BJS01食品中西布曲明等化合物的测定Word下载.docx

1、5.1.1 固体试样：取适量混匀，研细，称取粉末1.0g（精确至0.01 g），精密称定，置具塞试管中，精密加入甲醇10mL，密塞，称重，超声提取10min，放冷，再次称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（4.2）过滤，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至线性范围内，备用。5.1.2 液体试样：取适量摇匀，吸取1.0mL，置具塞试管中，精密加入甲醇9mL，密塞，称重，超声提取10min，放冷，再次称重，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用微孔滤膜（4.2）过滤，取续滤液，根据实际浓度适当稀释至线性范围内，备用。5.2 仪器参考条件5.2.1 色谱条件a） 色谱柱：Waters CORTECS T

2、3 （2.1100 mm, 2.7m），或性能相当者。b）流动相：A为含0.1%甲酸水溶液，B为含0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱程序见表1。c）流速：300L/min。d） 柱温：30柱。e） 进样量：1L。表1 梯度洗脱程序表时间/min流动相A/%流动相B/%955222982727.532注：在有共流出成分影响目标化合物检测时，可以适当调节流动相比例，使尽可能与干扰成分分离，减少干扰。5.2.2 质谱条件a） 离子源：电喷雾离子源（ESI源）。b） 扫描方式：多反应监测（MRM）。c） 干燥气、雾化气、鞘气、碰撞气等均为高纯氮气或其他合适气体，使用前应调节相应参数使质谱灵敏度达到检测要求

3、，毛细管电压、干燥气温度、鞘气温度、鞘气流量、喷嘴电压、碰撞能量、碎裂电压等参数应优化至最佳灵敏度，监测离子对和定量离子对等信息详见附录B。（1）方法提供的监测离子对等测定条件为推荐条件，各实验室可根据所配置仪器的具体情况作适当调整；在样品基质有测定干扰的情况下，可选用其他监测离子对。（2）为提高检测灵敏度，可根据保留时间分段监测各化合物。5.3 定性测定按照高效液相色谱-串联质谱条件测定试样和标准工作溶液，记录试样和标准溶液中各化合物的色谱保留时间，以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子对的相对丰度，记录浓度相当的试样与标准工作溶液中相应成分的相对离子丰度。当试样中检出与33种化合物中某标

4、准品质量色谱峰保留时间一致的色谱峰（变化范围在2.5%之内），并且相对离子丰度允许偏差不超过表2规定的范围，可以确定试样中检出相应化合物。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%502050102010允许的相对偏差/%2025305.4定量测定5.4.1标准曲线的制作将混合标准工作溶液（3.11）分别按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到相应的标准溶液的色谱峰面积。以混合标准工作溶液的浓度为横坐标，以色谱峰的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。标准品提取离子色谱图参见附录C。5.4.2试样溶液的测定将试样溶液（5.1）按仪器参考条件（5.2）进行测定，得到相应的样品溶液的色谱峰面

5、积。根据标准曲线得到待测液中组分的浓度，平行测定次数不少于两次。如基质复杂情况（如固体冲饮品等），可采用基质混合标准工作溶液绘制标准曲线，以降低基质影响。6 结果计算将液相色谱-质谱测得浓度代入下式计算含量：（1）式中：X 试样中各待测物的含量，单位为微克每千克（g/kg）；c 从标准曲线中读出的供试品溶液中各待测物的浓度，单位为纳克每毫升（g /L）；V 样液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 试样溶液所代表的质量，单位为克（g）；K 稀释倍数； 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。7 检测方法的灵敏度、精密度和专属性7.1 灵敏度当取样量为

6、1.0g或1.0mL，定容体积为10mL时，本方法中各化合物的测定低限如下：苯丙醇胺、去甲伪麻黄碱、麻黄碱、伪麻黄碱、甲基麻黄碱、安非他明、甲基安非他明、咖啡因、分特拉明、氯卡色林、安非他酮、芬氟拉明、N,N-双去甲基西布曲明、氟西汀、酚酞、N-单去甲基西布曲明、吲达帕胺、西布曲明、苄基西布曲明、豪莫西布曲明、比沙可啶、氯代西布曲明、苯扎贝特、布美他尼、洛伐他汀、辛伐他汀、利莫那班、非诺贝特、奥利司他检测限为5g/kg或5g/L，定量限为10 g/kg或10g/L；氯噻嗪、氢氯噻嗪、普伐他汀、呋塞米检测限为25g/kg或25g/L ，定量限为50g/kg或50g/L。固体冲饮品（咖啡、奶茶、茶

7、叶等）基质中，奥利司他仅作定性检测，检测限为100g/kg。7.2精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。7.3 专属性取空白溶液（3.12）进样测定，应无干扰。附录A西布曲明等33种化合物相关信息表A.1 33种化合物中文名称、英文名称、CAS号、分子式、相对分子质量、结构式序号中文名称英文名称CAS号分子式分子量结构式1苯丙醇胺Phenylpropanolamine37577-28-9C9H13NO151.21去甲伪麻黄碱Norpseudoephedrine 37577-07-43麻黄碱Ephedrine 299-42-3C10H15NO165.23

8、4伪麻黄碱Pseudoephedrine 321-97-1甲基麻黄碱Methylephedrine552-79-4C11H17NO179.266安非他明Amphetamine300-62-9C9H13N135.217氯噻嗪Chlorothiazide58-94-6C7H6ClN3O4S2295.728氢氯噻嗪Hydrochlorothiazide58-93-5C7H8ClN3O4S2297.749甲基安非他明Methylamphetamine4846-07-5C10H15N149.2310咖啡因Caffeine58-08-2C8H10N4O2194.1911分特拉明Phentermine122

9、-09-812氯卡色林Lorcaserin616202-92-7C11H14ClN195.6913安非他酮Bupropion34841-39-9C13H18ClNO239.7414芬氟拉明Fenfluramine458-24-2C12H16F3N231.2615普伐他汀Pravastatin81093-37-0C23H36O7424.5316呋塞米Furosemide54-31-9C12H11ClN2O5S330.7417N,N-双去甲基西布曲明N-Didesmethyl Sibutramine84467-54-9C15H22ClN 251.7918氟西汀Fluoxetine54910-89-

10、3C17H18F3NO309.3319酚酞Phenolphthalein77-09-8C20H14O4318.32N-单去甲基西布曲明N-monodesmethyl sibutramine 168835-59-4C16H25ClN266.8321吲达帕胺Indapamide26807-65-8C16H16ClN3O3S365.83西布曲明Sibutramine106650-56-0C17H26ClN279.8523苄基西布曲明11-Desisobutyl-11-benzyl Sibutramine1446140-91-5C20H24ClN313.8624豪莫西布曲明Homosibutramin

11、e935888-80-5C18H28ClN293.87比沙可啶Bisacodyl603-50-9C22H19NO4361.3926氯代西布曲明Chloro Sibutramine766462-77-5C17H25Cl2N314.29苯扎贝特Bezafibrate41859-67-0C19H20ClNO4361.8228布美他尼Bumetanide28395-03-1C17H20N2O5S364.4229洛伐他汀Lovastatin75330-75-5C24H36O5404.54辛伐他汀Simvastatin79902-63-9C25H38O5418.5731利莫那班Rimonabant1682

12、73-06-1C22H21Cl3N4O463.79非诺贝特Fenofibrate49562-28-9C20H21ClO4360.8333奥利司他Orlistat96829-58- 2C29H53NO5495.73附录B质谱参考条件a）离子源：电喷雾离子源（ESI）；b）检测方式：多反应监测 （MRM）；c）扫描方式：正离子模式和负离子模式；d）毛细管电压：正离子模式，4000V；负离子模式，3500V；e）离子源温度：200 ； f）干燥气流量：12L/min；g）雾化气压力：25psi；h）鞘气温度：250 ；鞘气（N2）流量：10L/min；i）喷嘴电压：正离子模式，500V；负离子模式，

13、2000V；j）其他质谱参数见表B.1。表B.1西布曲明等33种化合物定性、定量离子和质谱分析参数参考值化合物名称电离方式母离子 （ m/z）子离子 （m/z）碰撞能量（V）保留时间（min）ESI+152.1134.1*2.52117.1134.0*2.81117.0166.1148.0*3.64116.93.97180.1162.1*4.50147.0ESI-293.9214.0*374.75178.749136.191.0*5.23119.0296.0268.8*5.89204.9150.16.82195.1138.0*7.46110.17.74133.0196.1128.9*9.761

14、44.1240.1184.0*10.08131.0232.1158.9*10.51187.0423.2303.1*11.81321.2329.0284.9*11.98205.0366.1132.1*12.3853319.1225.1*12.50140.945252.2124.9*12.52138.9310.144.2*12.68148.0266.212.69362.1183.9*12.73226.0280.212.91314.213.23124.9294.24113.26159.0*13.53172.8138.9*13.82316.1365.1240.0*14.01184.1405.3285.1*17.18199.1419.3285.0*17.97463.1362.8*18.0484.1361.1233.0*18.86496.4319.2*22.62337.1* 定量离子对。附录C标准色谱图图C.1 负离子模式4种化合物标准品的提取离子（定量）色谱图图C.2 正离子模式29种化合物标准品的提取离子（定量）色谱图本方法负责起草单位：上海市食品药品检验所。验证单位：中国食品药品检定研究院、大连市食品检验所、山东省食品药品检验研究院、南京市食品药品监督检验院、上海市松江食品药品检验所、上海市崇明食品药品检验所。主要起草人：胡青、孙健、勇艳华、张玲、曹美萍、石峰。