羟乙基淀粉欧洲药典Word格式.docx

1、取经干燥的本品5.0g，加新沸放冷的水溶解并稀释至100ml，即得。溶液颜色：溶液S与号标准液比较，不得更浓。pH值：取溶液S加饱和氯化钾溶液0.2ml，进行测定。应为4.57.0 吸光度：取溶液S经0.2m滤膜滤过，在400nm处的吸光度，不得过0.025。分子量（Mw）及分子量分布 （分子筛色谱）缓冲液配制：取醋酸钠54.34g加冰醋酸100ml，用水稀释至1000ml，即得。供试品储备液制备：取本品2.0g，加水溶解并加水至50ml，加入上述缓冲液10ml，加水至100ml，即得。对照溶液（a）制备：如果分子量名义值在300000以下，用中等分子量的羟乙基淀粉对照品；如果分子量名义值在3

2、00000以上，用高分子量的羟乙基淀粉对照品。取羟乙基淀粉对照品0.4g，加水10ml溶解，加上述缓冲液2.0ml，用水稀释至20ml。对照溶液（b）制备：取对照溶液（a）10.0ml，用流动相稀释至20ml，即得。对照溶液（c）制备：取对照溶液（b）10.0ml，用流动相稀释至20ml，即得。对照溶液（d）制备：取对照溶液（c）10.0ml，用流动相稀释至20ml，即得。色谱柱：固定相：羟基化聚甲基丙烯酸酯凝胶分离系统用到4根色谱柱柱长内径粒度孔径0.307.517101002012.5流动相：取上述缓冲液加水稀释至1000ml，即得。流速：0.51.0ml/min检测器：连接有恒温折光仪的

3、倍角激光散射检测器进样量：50l如何选择合适的供试品浓度：取对照品溶液（a）和（b）进样，如果通过对照品溶液（b）测得的平均分子量不超过经对照品溶液（a）测得的平均分子量的3.%，就选择对照品溶液（a）进行系统适用性试验。如果超过3.0%，取对照品溶液（c）进样，如果通过对照品溶液（c）测得的平均分子量不超过经对照品溶液（b）测得的平均分子量的3.%，就选择对照品溶液（b）进行系统适用性试验。如果超过3.0%，取对照品溶液（d）进样，如果通过对照品溶液（d）测得的平均分子量不超过经对照品溶液（c）测得的平均分子量的3.%，就选择对照品溶液（c）进行系统适用性试验。系统适用性试验平均分子量：不超

4、过羟乙基淀粉对照品标示量的5%如有需要，可稀释供试品储备液，使浓度与系统适应性试验所用的对照品溶液的浓度相近。选择合适的积分方法计算平均分子量，及10%最低值和10%最大值的质量分率。低分子量（2000100000）中分子量（100000300000）高分子量（300000900000）测得的分子量=分子量名义值15%10%最低分率10%分子量名义值1500010%最高分率300%分子量名义值500%分子量名义值C2/C6比率（气相色谱法）溶液A：取等体积的稀硫酸与水混合均匀，即得。供试品溶液制备：取本品0.18g，置5ml量瓶中，加溶液A 3.0ml，闭塞，密封，振摇使溶解，100加热4小时

5、，并时时振摇，冷却至室温，加碳酸钡0.9g，轻轻振摇，9000g离心15分钟，用pH试纸检查上清液pH值，如溶液仍显酸性，再取碳酸钡0.2g，分次加入，直至溶液显中性，用0.45m滤膜滤过，取滤液0.5ml置自动进样瓶中，40蒸干，残渣加嘧啶0.5ml，N,O-2（三甲基硅烷基）乙酰胺0.25ml，和三甲基氯硅烷25l，密封，40加热1小时，并时时振摇。冷却至室温，每瓶进样3次。同时制备双份样品。对照品溶液制备：取中分子量的羟乙基淀粉对照品，同法制备，即得。 规格：长15m 直径0.32mm聚（乙烷）硅氧烷（膜厚0.25m）载气：氢气（69kPa） 分流比：1:20 温度：时间（min）温度（

6、）柱进样口检测器011252528150150270270250300FID 进样量：1l峰检出：通过对照品溶液色谱图检出以下物质：衍生物1、衍生物2、衍生物3、2-O-羟乙基-D-葡萄糖、6-O-羟乙基-D-葡萄糖、2-O-羟乙基-D-葡萄糖和6-O-羟乙基-D-葡萄糖。系统适用性试验：对照品溶液进样分离度：2-O-羟乙基-D-葡萄糖和6-O-羟乙基-D-葡萄糖分离度应不小于1.5。对称因子：衍生物1峰的对称因子应为0.61.5重复性：衍生物1连续进样3次，峰面积RSD不得过5.0%C2/C6比率计算公式： A1=衍生物1峰面积 A2=衍生物2峰面积 A3=衍生物3峰面积A4=2-O-羟乙基

7、-D-葡萄糖峰面积 A5=2-O-羟乙基-D-葡萄糖峰面积A6=6-O-羟乙基-D-葡萄糖峰面积 A7=6-O-羟乙基-D-葡萄糖峰面积测定两个供试品，求其平均值。（两个供试品求出的比率值相对平均偏差不得过5.0%）限度：不得过名义值的20%取代基摩尔数（MS） （气相色谱法）羟乙基取代基的含量应在氢碘酸水解和碘乙烷羟乙基化完成后测定。内标溶液制备：取甲苯1.0ml，加二甲苯稀释至200ml，即得。供试品溶液：取本品50.0mg，置5ml量瓶中，加入己二酸0.100.15g，加入内标溶液1.0ml，氢碘酸2.0ml，闭塞，用开有圆孔的铝盖密封，同时制备5个样品。取5ml量瓶7个，各加入己二酸0

8、.100.15g，加入内标溶液1.0ml，氢碘酸2.0ml，闭塞，用开有圆孔的铝盖密封，用感量为0.01mg的天平称定重量。用100l注射器，刺破瓶塞，分别加入碘乙烷10mg、20mg、30mg、40mg、50mg、60mg和70mg，再称定重量，计算出加入碘乙烷的量。150加热10小时，放冷，称定重量，精确到1mg，去除减失重量超过5mg的样品，取供试品4瓶，对照品5瓶分别量取溶液上层各100l，置自动进样瓶中，加二甲苯1.0ml稀释，立即密封，轻轻振摇。 材质：熔融石英规格：长30m 直径：0.53mm聚（键和硅胶）（苯基）乙烷硅氧烷 （膜厚3m）氦气 流速：8ml/min 分流比：044

9、1616205050230230200280FID 1l；每个样品进样2次出峰顺序：碘乙烷、甲苯碘乙烷和甲苯应不小于1.5计算每张色谱图中，碘乙烷和内标的峰面积的比值。求出对照品溶液碘甲烷加入量（mg）和峰面积的线性回归方程，相关系数不得低于0.990。通过如下公式计算供试品中碘乙烷的含量（mg）：A=供试品溶液中碘甲烷和内标的峰面积的比值B=回归曲线的y轴截距 M=回归曲线的斜率通过下面公式计算环氧乙烷的百分含量：m=供试品取样量（mg） 44.05=环氧乙烷分子量 155.97=碘乙烷分子量通过下面公式计算取代基摩尔数（MS）：162.14=无水葡萄糖分子量 44.05=环氧乙烷分子量通过

10、4个供试品样品计算取代基摩尔数（MS）的平均值应为0.052.4，且小于名义值的8.0%乙二醇 （液相色谱法）取经干燥后的本品1.0g，加水溶解并稀释至50ml，即得。取乙二醇0.800g，加水稀释至100ml，精密量取2.0ml稀释至200ml，混匀，精密量取2.0ml稀释至200ml，即得。预柱：长0.01m 直径4.0mm十八烷基键合硅胶（5m）长0.25m 直径：4.6mm 柱温：30 流动相：水 流速：1.0ml/min洗柱溶液：取2mol/L氢氧化钠溶液750ml加水稀释至1000ml。洗柱溶液流速：0.2ml/min脉冲电流计检测器20l运行时间：乙二醇保留时间的2.5倍 保留时

11、间：乙二醇=约4分钟信噪比：以主峰计，不得小于10连续6次进样的RSD不得大于10.0%最多完成8次进样，用以下程序冲柱一次冲洗液：乙腈-水（20:80 V/V）流动相（%）冲洗液（%）0151520202525303010075750010025251001000乙二醇：不得大于对照品溶液中乙二醇的峰面积（40ppm）2-氯乙醇 （气相色谱法）混合溶剂：甲醇-乙腈（25:75 V/V）取2,6-二甲基苯胺0.250g加混合溶剂溶解并稀释至50ml，取0.5ml加混合溶剂稀释至50ml，即得。取本品1.0g，置20ml量瓶中，加混合溶剂10.0ml，超声处理3.5小时，冷却至室温，取1.0ml

12、，加内标溶液0.8ml，即得。取2-氯乙醇0.250g，加水稀释至50ml，取1.0ml加水稀释至100ml，再取1.0ml加水稀释至100ml，混匀，取1.0ml，加内标溶液0.8ml，即得。长10ml 直径0.53mm活化聚乙二醇长30m 直径0.32mm聚乙二醇20000（膜厚0.25m）氢气 流速：2.9ml/min分流比：执行以下程序分流/不分流分流比初始0.010.5onoff423.523.528.545452402401l 以2-氯乙醇峰计，不得小于10 2-氯乙醇：供试品溶液中2-氯乙醇峰面积与内标峰面积的比值不得大于对照品溶液中2-氯乙醇峰面积与内标峰面积的比值。（5ppm

13、）环氧乙烷 （顶空-气相色谱法）取本品1.0g置顶空瓶中，加水1.0ml溶解，密封，即得。对照品储备液制备：取水80ml，置100ml量瓶中，4放置至少30min。加入环氧乙烷1.0g，精密称定加入环氧乙烷的量，加水至100ml，冰箱中储存，4周内可用。对照品溶液（a）制备：取对照品储备液1.0ml，加水稀释至100ml，摇匀，取1.0ml加水稀释至100ml，即得，24小时内可用。对照品溶液（b）制备：取本品1.0g，加对照品溶液（a）1.0ml，密封，即得。石英 规格：聚（键合硅胶）（苯基）（二甲基）硅氧烷 （膜厚1.5m）氦气（110.3kPa） 分流比：35顶空条件：平衡温度：80 平

14、衡时间：40min传输线温度：150 充压时间：2.0min 进样时间：3s020203030404040240140选择供试品和对照品溶液（b）合适的进样体积以对照品溶液（b）中环氧乙烷峰计不得小于10环氧乙烷：供试品溶液中环氧乙烷峰面积不得大于对照品溶液（b）中环氧乙烷峰面积的0.5倍。（1ppm）氯化钠 不得过0.1%取本品10.0g置250ml锥形瓶中，加水100ml溶解，加稀硝酸2ml，9g/L氯化钠溶液5.0ml，混匀，即得。在250ml锥形瓶中，加水100ml，加稀硝酸2ml，9g/L氯化钠溶液5.0ml，混匀，即得。电位滴定：0.1mol/L硝酸银滴定液通过下面公式计算氯化钠百分含量：n1=供试品溶液消耗0.1mol/L硝酸银滴定液的体积（ml）n2=对照品溶液消耗0.1mol/L硝酸银滴定液的体积（ml）m=供试品取样量重金属 不得过10ppm取本品2g，加水溶解并稀释至20ml，取12ml进行试验。取标准铅试液（1ppm Pb）制备对照溶液。干燥失重 不得过15.0%取本品1.000g，105下干燥。细菌内毒素 不得过2.5IU/g微生物限度 总需氧微生物数：验收准则 102CFU/g