1、新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试,符合要求后使用。成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试,根据测试结果及时填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。5。1物理指标控制。1.测试2025的值1.2琼脂层厚度;色泽;透明度和(或)是否存在肉眼可见杂质;凝胶稳定性、粘稠度和湿度。微生物学指标控制可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法(详见表1表)对培养基性能进行测试,具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南”。5.。微生物污染的控制从每批制备好的培养基中选取至少一个(或%)平板或试管,置于3或按特定标准中规定的温度培养1。2生长特性2.2。1生长率
2、作业 指 导 书编号:HSCC/GC-76009 1第2 页 共 6 页 将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中,每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值。2。21。1定量方法生长率PR的计算: NONS:从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。0:从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数(该菌落总数应00c )。要求:非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.7,该类培养基应易于目标菌生长;选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0。1;每平板(或每试管)的接种水平为101FU。5.2。.1.2 半定量方法半定量方法采用生态测量技术在平板上划线,平板板连续划线区
3、域得分的总和即为生长指数,G值不应超过标准规定的允许范围。22。1。3 定性方法定性方法采用划线法观察。2。2选择性将浓度为104FU/mL106CFU/L的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中,培养基的选择性应达到规定值。定量方法选择因子F: SF = DO -DSDO:能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度DS:能在测试培养基上显示生长的最高稀释度非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2 ;半定量和定量法中,非目标菌应部分或全部被抑制.52.3生理生化特性(选择性和特异性)规定培养基的基本特性,使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性(菌落形态、大小等)
4、和非目标菌的被抑制程度进行测试。5.3性能评价和结果解释按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定,则该批培养基品质优良;若只有物理指标和微生物指标符合规定,则该批培养基可被接收。表1 计数用选择性培养基培养基用途培养条件测试菌株参考培养基控制方法判定标准特征反应id-PrkeS生长率374金黄色葡萄球菌ATCC8/592TSA定量R0.5黑色/灰色菌落,周围为一混浊带,其外有透明带选择性3748h大肠杆菌AC292879-定性全部抑制特异性372448h表皮葡萄球菌ATC1222黑色/灰色菌落,周围为一混浊带,其外无透明带MPS3028h腊样芽胞杆菌ATC18PR07具沉淀带的粉色菌落748
5、大肠杆菌ATC25922-348h枯草芽胞杆菌C6633不具沉淀带的粉色菌落作 业 指 导 书HSCDCG76-200 1/0第 页 共 6页 表1计数用选择性培养基(续)RBG(结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂)374h大肠杆菌ATC2522/839TSPR0.5带有或不带沉淀带的粉红色或红色菌落鼠伤寒沙门菌ATC408370粪链球菌C29212/1933VRBL(紫红胆汁乳糖)302h大肠杆菌ATCC2592/739R.5带有或不带沉淀带的淡紫色菌落30h粪链球菌ATCC922/9330h铜绿假单胞菌ATCC53-无色至浅棕色菌落CTSMAC(改良山梨醇麦康凯琼脂)724大肠杆菌O17:7ATC
6、C4894/3895SA透明菌落,表面淡黄棕色,菌落直径约1m金黄色葡萄球菌ATC65/25974h大肠杆菌ATC177525922粉色菌落BGBB(煌绿乳糖胆盐肉汤)L30244h大肠杆菌ATCC592/79TA半定量浊度2,导管1/3产气产气并浑浊弗氏柠檬酸杆菌ATCC59/839粪链球菌ATC29129不生长L4448大肠杆菌ATCC25922浊度2+,导气管1/产气42448h铜绿假单胞菌TC273bEC-MUG/LS-MU448h大肠杆菌ATCC292浊度2,导气管1/3产气产气并浑浊,产生荧光4448h铜绿假单胞菌ATCC275b乳糖胆盐发酵培养34h大肠杆菌ATCC5922导气管
7、13产气产气并变黄色724h鼠伤寒沙门菌AC14028不产气、仍为紫色LST(月桂酸肉汤)372h大肠杆菌AC292导气管/产气福氏志贺氏菌CC515表2 计数用非选择性培养基P(平板计数琼脂)307h大肠杆菌ATC592/73PR0。7金黄色葡萄球菌CC658枯草芽孢杆菌AC6633作 业 指导书SDC/G-7609 第 4 页 共 6 页 表 选择性增菌培养基EE3724h大肠杆菌ATC2592/73RB上10CF粉红至红色菌落,有或没有沉淀带鼠伤寒沙门菌ATC14028粪肠球菌ATC2912RVS41。5h鼠伤寒沙门菌ATC14028XL或其他选择性培养基上CU肠炎沙门氏菌TCC176铜
8、绿假单胞菌ATCC78531.54大肠杆菌ATCC2592TSA上全抑制粪链球菌TC921TSA上10CFU副溶血性弧菌CMCC2000大肠杆菌ACC292/739SA上福氏志贺氏菌CMC5172。5氯化钠肉汤3h金黄色葡萄球菌ATCC658B-P平板或其他培养基上0CFU表4 非选择性增菌培养基HI金黄色葡萄球菌TCC653浊度12蛋白胨盐L稀释20245mn大肠杆菌TC92+/50菌落数/至(/50%原始菌落数金黄色葡萄球菌TCC5923HSCDC/GC7-2009 版本 修改次:1/第 5 页 共 页表4 非选择性增菌培养基(续)乳糖蛋白胨肉汤大肠杆菌ATC5导气管1/3产气鼠伤寒沙门菌
9、ACC10SDLP液体培养基铜绿假单胞菌ATC278大肠杆菌ATC22金黄色葡萄球菌ATC68液体沙氏培养基L265天白色念珠菌CMCC98001浊度12真菌培养基L26天白色念珠菌CMCC80表5 选择性分离培养基亚硫酸酸铋琼脂(BS)748h鼠伤寒沙门菌TCC1408良好生长(2)菌落呈黑色,有金属光泽福氏志贺氏菌CMC51572菌落呈棕色大肠杆菌ATCC222873全部或部分抑制(01)无典型菌落粪链球菌ATC221933全部抑制()XLD鼠伤寒沙门菌C108菌落呈黑色福氏志贺氏菌CCC5173菌落呈无色大肠杆菌TCC25922/8739粪链球菌ATCC29212/19433血琼脂平板3
10、72448金黄色葡萄球菌ATC653/25923良好生长溶血,透明溶血环粪链球菌ATCC22溶血,草绿色溶血环TCSS3744h霍乱弧菌CMCC16109菌落较大,呈黄色副溶血性弧菌CMCC20001菌落较大,呈绿色4号琼脂37248h霍乱弧菌CMC6109菌落较大、扁平透明、湿润、中心带有黑色非O1群霍乱弧菌CMC1745大肠杆菌ATCC292/3全部或部分抑制(01)作 业指 导 书SCDCGC-7620 版本 修改次:10第6页 共 页表5 选择性分离培养基(续)伊红美兰琼脂大肠杆菌ATC2922/89菌落紫黑色带金属光泽鼠伤寒沙门菌ATCC14028菌落灰白色半透明福氏志贺氏菌CC15
11、TI(三糖铁琼脂)S37448h大肠杆菌AT592/8739斜面及底层均变黄,产气,硫化氢阳性普通变形杆菌CMC001福氏志贺氏菌MC51573底层变黄,斜面变红,不产气,硫化氢阴性鼠伤寒沙门菌ATCC18底层变黄,斜面变红,产气,硫化氢阳性表6 非选择性分离培养基营养琼脂大肠杆菌T592良好生长()鼠伤寒沙门菌TCC4028c小肠耶尔森氏菌ATC23715记录培养基验收检查记录单 HSCDCZJ9-29A 商品化培养基目录清单 HCDC/9A 成品培养基目录清单 HSCDC/ZJ-131A 实验室制备培养基测试结果记录单 HSCDC/J-1-A6参考文献6。1 B/2745-208实验室质量
12、控制规范 食品微生物检测S.2S/T158。12005.培养基制备指南第1部分:实验室培养基制备质量保证通则S.6.3/T1538.2207.培养基制备指南第2部分:培养基性能测实用指南S.纪绍梅.微生物培养基质控与图解M。北京:北京科学技术出版社,06。更改编制审核批准日期培养基验收检查记录单HSCDC/-1-29 共 页 第 页序号名称编号生产厂家批号数量接收日期有效期限验收记录储存条件备注MR08020瓶009101包装完好,标识清晰验收者: 复核者:商品化培养基目录清单SCDC/ZJ3A 共 页 第 页首次开封日期容器密封性复查内容物感官检查密封不密封正常受潮变色制单者: 复核者:成品培养基目录清单HSCZ1931A 共 页 第 页配制日期首次使用日期末次使用日期培养基质量检查脱水长菌 复核者:
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