常用培养基.docx

1、常用培养基常用培养基配方（微生物学与微生物检验学部分）渤海大学生物与食品科学学院2006年3月目 录01糖发酵管02 ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08HughLeifson培养基(O/F试验用)09 马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12 氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14 硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15 尿素琼脂16 氰化钾(KCN)培养基17 氧化酶试验18 硝酸盐培养基19 细胞色素氧化酶试验20 过氧化氢酶试验21 过氧化物酶试验22 磷酸盐缓冲

2、液23明胶磷酸盐缓冲液24 乳酸苯酚溶液25 肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33 乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35 EC肉汤36 缓冲蛋白胨水(BP)37 氯化镁孔雀绿增菌液(MM) 38 四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB) 39 四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法) 40 亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41 GN增菌液42 肠道菌增菌肉汤43 亚硫酸铋琼脂(BS) 44 DHL琼脂45 HE琼脂46 SS琼脂47 WS琼脂48 麦康凯琼脂49 伊红美蓝琼脂(EMB) 50三糖铁琼脂(TSI) 51 三糖铁琼脂(换用方法) 52

3、 克氏双糖铁琼脂(KI) 53 克氏双糖铁琼脂(换用方法) 54 葡萄糖半固体发酵管55 5%乳糖发酵管56 CAYE培养基57 Honda氏产毒肉汤58 Elek氏培养基(毒素测定用)59 氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60 胰蛋白胨水61 Rustigian氏尿素培养液62 氯化钠结晶紫增菌液63 氯化钠蔗糖琼脂64 嗜盐菌选择性琼脂65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂66 氯化钠血琼脂67 3.5%氯化钠生化试验培养基68 改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用) 69 CIN1培养基70 嗜盐性试验培养基 71 改良Y培养基72 改良克氏双糖73 快速硫化氢(H2S)试验琼脂74 DNA酶

4、甲基绿琼脂(DTA) 75 CaryBlair氏运送培养基76 Skirrow氏培养基77 TTC琼脂78 甘氨酸培养基79 改良磷酸盐缓冲液80 氯化镁孔雀绿肉汤81 胰酪胨大豆肉汤82 BairdParker氏培养基83 7.5%氯化钠肉汤84 匹克氏肉汤85 甘露醇卵黄多粘菌素琼脂86 3.8%柠檬酸钠溶液87 酪蛋白琼脂88 木糖明胶培养基89 庖肉培养基90 卵黄琼脂培养基91亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶琼脂(SPS) 92液体硫乙醇酸盐培养基(FT) 93含铁牛奶培养基94 动力-硝酸盐培养基（A法）95 动力硝酸盐培养基(B法) 96 血清肉汤97 马丁氏肉汤98 明胶培养基99 察

5、氏培养基100 高盐察氏培养基101 马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) 102 马铃薯琼脂103 孟加拉红培养基104 玉米粉琼脂105 大米粉培养基106 亚硒酸盐煌绿增菌液107 煌绿肉汤增菌液108 肠毒素产毒培养基109 0.1%蛋白胨水稀释剂110半固体琼脂01 糖发酵管成分：牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O)2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLpH7.4制法：1葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，121高压灭菌15min。2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100mL，121高

6、压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100mL培养基内，以无菌操作分装小试管。 注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。试验方法：从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于361培养，一般观察23d。迟缓反应需观察1430d。02 ONPG培养基成分：邻硝基酚D-半乳糖昔(ONPG) 60mg(ONitrophenylDgalactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5) 10mL1%蛋白胨水(PH7.5)30mL制法：将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mm75mm试管，每管0.5mL，

7、用橡皮塞塞紧。试验方法：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于361培养13h和24h观察结果。如果半乳糖苷酶产生，则于13h变黄色，如无此酶则24h不变色。03 西蒙氏柠檬酸盐培养基成分：氯化钠5g硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法：先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min。放成斜面。试验方法：挑取少量琼脂培养物接种，于361培养4d，每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。04 缓冲葡萄

8、糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分：磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000mLpH7.0制法：溶化后校正pH，分装试管，每管1mL，121高压灭菌15min。甲基红(MR)试验：自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于361培养25d，哈夫尼亚菌则应在2225培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。甲基红试剂配法：10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中，然后加入20mL蒸馏水。VP试验：用琼脂培养物接种本培养基中，于361培养24d。哈夫尼亚菌则应在2225培养。加入6%萘酚乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL，充分振摇试管，观察结果。阳性反应立

9、刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在361下培养4h再进行观察。05克氏柠檬酸盐培养基成分：柠檬酸钠 3g葡萄糖 0.2g酵母浸膏 0.5g单盐酸半胱氨酸 0.1g磷酸二氢钾 1g氯化钠 5g0.2%酚红溶液 6mL琼脂 15g蒸馏水 1000mL制法：加热溶解，分装试管，121高压灭菌15min。放成斜面。试验方法：用琼脂培养物接种整个斜面，在361培养7d，每天观察结果。阳性者培养基变为红色。06 丙二酸钠培养基成分：酵母浸膏 1g硫酸铵 2g磷酸氢二钾 0.6g磷酸二氢钾 0.4g氯化钠 2g丙二酸钠 3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH6.8制法：先将酵母

10、浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再加入指示剂，分装试管，121高压灭菌15min。试验方法：用新鲜的琼脂培养物接种，于361培养48h，观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。07 葡葡糖铵培养基成分：氯化钠5g硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法：先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，121高压灭菌15min，放成斜面。试验方法：用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在20100之间

11、为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于361培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。08 HughLeifson培养基(O/F试验用)成分：蛋白胨 2g氯化钠 5g磷酸氢二钾 0.3g琼脂 4g葡萄糖 10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水 1000mLpH7.2制法：将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正pH至7.

12、2。加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指示剂。混匀后，分装试管，121高压灭菌15min，直立凝固备用。试验方法：从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种，同时接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面，高度约1cm，于361培养。09 马尿酸钠培养基成分：马尿酸钠1g肉浸液100mL制法：将马尿酸钠溶解于肉浸液内，分装于小试管内，并于管壁画一横线。以标志管内液面高度，高压灭菌12120min。试剂：三氯化铁(FeCl36H2O)12g，溶于2%盐酸溶液100mL中即成。试验方法：用纯培养物接种，于42培养48h，观察培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时，用蒸馏水补足至原量。经离心沉淀，吸取上清液0.8mL，加入三氯化铁试剂0.2mL，立即混合均匀，经1015min，观察结果。结果：出现恒久之沉淀物为阳性。10营养明胶成分：蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000mL