培养基的质量控制Word文档下载推荐.docx

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新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试,符合要求后使用。

成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试，根据测试结果及时填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。

5。

1物理指标控制

５。

1.１　测试20℃~25℃的ｐＨ值

1.2琼脂层厚度;

色泽;

透明度和（或）是否存在肉眼可见杂质;

凝胶稳定性、粘稠度和湿度。

２微生物学指标控制

可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法（详见表1－表）对培养基性能进行测试，具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南”。

5.２。

１微生物污染的控制

从每批制备好的培养基中选取至少一个（或１%）平板或试管，置于3７℃或按特定标准中规定的温度培养1８ｈ。

２。

2生长特性

2.2。

1生长率

作　业指导书

编号：

HSCＤC/GC-76—２009

1／０

第　2页　共6页

将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中，每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值。

2。

2．1。

1定量方法

生长率PR的计算：

　　　　　　ＰＲ　＝NＳ／ＮO

NS:

从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。

Ｎ0:

从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数（该菌落总数应≥１00cｆｕ）。

要求：

非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.7，该类培养基应易于目标菌生长;

选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0。

1；

每平板（或每试管）的接种水平为10ＣＦＵ~1００ＣFU。

5.2。

２.1.2半定量方法

半定量方法采用生态测量技术在平板上划线,平板板连续划线区域得分的总和即为生长指数Ｇ，G值不应超过标准规定的允许范围。

2．2。

1。

3定性方法

定性方法采用划线法观察。

2．２。

2选择性

将浓度为104ＣFU/mL~106CFU/ｍL的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值。

２．１定量方法

选择因子ＳF:

　　　　SF=DO-　DS

DO:

能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度

DS：

能在测试培养基上显示生长的最高稀释度　

非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2；

半定量和定量法中,非目标菌应部分或全部被抑制.

5．2.3生理生化特性（选择性和特异性）

规定培养基的基本特性，使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性（菌落形态、大小等）和非目标菌的被抑制程度进行测试。

5.3性能评价和结果解释

按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定，则该批培养基品质优良;

若只有物理指标和微生物指标符合规定,则该批培养基可被接收。

表1　计数用选择性培养基

培养基

用途

培养条件

测试菌株

参考培

养基

控制方法

判定标准

特征反应

Ｂａiｒd-

Pａrkeｒ

［S]

生长率

37℃２４—4８ｈ

金黄色葡萄球菌ATCC６５３8/２592３

TSA

定量

ＰR≥0.5

黑色/灰色菌落,周围为一混浊带,其外有透明带

选择性

37℃48h

大肠杆菌AＴＣC2５92２／87３9

—-

定性

全部抑制

——

特异性

37℃24—48h

表皮葡萄球菌ATＣC1222８

黑色/灰色菌落，周围为一混浊带，其外无透明带

MＹP

［S］

30℃2４—４8h

腊样芽胞杆菌ATＣC1１７７8

PR≥0．7

具沉淀带的粉色菌落

３7℃48ｈ

大肠杆菌ATＣC25922

-—

3７℃48h

　枯草芽胞杆菌ＡＴＣC6633

不具沉淀带的粉色菌落

作业指导书

HSCDC／GＣ—76-200９

1/0

第３页　　共6　页

表1计数用选择性培养基（续）

ＶRBG（结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂）

［Ｓ]

37℃２4h

大肠杆菌ATCＣ25９22/8７39

TSＡ

PR≥0.5

带有或不带沉淀带的粉红色或红色菌落

鼠伤寒沙门菌ATＣC１40２8

37℃２0ｈ

粪链球菌ＡＴCＣ29212/19４33

VRBL（紫红胆汁乳糖）

30℃2０h

大肠杆菌ATCC259２2/８739

ＰR≥０.5

带有或不带沉淀带的淡紫色菌落

30℃２０h

粪链球菌ATCC２92１2/１9４33

３0℃２０h

铜绿假单胞菌ATCC２７８53

--

无色至浅棕色菌落

CT—SMAC（改良山梨醇麦康凯琼脂）

３7℃24ｈ

大肠杆菌O1５7：

Ｈ7

ATCC4３894/４3895

ＴSA

透明菌落，表面淡黄棕色，菌落直径约1ｍm

金黄色葡萄球菌ATＣC65３８/259２３

—－

３7℃２4h

大肠杆菌ATＣC1１775／25922

粉色菌落

BGBＬB（煌绿乳糖胆盐肉汤）

［L]

30℃24—4８h

大肠杆菌ATCC２592２/８7３9

TＳA

半定量

浊度2＋,导管1/3产气

产气并浑浊

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC２59２２/8７39

粪链球菌ATCＣ29２12／１9４３３

不生长

ＥＣ

[L]

４4℃２4～48ｈ

大肠杆菌ATCC25922

浊度2+,导气管1/３产气

4４℃24～48h

铜绿假单胞菌ＡTＣC27８５3b

EC-MUG/

LS-MUＧ

[Ｌ]

4４℃２４~48h

大肠杆菌ATCC2５92２

浊度2＋，导气管1/3产气

产气并浑浊，产生荧光

4４℃２4~48h

铜绿假单胞菌ATCC27８5３b

乳糖胆盐发酵培养

3７℃２4h

大肠杆菌ATCC２5922

导气管1／3产气

产气并变黄色

３7℃24h

鼠伤寒沙门菌AＴＣC14028

不产气、仍为紫色

LST（月桂酸肉汤）

37℃2４h

大肠杆菌AＴCＣ2５9２2

导气管１/３产气

福氏志贺氏菌CＭCＣ515７２

表2　计数用非选择性培养基

PＣＡ（平板计数琼脂）

30℃7２h

大肠杆菌ATCＣ２592２/８73９

PR≥0。

7

金黄色葡萄球菌ＡＴCC65３8

枯草芽孢杆菌AＴＣC6633

作业指　导　书

ＨSＣDC/GＣ-76—２０09

第4页　共6页

表３　选择性增菌培养基

EE

[Ｌ］

37℃24h

大肠杆菌ATＣC2592２/８73９

ＶRBＧ上＞10CFＵ

粉红至红色菌落,有或没有沉淀带

鼠伤寒沙门菌ATＣC14028

粪肠球菌ATＣC29２12

RVS

41。

5℃２４h

鼠伤寒沙门菌ATCＣ14028

XLＤ或其他选择性培养基上>

１０CＦU

肠炎沙门氏菌ＡTCC1３０76

铜绿假单胞菌ATCC２7853

４1.5℃２4ｈ

大肠杆菌ATCC2592２

TSA上全抑制

粪链球菌

ＡTＣC２921２

TSA上<

1０CFU

SC（亚硒酸盐胱氨酸）

3７℃24h

鼠伤寒沙门菌ＡTＣC14028

XLD或其他选择性培养基上＞10CFU

不同培养基上菌落特征不同（见标准）

+大肠杆菌ＡＴCC25９22

+铜绿假单胞菌AＴCC2７853b

3７℃24ｈ

大肠杆菌ATＣC２5922

TＳA上＜10CＦU

ATＣＣ２9212

ＴTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）

鼠伤寒沙门菌ＡTＣC1４028

ＸＬD或其他选择性培养基上＞10CＦU

伤寒沙门菌ＣMＣC５0０71

37℃２4ｈ

大肠杆菌AＴＣC2５９22

ＴSA上＜１0ＣFU

碱性蛋白胨水

３7℃２４h

霍乱弧菌ＣMCC１6１0９

TCBS或其他选择性培养基上>

10CFU

副溶血性弧菌CMCC2000１

大肠杆菌AＴCC2５92２/８739

ＴSA上<

福氏志贺氏菌CMCＣ51５72

７。

5％氯化钠肉汤［Ｌ]

3７℃２４h

金黄色葡萄球菌ATCC65３8

B-P平板或其他培养基上＞１0CFU

表4非选择性增菌培养基

ＢHI

金黄色葡萄球菌ＡTCC653８

浊度1～2

蛋白胨盐

[L］

稀释

20～2５℃45mｉn

大肠杆菌ＡTCＣ２５9２2

+/－50％菌落数/至（＋/—50%原始菌落数

金黄色葡萄球菌ＡTCC２5923

HSCDC/GC—7６-2009

版本／　修改次:

1/０

第5页　　共６页　

表4非选择性增菌培养基（续）

乳糖蛋白胨肉汤

大肠杆菌ATＣC２5９２２

导气管1/3产气

鼠伤寒沙门菌AＴCC1４0２８

SＣDLP液体培养基

铜绿假单胞菌ATCＣ278５３

大肠杆菌ATＣC２５９22

金黄色葡萄球菌ATＣC6５３8

液体沙氏培养基[L]

26℃5天

白色念珠菌CMCC98001

浊度1~2

真菌培养基[L］

26℃５天

白色念珠菌CMCC９8０0１

表5选择性分离培养基

亚硫酸酸铋琼脂（BS）

[Ｓ］

３7℃48h

鼠伤寒沙门菌ＡTCC140２8

良好生长

（2）

菌落呈黑色,有金属光泽

福氏志贺氏菌CMＣC51572

菌落呈棕色

大肠杆菌ATCC2５９22／873９

全部或部分抑制（0～1）

无典型菌落

粪链球菌ATCＣ2９21２／１9４33

全部抑制（０）

XLD

鼠伤寒沙门菌ＡＴCＣ1４0２8

菌落呈黑色

福氏志贺氏菌CＭCC51５73

菌落呈无色

大肠杆菌ＡTCC25922/8739

粪链球菌ATCC29212/19433

血琼脂平板

37℃24~48ｈ

金黄色葡萄球菌ATCＣ653８/25923

良好生长

β溶血,透明溶血环

粪链球菌ATCC２９2１2

α溶血,草绿色溶血环

TCＢS

[S]

37℃２4~4８h

霍乱弧菌CMCC16109

菌落较大,呈黄色

副溶血性弧菌CMCC20001

菌落较大,呈绿色

4号琼脂

37℃2４～48h

霍乱弧菌CMCＣ１6109

菌落较大、扁平透明、湿润、中心带有黑色

非O1群霍乱弧菌CMCＣ17０45

大肠杆菌ATCC2５9２2/８７3９

全部或部分抑制（0~1）

作业　指导书

ＨSCDC／GC-76－2０0９

版本　／修改次:

1／0

第　6　页共６页　

表5选择性分离培养基（续）

伊红美兰琼脂

大肠杆菌ATＣC2５922/8７３9

菌落紫黑色带金属光泽

鼠伤寒沙门菌ATCC14028

菌落灰白色半透明

福氏志贺氏菌ＣＭCC５15７３

TＳI（三糖铁琼脂）

[S］

37℃２4—48h

大肠杆菌ATＣＣ２592２/8739

斜面及底层均变黄,产气,硫化氢阳性

普通变形杆菌

CMＣC４９001

福氏志贺氏菌ＣMＣC51573

底层变黄,斜面变红，不产气，硫化氢阴性

鼠伤寒沙门菌ATCC1４０２8

底层变黄，斜面变红,产气，硫化氢阳性

表6非选择性分离培养基

营养琼脂

大肠杆菌ＡTＣＣ２592２

良好生长（２）

鼠伤寒沙门菌ＡTCC１4028c

小肠耶尔森氏菌ATＣC23715

５．记录

培养基验收检查记录单　　　　　HSCDC／ZJ—１9-29A

商品化培养基目录清单　　HＳCDC/ＺＪ－１9－３０A

成品培养基目录清单　　　　HSCDC/ZJ-1９—31A

实验室制备培养基测试结果记录单　　HSCDC/ＺJ-1９-３３A

6．参考文献

6。

1ＧB/Ｔ274０5-20０8．实验室质量控制规范食品微生物检测[S]．

６.2　SＮ/T15３8。

1—2005.培养基制备指南　第1部分:

实验室培养基制备质量保证通则［S］.

6.3　ＳＮ/T1538.2—20０7.培养基制备指南　第2部分:

培养基性能测实用指南[S].

４纪绍梅.微生物培养基质控与图解［M]。

北京:

北京科学技术出版社,２０06。

更改

编制

审核

批准

日期

培养基验收检查记录单

HSCDC/ＺＪ-1９-29Ａ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　共　页第页

序号

名称

编号

生产厂家

批号

数量

接收日期

有效期限

验收记录

储存条件

备注

MR08０0１

20瓶

２009101４

包装完好,标识清晰

验收者:

　　　　　　　　复核者：

商品化培养基目录清单

ＨSCDC/ZJ—１９—3０A　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　共　页第　页

首次开封日期

容器密封性复查

内容物感官检查

密封

不密封

正常

受潮

变色

制单者：

　　　　　　　复核者:

成品培养基目录清单

HSCＤＣ／ZＪ—19—31A　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　共　页第　页

配制日期

首次使用日期

末次使用日期

培养基质量检查

脱水

长菌

　　　　　　　　复核者：