阀，其它问题 原 因解决方法 1、阻塞1、清洗或更换阻塞部件 2、机械故障2、见随机维修手册 3、控制器故障3、维修或更换控制器 HPLC柱压过高： 1.拆去保护柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查； 2.把色谱柱从仪器上取下来，如果压力仍然不降，则是管路堵塞，须清洗，如果压力下降了，将柱子的进出口

19、反过来接再仪器上，用10倍量柱体积的流动相冲洗柱子，如果柱压仍不降，再检查 3.更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明溶剂获样品中含有固体颗粒，若柱压还高，可在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器 基线不稳，上下波动或漂移 1。流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟 2。单向阀堵塞，取下超声去除堵塞物 3。泵密封损坏，造成压力波动，更换泵密封 4。系统存在漏液点，确定漏液位置并维修 5。流通池内有赃物或者杂质，清洗杂物 6。柱后产生气泡，流通池出液口加负压调节器 7。检测器没有设定在最大吸收波长处 8。柱平衡慢，特别是流动相发生变化时。用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-2

20、0倍体积的心流动相对柱子进行冲洗 1.检测信号出现倒峰，检查检测器与主机相连接是否有松动，可以把下重新连接。 2.夏季气温高，水容易生菌，要求HPLC所用重蒸水必须每天都要更新。 3.由甲醇换到流动相平衡时，压力先稍稍下降，然后慢慢回升，可能是混合池混合效果不好，也可能是B泵轻度堵塞。 4.色谱柱长期不用，应用甲醇冲洗2h以上后，宁上两端螺丝保存。 岛津机器易出现的毛病是： 1、压力不稳：单向阀堵塞，可拆下，用甲醇水超声； 或漏液； 管路过滤器损坏； 2、基线噪音变大：未接地线，可在检测器的外壳外接一根铁丝连地； 灯能量不足，可在funk功能中查找灯的使用时间，或拆开机器外壳，观看紫外灯的强度

21、；检测池污染，拆下柱子，用无体积连接器连接泵和检测器，用异丙醇小流速冲洗半个小时即可； 流动相污染或进气泡。 3、泵头有盐析出：应经常用5异丙醇清洗柱塞杆，否则易磨损。 4、进样口漏液：可能是标准针头变形或损坏，使得进样器磨损，不好的针头应及时扔掉。 液相色谱常见问题及处理方法液相色谱常见问题及处理方法HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1、样品量不足，解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改换检测器4、检测器衰减太多。调整衰减即可。5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染。解

22、决办法为清洗池窗。7、检测池中有气泡。解决办法为排气。8、记录仪测压范围不当。调整电压范围即可。9、流动相流量不合适。调整流速即可。10、检测器与记录仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，

23、以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再检查；4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。若柱压还高，请与厂商联系。 一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题，SGE提供的Rheodyne 7315型过滤器就是解决这一问题的最佳选择。液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化漂移现象1、温度控制不好，解决方

24、法是采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡快速变化现象1. 流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合HPLC 仪器问题1、 我的HPLC泵压明显的偏高，请问可能的原因？答：流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。2、 基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？答：a.流动相有溶解气体；用超

25、声波脱气15-30分钟或用充氦气脱气b.单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去处堵塞物c.泵密封损坏，造成压力波动；更换泵密封d.系统存在漏液点；确定漏液位置并维修f.柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器g.检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至最大吸收波长处h.柱平衡慢，特别是流动相发生变化时；用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。3、 接头处为何经常漏液，如何处理？答：接头没有拧紧；拧松后再紧，手紧接头以手劲为限，不要使用工具，不锈钢接头先用手拧紧，再用专用扳手紧1/4-1/2圈，注意接头中的管路一定要通到底

26、，否则会留下死体积。接头被污染或磨损；建议更换接头。接头不匹配，建议使用同一品牌的配件。4、 进样阀漏液是如何造成的？答：a.转子密封损坏；更换转子密封b.定量环阻塞；清洗或更换定量环c.进样口密封松动；调整松紧度d.进样针头尺寸不合适，一般是过短；使用恰当的进样针（注意针头形状）e.废液管中产生虹吸；清空废液管谱图问题1、 问：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？答：a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板b.色谱柱塌陷；填充色谱柱c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰f.样品与填料表面的溶化点

27、发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱2、 问：造成峰分叉的原因是什么，如何消除？答：保护柱或分析柱污染；取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。样品溶剂不溶于流动相；改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。3、 问：K值增加时，拖尾更严重，这是为什么？答：反相模式，二级保留效应；a.加入三乙胺（或碱性样品）b.加入乙酸（或酸性样品）c.加入盐或缓冲剂（或离子化样品）d.更换一支柱子4、 问：保留时间的波动有几种可能的原因

28、？答：温控不当；调节好柱温。流动相组分变化；防止流动相蒸发、反应等，做梯度时尤其要注意流动相混合的均匀。色谱柱没有平衡；在每一次运行之前给予足够的时间平衡色谱柱。HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法1、样品量不足，解决办法为增加样品量2、样品未从柱子中流出。可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3、样品与检测器不匹配。根据样品化学性质调整波长或改变检测器4、检测器衰减太多。调整衰减即可5、检测器时间常数太大。解决办法为降低时间参数6、检测器池窗污染。解决办法为清洗池窗7、检测池中有气泡。解决办法为排气泡8、记录仪测压范围不当。调整电压范围即可9、流动相流量不合适，调整流速即可10 检测器与记录

29、仪超出校正曲线。解决办法为检查记录仪与检测器，重做校正曲线。为什么HPLC柱柱压过高柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。其原因有多方面，且常常不是柱子本身的问题，可按下面步骤检查问题的起因1、拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压还高，再检查；2、把色谱柱从仪器上取下来，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；3、将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。这时，如果柱压仍不下降，再继续检查；4、更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压

30、力上升。若柱压还高，请联系厂家。一般情况下，在进样器与保护柱之间接一个在线过滤器便可避免柱压过高的问题。液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反相冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换流动性好的柱子如何解决HPLC进行分析时保留时间发生漂移或急速变化？漂移现象1、温度控制不好，解决方法时采用恒温装置，保持柱温恒定2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子为平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡保留时间快速变化1、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2、泵中有气泡，可通过排气等

31、操作将气泡赶出3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内适当混合HPLC仪器问题1、HPLC泵压明显偏高的可能原因？答：流速设定过高；流动相或进样中有机械杂质，造成保护柱、柱前筛板或在线过滤器阻塞；流动相粘度过大；柱温过低；缓冲盐结晶；压力传感器故障。2、基线不稳，上下波动或漂移的原因是什么，如何解决？答：a 流动相有溶解气体；用超声波脱气15-30分钟或用氦气脱气b 单向阀堵塞；取下单向阀，用超声波在纯水中超20分钟左右，去除堵塞物c 泵密封损坏，造成压力波动；更换泵密封d 系统存在漏液点；确定漏液位置并维修e 柱后产生气泡；流通池出液口加负压调整器f 检测器没有设定在最大吸收波长处；将波长调整至最大吸收波长处h 柱平衡慢特别是流动相发生变化时；用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，用10-20倍体积新流动相对