12维生素B6注射液.docx

1、12维生素B6注射液题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码1/91 主题内容与适用范围 本标准规定了本公司维生素B6注射液的技术要求、检验方法、检验规则及更改信息。 本标准适用于本公司维生素B6注射液产品出厂检验，不适用于用户验收。英文名称：Vitamin B6 Injection本品主药成份：维生素B6分子式：C8H11 N O3HCl分子量：205.642 引用标准 中国药典2010年版二部（900页）3 技术要求表 1项 目法定标准企 业 标 准性 状无色至

2、微黄色的澄明液体鉴别鉴别（1）应符合规定HPLC法供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致pH值2.54.02.54.0颜色（标准比色液）黄色4黄色3总杂质（%） 1.00.7细菌内毒素（EU/mg）0.300.30残氧量（%） 3可见异物应符合规定应符合规定装 量应符合规定应符合规定无 菌应符合规定应符合规定不溶性微粒应符合规定应符合规定标示量（%）93.0107.094.0107.0规 格：（1）1ml：25mg（2）1ml：50mg（3）2ml:0.1g4 检验方法4.1 性状： 取本品，在自然光下观看，应为无色或微黄色澄明液体。4.2 鉴别：4.2.1 取本品0.5ml

3、（规格1ml：25mg）0.2ml(规格1ml:50mg)；（约相当于主药10mg），加水成100ml溶解后，各取1ml，分别置甲，乙两个试管中，各加20%醋酸钠溶液2ml，甲管中加水1ml，乙管中加4%硼酸溶液1ml，混匀。各迅速加氯亚氨基2，6二氯醌试液1ml；甲管中显蓝色，几分钟后即消失，并转变为红色，乙管中不显蓝色。4.2.2 在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。4.3 检查：4.3.1 pH值：按酸度仪测定规程准备仪器，待稳定后，酸度计应先用pH=4.0的标准缓冲液校正至标准值，用水冲洗擦净后，再用pH=1.68的标准缓冲液核对一次

4、，误差应不超过0.02pH单位，用水冲洗擦净后，取供试品10ml两份，放入电极，至pH读数在1分钟内变化不超过0.02pH单位为止，同法测定两份，取平均值为其pH值。应符合规定。4.3.2 色泽：取成品10支与黄色3号标准比色液比较，比色应在自然光下进行，各管受光情况应一致；比色时底衬白色采用平行观察，比较供试品与标准比色液的颜色深浅，供试品色泽应浅于或等于标准色泽。黄色标准贮备液：取比色用氯化钴液(59.5mgCoCl25H2O/ml)4.0ml，比色用重铬酸钾液(0.800mgK2Cr2O7/ml)23.3ml，加水72.7ml，摇匀，即得。黄色3号标准比色液：取黄色标准贮备液1.5ml，

5、加水8.5ml，摇匀，即得。4.3.3 有关物质：4.3.3.1色谱条件：a)色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；b)流动相：配比：甲醇：0.04戊烷磺酸钠（用冰醋酸调PH3.0）15：85；配制：称取戊烷磺酸钠0.4g，加水稀释至1000ml，用冰醋酸调PH3.0，取850ml，再加入甲醇150ml，混匀，过滤，脱气，备用。必要时可适当调节流动相比例，以满足分离需要。根据样品量的多少，必要时可按照流动相配比，同比例扩大或缩小，配制不同体积的流动相。c)波长：291nm；d)进样量：10ul。4.3.3.2供试品溶液：精密移取本品适量(若规格为1ml：25mg取1.0ml于25ml量瓶；若规格为1

6、ml：50mg及2ml：100mg取1.0ml于50ml容量瓶中)，加流动相制成每1ml含1.0mg维生素B6的溶液。4.3.3.3对照液：精取供试品溶液1.0ml，加流动相溶解并稀释至100.0ml，制成每1ml含10ug维生素B6的溶液。4.3.3.4空白： 流动相。4.3.3.5 测定：（1）按照高效液相色谱仪操作规程准备仪器，待平衡后取10ul对照液注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使维生素B6色谱峰高为满量程的10，连续进5针，计算主峰面积的RSD不得大于2.0；理论板数按维生素B6峰计算不低于4000。系统适用性试验合格后，才能进行样品分析；如不合格，则需要查找原因，及时排除，重新进

7、行系统适用性试验，合格后，才能进行样品分析。（2）分别取空白、供试品溶液10ul注入色谱仪，记录色谱图至主成分保留时间的3倍。（3）进样结束后再取对照溶液进样1针，计算前面所有对照溶液的主峰面积的RSD，不得大于2.0。（4）进样结束后用20甲醇冲洗色谱柱至少20分钟，再用甲醇冲洗并保存色谱柱。4.3.3.6 计算公式：杂质含量：式中：供试品溶液的杂质峰面积之和；对照液的主峰面积的平均值。4.3.4装量：取本品5支，开安瓶时勿使液体溢出，将内容物分别用2ml(1ml)的干燥注射器及注射针头抽尽，注入经标化的2ml(1ml)量瓶内，于室温下检视，每支注射液的装量均不得少于其标示装量。4.3.5

8、残氧量：测量前应将测氧仪针筒反复抽入空气将读数调至（20.70.2）%。按下取样管，针筒位置为0。将待测安瓶倒置于割瓶架上，在水位线以下割开，将取样管插入并提到瓶顶，用针筒抽气样，每次0.2ml，最后两次读数不变即为安瓶内残氧含量。同法操作测定5支，取其平均值即为本批残氧含量。4.3.6无菌： 批量大于500支时，每批随机取样品60支(规格为1ml)或30支(规格大于等于2ml)，用薄膜过滤法处理后进行无菌检查，样品全部通过滤膜。以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌。应符合规定。4.3.7 可见异物：除另有规定外，取供试品20支，除去容器标签，擦净容器外壁，必要时将药液转移至洁净透明的专用玻璃容器内；

9、置供试品于遮光板边缘处，在明视距离（指供试品至人眼的清晰观测距离，通常为25cm），分别在黑色和白色背景下，手持供试品颈部轻轻旋转和翻转容器使药液中存在的可见异物悬浮（注意不使药液产生气泡），轻轻翻摇后即用目检视，重复3次，总时限为20秒。供试品装量每支在10ml及10ml以下的，每次检查可手持2支。无色注射液的检查，光照度应为10001500lx；有色溶液注射液的检查，光照度应为20003000lx。不得检出金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过2mm的纤维和块状物等明显外来的可见异物，在静置一定时间后轻轻旋转时不得检出烟雾状微粒柱。其它微细可见异物（如点状物、2mm以下的短纤维及块状物等）如仅

10、有一支检出，应另取20支同法复试，均不得检出。4.3.8不溶性微粒：在层流净化台上，小心合并至少3个供试品的内容物（使总体积不少于25ml），置于取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气，置于取样器上。开启搅拌，使溶液均匀（避免气泡产生），依法测定至少4次，每次取样应不少于5ml。第一次数据不计，取后续测定结果的平均值，计算每个容器所含的微粒数（测定值标示装量ml/5ml）。除另有规定外，每个供试品容器中含10um及以上的微粒不得过6000粒，含25um及25um以上的微粒不得过600粒。应符合规定。4.4含量：4.4.1 a)色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；b)流动相：配比：甲醇：0.04戊烷磺酸

11、钠（用冰醋酸调PH3.0）15：85；配制：称取戊烷磺酸钠0.4g，加水稀释至1000ml，用冰醋酸调PH3.0，取850ml，再加入甲醇150ml，混匀，过滤，脱气，备用。必要时可适当调节流动相比例，以满足分离需要。根据样品量的多少，必要时可按照流动相配比，同比例扩大或缩小，配制不同体积的流动相。c)波长：291nm；d)进样量：10ul。4.4.2供试品溶液： 精取本品适量(若规格为1ml：25mg取1.0ml于25ml量瓶；若规格为1ml：50mg及2ml：100mg取1.0ml于50ml容量瓶中)，加流动相稀释制成每1ml约含1.0mg维生素B6的溶液，取5.0ml加流动相溶解并稀释至

12、50.0ml，制成每1ml含0.1mg维生素B6的溶液。每批制备2份。4.4.3对照液：称取维生素B6对照品10.0mg，精密称定，加流动相溶解并稀释至100.0ml，为1对照液。同法配制一份为2对照液。4.4.4 测定：（1）按照高效液相色谱仪操作规程准备仪器，待平衡后取10ul1对照液注入液相色谱仪，理论板数按维生素B6峰计算不低于4000。连续进5针，主峰面积的RSD不得大于2.0，系统适用性试验合格后，才能进行样品分析；如不合格，则需要查找原因，及时排除，重新进行系统适用性试验，合格后，才能进行样品分析。（2）取2#对照液10l连续进样2次，记录色谱图，按外标法的公式计算含量，以两次含

13、量的平均值计算回收率，回收率应在99.0101.0范围之内，方可进行样品含量计算。（3）取供试品溶液进10ul，每份样品进一针，记录色谱图。按外标法以峰面积计算。（4）连续进样3个小时或间隔4批样品后，重新取1对照液进样2针，用两者的平均峰面积计算后续样品的含量；并计算前面所有1对照液主峰面积的RSD，RSD应不大于2.0%。 （5）进样结束后再取1对照液进样1针，计算前面所有1对照液的峰面积的RSD，不得大于2.0。取样品液10ul注入色谱仪，每批平行进2针，按（6）进样结束后用20甲醇冲洗色谱柱至少20分钟，再用甲醇冲洗并保存色谱柱。4.4.5计算公式：标示量 (%)100% 式中： W对

14、对照品的称重，mg； P对照品的含量；A供试品溶液中维生素B6的峰面积；对照液中维生素B6的峰面积的平均值。编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码2/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围：

15、 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码3/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码4/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失

16、效日期 2015-9-30复 印 数15页 码5/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码6/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复

17、 印 数15页 码7/9编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码8/94.5 细菌内毒素检查4.5.1细菌内毒素限值：每1mg维生素B6中含内毒素的量应小于0.30EU（即L0.30EU/mg）。4.5.2 若样品规格C为0.1g/2ml时,样品溶液的最大有效稀释倍数的计算（以鲎试剂灵敏度0.125EU/ml为例）：CL 0.1/210000.30 MVD=

18、 -= - =120(倍) 0.125 4.5.3 样品溶液的和内毒素工作标准品的稀释1. 2ml（0.1g/2ml）样液+1.8ml检查用水10倍稀释样液0.5ml（10倍稀释）样液+2.5ml检查用水60倍稀释样液1.0ml（60倍稀释）样液+1.0ml检查用水120倍稀释样液用细菌内毒素检查用水或60倍稀释样液将细菌内毒素工作标准品稀释至含内毒素2.0浓度。4.5.4 检查法 取120倍稀释样液，用凝胶法对样品进行细菌内毒素检查，同时做供试品阳性对照、阳性对照、阴性对照。样品及对照均平行做两支管。操作完毕后，于371恒温器中，保温60分钟2分钟后观察结果，应符合规定。5 检验规则5.1

19、成品取样凭车间请验单，按现行版抽样管理标准取样检验。5.2 质检部化验员按本标准进行检验，经三级复查后发出检验报告书，同时按规定留存样品，在留样袋上注明品名、批号、日期，保存备查。编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门： 题目：维生素B6注射液 文 件 号原文件号颁发部门：QA 生效日期 2010-10-1分发范围： 301车间、QA、QC 失效日期 2015-9-30复 印 数15页 码9/95.3 检验中发现同一批样品质量不均匀，化验员应按质量最低的结果写出报告书。5.4 “可见异物”检查项，由QA驻车间的现场检查员检查，并将结果以小报告形式给QC制剂组，由QC统一发大报告。6 更改信息：6.1 更改理由：到期换版6.2 更改历史：版本更改内容执行日期QJ/XH0204012C增加“不溶性微粒”检查项目；“澄明度”检查更改为“可见异物检查”2005-7-1QJ/XH0204012D-2010-7-1QJ/XH0204012E增加“细菌内毒素”“颜色”的检查；2010-10-1编 写 人签名/日期： 部 门： QC审 核 人部 门 QCQA 签名/日期批 准 人签名/日期： 部 门：