各种培养基配方文档格式.docx

1、无水氯化钙0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水1000mL，溶解后备用。7豆芽汁液体培养基豆芽汁10mL，磷酸氢二铵1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂20g。将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调pH至6.26.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色5.26.8紫色）作为指示剂，115灭菌20min。豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽200g洗净，在1000mL中煮沸30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。8麦芽汁琼脂培养基优质大麦或小麦

2、，蒸馏水，碘液。取优质大麦或小麦若干，浸泡612h，置于深约2cm的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。称取300g麦芽磨碎，加1000mL水，38保温2h，再升温至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化11.5h。取糖化液少许，加碘液12滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至10倍，调pH56，用于酵母菌培养；稀释至56倍，调pH7.2，可用于培养细菌，121灭

3、菌20min。9查（察）氏培养基NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，琼脂1520g，蒸馏水1000mL，pH值自然。加热溶解，分装后121灭菌20min。10马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂20g，水1000mL。pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取200g加入1000mL蒸馏水，煮沸20min，用纱布过滤，滤液补足水至1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121灭菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL

4、培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。11PY基础培养基蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 （Trypticase） 0.5g，盐溶液 4.0mL，蒸馏水1000mL。盐溶液成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水1000mL。12甘露醇琼脂培养基（MSA）牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL 75g，琼脂约13g，酚红0.025g，水1000mL，pH7.27.6按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全

5、溶解，调pH至7.40.2。加1%的酚红溶液2.5mL，混匀。121高压灭菌15min13高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。14淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）可溶性淀粉10g，（NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌20min。若加入15

6、20g琼脂即成固体培养基。15麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）葡萄糖1.0g，KCL 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸钠8.2g，琼脂15g，蒸馏水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2灭菌30min。16高盐察氏培养基（用于霉菌和酵母菌计数、分离用）硝酸钠2g，磷酸二氢钾1g，硫酸镁（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁0.01g，氯化钠60g，蔗糖30g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，115灭菌30min。注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。17糖、醇类发酵基础培养基（1）一般细菌

7、常以休和利夫森二氏培养基蛋白胨5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇（葡萄糖或其它糖、醇）10g，琼脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝）3mL，蒸馏水1000mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约4.5cm，115灭菌20min。（2）芽孢菌培养基（NH4）2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏0.2g，琼脂56g，糖或醇类10.0g，蒸馏水1000mL，溴甲酚紫（0.04）15mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约45cm，112灭菌30min。（3）乳酸菌培养基蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐温80（Tween 8

8、0）0.5mL，糖或醇10g，琼脂56 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入1.6溴甲酚紫溶液约1.4mL。以上调pH6.87.0，分装试管，112灭菌30min。18硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）蛋白胨5.0g，KNO3 0.2g, 蒸馏水1000 mL，pH7.4，每管分装45mL，121灭菌1520min。吲哚实验培养基：1胰蛋白胨，调pH7.27.6，分装1/31/4试管，115灭菌30min。19硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨10g，NaCL 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸馏水1000mL，pH7.07.4，分装试管，每管液层高度45cm，112灭菌2030min。另

9、外将普通滤纸剪成0.51cm宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用510的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。20尿素培养基（尿酶试验）蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，NaCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4酚红3.0mL，琼脂20.0g，20尿素100.0mL，pH7.17.4。将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶，121灭菌15min，冷却至5055，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。21氮源利用基础培养基KH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO4 7H2O 0.2g

10、，FeSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸馏水1000mL。将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度为0.050.1，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度为0.20.5），另做一份不加氮源的空白对照，调pH7.07.2，分装于试管，每管45mL，112灭菌2030min，制备出的培养基要求无沉淀。22甲基红培养基（M.R及V-P试验用）蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，K2HPO4（或NaCL）5g，水1000mL，pH7.07.2，每管分装45mL，115灭菌30min。23动力、靛基质

11、、尿素（MIU）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂3 g、0.2%酚红酒精溶液2mL、尿素20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管，112灭菌15min，灭菌后液体应呈淡黄色。24半固体培养基（用于细菌的动力试验）牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，琼脂35g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，熔化后分装试管（8mL）121灭菌15min，取出直立试管待凝固。25M17琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗坏血酸0.5g，牛肉膏2.5g，MgSO4 7H2O

12、0.01g，ß-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水1000mL，121灭菌15min。26蛋白胨水溶液（靛基质试验用）蛋白胨20.0g，NaCL 5.0g，蒸馏水1000mL，pH7.4，121灭菌15min。27精氨酸双水解酶实验培养基蛋白胨1g，氯化钠5g，K2HPO4 0.3g，L-精氨酸10g，琼脂10g，酚红0.01g，蒸馏水1000mL。除酚红外，将以上各成分溶解，调节pH7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约45cm，121灭菌20min备用。28葡萄糖氧化发酵培养基蛋白胨2g，氯化钠5g，1溴百里酚蓝水溶液3mL，琼脂56g，K2HPO4 0.2g，葡萄糖1，蒸馏水

13、1000mL。除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节pH值为6.87.0，分装试管，用115灭菌20min备用。29假单胞菌选择培养基（PSA）基础成分：多价胨16g，水解酪蛋白10g，硫酸钾10g，氯化镁1.4g，琼脂11g，甘油10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1CFC选择添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/L，梭链孢酸钠10mg/L，头孢菌素50mg/L。先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121，15min条件下灭菌。冷却到50备用。当基础培养基冷却到50后加入溶解后过滤除菌的CFC补充物，完全混合后倒平板备用。30乳糖胆盐发酵培养基蛋白胨20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖10g

14、，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管10mL，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌.双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。31伊红美兰琼脂培养基蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氢二钾2g，琼脂17g，2%伊红Y溶液20mL，0.65%美兰溶液10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1。将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正pH，分装于烧瓶内，高压灭菌121，15min备用。临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至5055，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。32乳糖发酵培养基蛋白胨20g

15、，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4。将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或3mL，并放入一个小倒管，115，15min高压灭菌。33胰酪胨大豆肉汤胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠100g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL。将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后12115min高压灭菌。最终pH7.3347.5%氯化钠肉汤蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠75g，蒸馏水1000mL，pH7.4。将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，12115min高压

16、灭菌。35豆粉琼脂牛心消化汤1000mL，琼脂20g，黄豆粉浸液50mL，pH 7.47.6。将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶100mL，12115min高压灭菌。36血琼脂平板豆粉琼脂100mL，脱纤维羊血（或兔血）510mL。加热融化琼脂，冷至50，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。37aird-Parker氏琼脂平板胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸钠10g，甘氨酸12g，氯化锂（LiCL6H2O）5g，琼脂20g，蒸馏水950mL，pH7.5。增菌剂的配法：3050%卵黄盐水50mL与除菌过滤的1%亚碲

17、酸钾溶液10mL混合，保存在冰箱内。将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至25，矫正pH。分装每瓶95mL，121高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至50，每95mL加入预热至50的卵黄-亚碲酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过48h。38肉浸液绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH 7.47.6。将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正

18、pH7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，121，30min高压灭菌。39兔血浆柠檬酸钠0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O72H2O溶于1L蒸馏水中）一份加兔血9份混合后离心2000rpm，10min吸取上清液即为兔血浆。40肠毒素产毒培养基蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化钠5g，磷酸二氢钾1g，氯化钙0.1g，硫酸镁0.2g，菸酸0.01g，蒸馏水1000mL，琼脂1012g（固体透析培养用），pH7.27.4。41葡萄糖肉浸液肉汤绞碎牛肉500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，葡萄糖10g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和

19、磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，12130min高压灭菌。42牛心浸液绞碎牛心500g，氯化钠5g，蛋白胨10g，磷酸氢二钾2g，蒸馏水1000mL，pH7.47.6。将绞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH，煮沸并过滤、分装，121，30min高压灭菌。43匹克氏肉汤含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL，1：25000结晶紫盐水溶液10mL，1：800三氮化钠溶液10mL，脱纤维兔血（羊血）10mL。将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无

20、菌试管内，每管2mL，保存冰箱内备用。44胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化钠5g，琼脂约13g，蒸馏水1000mL，pH7.17.5。按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调pH值，121，15min灭菌。45缓冲蛋白胨水（BP）培养基蛋白胨l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸馏水1000mL，pH7.2。121灭菌15min，沙门氏菌前增菌使用。46氯化镁孔雀绿（MM）增菌液 甲液：胰蛋白胨5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸馏水1000m1乙液：MgCL2 40g，蒸馏水100mL丙液：0.4孔雀绿水溶液分别按

21、上述成分配好后，121灭菌15min备用。临用时取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以无菌操作混合即成。47四硫磺酸钠煌绿（TTB）增菌液多胨或胨1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸馏水1000m1。将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶100m1。分装时应随时振荡，使其中的CaCO3混匀。121灭菌15min备用。临用时每100m1培养基中加入碘溶液2m1、0.1煌绿1m1。48亚硒酸盐胱氨酸（SC）增菌液蛋白胨5g，乳糖4g，亚硒酸氢钠4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L胱氨酸0.01g，蒸馏水1000m1，pH7.0。将除亚硒酸氢钠和胱氨酸以

22、外的各种成分溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入1L-胱氨酸氢氧化钠溶液1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶l00mL。49亚硫酸铋琼脂（BS）培养基蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，FeSO4 0.3g，Na2HPO4 4g，煌绿0.025g，柠檬酸铋铵2g，Na2SO4 6g，琼脂20g， 蒸馏水1000mL，pH7.5。将前5种成分溶解于300mL蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50m1蒸馏水溶解。将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷至80左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至1000m1，校正

23、pH，加0.5煌绿水溶液5mL ；摇匀。冷却至5055，倾注平板。此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过48h不宜使用。50DHL琼脂培养基成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧胆酸钠1g，Na2S203 2.3g，柠檬酸钠1g，柠檬酸铁铵1g，中性红0.03g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH7.3。除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于400m1蒸馏水中，校正pH值。再将琼脂溶于600mL蒸馏水中，两液合并，加0.5中性红水溶液6mL，待冷至5055，倾注平板。51HE琼脂培养基月示 胨12g，牛肉膏3

24、g，乳糖12g，蔗糖g，水杨素2g，胆盐20g，NaCL 5g，琼脂20g，蒸馏水1000m1，0.4溴麝香草酚蓝溶液16mL，Andrade指示剂20mL，甲液20mL，乙液20m1。将前七种成分溶解于400mL蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正pH值为7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于600m1蒸馏水中。二者合并，待冷至5055，倾注平板。此培养基不可高压灭菌；Andrade指示剂：酸性复红0.5g，1M NaOH溶液16m1，蒸馏水100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液12mL。甲液：Na2S203 34g，柠檬酸铁铵

25、4g，蒸馏水100m1。乙液：去氧胆酸钠10g，蒸馏水100mL。52S.S.琼脂（1）基础培养基牛肉膏5g，月示 胨5g，三号胆盐3.5g，琼脂17g，蒸馏水1000mL。将牛肉膏、月示 胨和胆盐溶解于400mL蒸馏水中，将琼脂溶于500m1蒸馏水中，二液混合，121灭菌15min备用。（2）完全培养基础培养基1000mL，乳糖10g，柠檬酸钠8.5g，Na2S203 8.5g，10柠檬酸铁溶液10m1，1中性红溶液2.5m1，0.1煌绿溶液0.33m1。加热熔化基础培养基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均匀，校正pH值为7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。制好的培养基宜当日使

26、用，或保存于冰箱内于48h内使用；煌绿溶液配好后应在10d以内使用。53靛基质试验培养基蛋白胨10g，氯化钠5g，水1000mL，pH7.37.5。称取各成分，加入水中加热溶化。用1mol/L NaOH调至pH 7.47.5。分装小试管，每管约3mL，116，15min高压灭菌后410保存备用。54三糖铁琼脂（TSI）蛋白胨20g，硫代硫酸钠0.2g，乳糖10g，蒸馏水1000mL，硫酸亚铁铵0.2g，蔗糖10g，酚红0.025g，氯化钠5g，牛肉膏5g，琼脂12g，葡萄糖1g，pH7.4。将除琼脂和酚红以外的各种成分溶解于蒸馏水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5mL，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。121高压灭菌15min后放置高层斜面备用。55尿素琼脂蛋白胨1g，葡萄糖1g，0.4%酚红溶液3mL，蒸馏水1000mL，氯化钠5g，磷酸氢二钾2g，琼脂20g，20%尿素溶液100mL，pH7.20.1将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧