急性毒性试验LD50的测定.docx

1、急性毒性试验LD50的测定急性毒性试验 -LD50 的测定开放性实验总结报告学生姓名 班级 学号所在院系 专业开放实验室名称日期 2013-5-5北京理工大学实验室设备处 制一、实验项目概况开放实验题目： 实验动物的基本操作及其相关技术 实验题目类型： 参与科研 科技活动 自选实验 素质培养 指导教师及实验技术人员姓名： 李岩 实验项目起止日期： 2013-4-5 至 2013-5-5利用何种时间段开展实验：课余时间 开展实验的累计总学时数： 32 学时 实验项目基本原理：急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步，与其它毒性实验相比具有简单、 经济、易行等特点。因此新药研究开发时往往通过该项

2、试验，尽可能多的了解一些新药 的毒理学特点，为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。通常测 定药物 ED50 及 LD50 以初步估计药物毒性大小。实验项目的实验方法概述： 给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠， 并观察记录各组别小鼠的行为 变化，通过比较不同组别小鼠出现死亡的数量来计算 LD50 。实验项目的仪器设备组成情况：天平，1000ul 的移液枪， 200l 移液枪， 2ml 离心管， 1ml 注射器，手术器械 （包 实验项目的消耗材料明细：乳胶手套， KM 小鼠 ,封口膜实验项目的主要结论：戊巴比妥钠的半数致死量为 134.32mg/kg用 Bliss 法

3、计 算 半 数 致 死 量 ， 回 归 方 程 y(Probit)=-24.916+14.058Log(D)半数致死量 LD50=134.32mg/kg 二、实验项目技术报告1实验原理戊巴比妥钠属于巴比妥类镇静催眠药， 对中枢神经系统有普遍性抑 制作用，可起到镇静、催眠、抗惊厥作用。一定剂量的戊巴比妥钠引起 一般实验动物死亡。半数致死量（ LD50 ）,即在一群实验动物中，能使 实验动物一半死亡的药量，其值越大越好。2实验内容（1） 探测戊巴比妥钠 LD50 的剂量范围。（2） 确定组数并计算各组剂量。（3）正式实验：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并 观察记录各组别小鼠的行为变

4、化及死亡情况。（4）记录实验结果，并计算 LD50 。3实验方法：1、预试溶液配制和样品处理（预实验）（1）探索剂量范围：取小鼠 9 到 12 只，以 3 只为一组，分成 3 到 4 组，包括组距较大的一系 列剂量，按组分别腹腔注射戊巴比妥钠溶液，观察出现的症状并记录动物 死亡数，找出引起 0 及 100% 有效剂量的所在范围，此即上下限剂量 Dn 和 Dm 。(2) ：确定组数并计算各组剂量1确定组数 G：根据适宜的组距确定组数，一般分为 5 到 8 个剂 量，这里我们分为 5 组，按等比级数增减2 计算各组剂量：在找出 Dm、Dn 和确定组数后，课按下列公式求 出公比 r. 再按公比计 算

5、各组剂量 Dl-Dm, 其中 D1=Dn= 最小剂量。3 配置等比药液系列，让每只小鼠给药量相等，一般为 0.1ml/10g体重经过预实验的五个剂量浓度分别是 77 、96 、120 、150 、190mg/kg, 相应浓度： 0.77 、 0.96 、1.2 、1.5 、1.9% ，在随后的急性毒实验中对这 些剂量进行验证2、急性毒性试验：昆明种小鼠共 15 只，实验前一天晚禁食不禁水，实验当天称重，标 记，随机分组。给 5 组小鼠分别按 77、96、120 、150 、190mg/kg, 腹腔 注射，给药后观察动物死亡情况。记录小鼠死亡时间，死亡数目。利用 Bliss 法计算 LD50 。

6、分组动物数剂量对数剂量动物死亡死亡率(N)（mg/kg ）(X)数(n)（P=n/N ）13771.890023961.9800331202.08133.3431502.18266.7531902.283100表 1 药物对小白鼠产生效应情况【实验结果】： LD50的测定 依据药物剂量依次给药。利用 Bliss 法计算 LD50样品名称戊巴比妥钠 实验动物昆明小鼠 给药途径腹腔注射 实验日期 2013.5.5用 Bliss 法 计算半数致死量剂量 对数剂量 动物数 死 亡数 死亡百分率 实验机率单位 回归 机率单位(x) (只) (只)(%)(Y)(Y)771.8865300.00 1.603

7、1961.9823300.00 2.94951202.07923133.004.56974.31191502.17613267.005.43035.67421902.2788331E27.1173回归方程 y(Probit)=-24.916+14.058Log(D)半数致死量 LD50=134.32mg/kgLD50(Feiller 校正 )95% 的 可 信限 =92.405-205.57mg/kgLD5=102.59mg/kgLD95=175.85mg/kg三、参加开放性实验的体会与建议四、评价与认定导教师评价意见与成绩评定：实验态度积极认真，并且能够较好的完成实验包含的内容。试验后积极思考老师提出的问题。成绩：指导教师签字： 年 月 日院系主管领导审核与学分评定意见：同意核准该生选修学分数 分院系主管签字： 年 月日学校主管部门审批意见：部门签章： 年 月 日备注：