TLC原理及应用.docx

1、TLC原理及应用吸附剂对不同物质吸附能力不同；展开剂对不同物质溶解度不同，通过展开达到分离的目的。即混合液点在薄层板上时，吸附剂对不同物质有不同程度的吸附，在用溶剂展开时，因薄层上的毛细管效应，溶剂上升，当升到原点时，混合物溶解，溶解后随着不断上升的溶剂上移于原点之上，遇到新的吸附剂又被吸附，接着又溶解、解吸，使斑点不断上移。而在上升过程中，由于有的成分吸附得牢些，即上移速度慢些，反之则快些，从而达到“差速迁移”，当展开至一定距离后，就可达到分离混合物的目的。斑点上升的高度用Rf表示：Rf= 原点至斑点中心的距离 / 原点至溶剂前沿的距离, Rf1 展开剂极性越大，溶质Rf值越大（即爬的越高）

2、，但很可能降低分离能力；另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物、根据相似相溶原理，要使用多元溶剂体系。留个邮箱吧，我有篇文章是将展开剂的选择，还不错 tlc原理与技术(1) 有机TLC板显色问题的讨论tlc原理与技术(2)2011-03-21 17:22:50|分类： 默认分类 阅读63 评论0 字号：大中小订阅 三）. 专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下： (1)烃类 硝酸银过氧化氢 检出物：卤代烃类。 溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30过氧化氢1滴。 方法：喷后置未过滤

3、的紫外光下照射； 结果：斑点呈暗黑色。 荧光素溴 检出物：不饱和烃。 溶液：I荧光素0.1g溶于乙醇lOOml； 5溴的四氯化碳溶液。 方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。 四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。 溶液：2四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。 方法：喷后置紫外光下观察。 甲醛硫酸 检出物：多环芳烃。 溶液：37甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。 (2)醇类 3，5一二硝基苯酰氯 检出物：醇类。 溶液：I2本品甲苯溶液； 0.5氢氧化钠溶液

4、； O.002罗丹明溶液。 方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液()30s，喷水洗，趁湿通过()15s，空气干燥，紫外灯下观察。硝酸铈铵检出物：醇类。溶液：I1硝酸铈铵的0.2molL硝酸溶液； N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+15m1)混合液中，用前将(I)与()等量混合。喷板后于105oC加热5min。 香草醛硫酸 检出物：高级醇、酚、甾类及精油。溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。方法：喷后于120oC加热至呈色最深。二苯基苦基偕肼 检出物：醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中

5、。方法：喷后于110oC加热5lOmin。结果：紫色背景呈黄色斑点。(3)醛酮类品红亚硫酸检出物：醛基化合物。溶液：I0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色； 0.05molL氯化汞溶液； O.05molL硫酸溶液。 方法：将I、以1：1：10混合，用水稀释至l00ml。邻联茴香胺检出物：醛类、酮类。溶液：本品乙酸饱和溶液。2，4-二硝基苯肼检出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I0.4本品的2molL盐酸溶液；本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加浓盐酸lml。方法：喷溶液I或后，立即喷铁氰化钾的2molL盐酸溶液。结果：饱和酮立即呈蓝色；饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；不饱和羰基化合物不显色。绕丹宁检

6、出物：类胡萝卜素醛类。溶液：I1%5%绕丹宁乙醇溶液； 25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。方法：先喷溶液I，再喷溶液，干燥。(4)有机酸类溴甲酚绿检出物：有机酸类。 溶液：溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。方法：浸板。结果：蓝色背景产生黄色斑点。高锰酸钾硫酸检出物：脂肪酸衍生物。溶液：见通用显色剂酸性高锰酸钾。过氧化氢检出物：芳香酸。溶液：0.3%过氧化氢溶液。方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。结果：呈强蓝色荧光。2，6-二氯苯酚-靛酚钠检出物：有机酸与酮酸。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。方法：喷后微温。结果：蓝色背景呈红色。(5)酚类Emerso

7、n 试剂(4-氨基安替比林铁氰化钾()检出物：酚类、芳香胺类及挥发油。溶液：I4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml； 铁氰化钾()4g溶于水50ml，用乙醇稀释至100ml。方法：先喷溶液I，在热空气中干燥5min，再喷溶液，再于热空气中干燥5min，然后将板置含有氨蒸气(25氨溶液)的密闭容器中。结果：斑点呈橙-淡红色。挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。Boute 反应检出物：酚类、氯、溴、烷基代酚。方法：将薄层置有NO2蒸气(含浓硝酸)的容器中310min，再用NH2蒸气(浓氨液)处理。氯醌(四氯代对苯醌)检出物：酚类。溶液：1本品的甲苯溶液。DDQ(二氯二氰基苯醌)试剂检出物：酚类。溶液

8、：2本品的甲苯溶液。TCNE (四氰基乙烯)试剂检出物：酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。溶液：0.5%1%本品的甲苯溶液。Gibbs(2，6-二溴苯醌氯亚胺)试剂检出物：酚类。溶液：2%本品的甲醇溶液。氯化铁检出物：酚类、羟酰胺酸。溶液：1%5%氯化铁的0.5molL盐酸溶液。结果：酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。(6)含氮化合物FCNP(硝普钠铁氰化物)试剂检出物：脂 肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。溶液：10氢氧化钠溶液、10硝普钠溶液、10铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，在室温至少放置20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。Dragen

9、dorff(碘化铋钾试剂)试剂检出物：芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。溶液：I碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中； 碘化钾8g溶于水20ml中。 将上述溶液I及等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。结果：呈橘红色斑点。4-甲基伞形酮检出物：含氮杂环化合物。溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。方法：喷板后置25氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。碘铂酸钾检出物：生物碱类及有机含氮化物。溶液：10六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合，加6碘化钾溶液，混匀。临用前配制。硫酸高铈铵硫酸检出物

10、：生物碱及含碘有机化物。溶液：硫酸铈1g混悬于4ml水中，加三氯乙酸1g，煮沸，逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。方法：喷后薄层于1l0oC加热数分钟。结果：阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛盐酸)试剂检出物：吲哚衍生物及胺类。溶液：1本品的浓盐酸溶液与甲醇按1：1混合。方法：喷后板于50oC加热20min。结果：呈不同颜色的斑点。(7)胺类硝酸乙醇检出物：脂肪族胺类。溶液：50滴65硝酸于乙醇100ml中。方法：需要时120oC加热。2，6-二氯醌氯亚胺检出物：抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物

11、、苯氧基乙酸除草剂等。溶液：新鲜制备的0.52本品乙醇溶液。方法：喷后薄层于110oC加热10min，再用氨蒸气处理。茜素检出物：胺类。溶液：O.1本品的乙醇溶液。丁二酮单肟氯化镍检出物：胺类。溶液：I丁二酮单肟1.2g溶于热水35ml中，加氯化镍095g，冷却后加浓氨水2ml； 盐酸羟胺0.12g溶于200ml水中。方法：将溶液I及混合，放置1天，过滤。Pauly (对氨基苯磺酸)试剂检出物：酚类、胺类和能偶合的杂环化合物。溶液：磺酸45g溶于温热的12molL盐酸45ml中，用水稀释至500ml，取lOml于冰中冷却，加45亚硝酸钠冷溶液lOml，于OoC放置15min。用前加等体积10碳

12、酸钠溶液。硫氰酸钴()检出物：生物碱、伯、仲、叔胺类。溶液：硫氰酸铵3g与氯化钴1g溶于水20ml。结果：白色至粉红色背景上呈蓝色斑点，2h后颜色消退。若将薄层喷水或放入饱和水蒸气容器内，可重现色点。1，2-萘醌-4-磺酸钠检出物：芳香胺类。溶液：本品0.5g溶于95ml水，加乙酸5ml，滤去不溶物即得。方法：喷后反应30min显色。葡萄糖磷酸检出物：芳香胺类。溶液：葡萄糖2g溶于85磷酸l0ml与水40ml混合液中，再加乙醇与正丁醇各30ml。方法：喷后于115加热l0min。 (8)硝基及亚硝基化合物-萘胺检出物：3，5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。溶液：IO5-萘胺乙醇溶液； 10氢

13、氧化钾甲醇溶液。方法：先喷溶液I，再喷溶液。结果：呈红褐色斑点。二苯胺氯化钯检出物：亚硝胺类。溶液：1.5二苯胺乙醇溶液与0.1g氯化钯的0.2氯化钠溶液lOOml，按5：1混合。方法: 喷后置紫外光(254nm)下观察。结果：显紫色斑点。(9)氨基酸及肽类茚三酮检出物：氨基酸、胺与氨基糖类。溶液：本品O.2g溶于乙醇l00ml中。方法：喷后于110oC加热。结果：呈红紫色斑点。茚三酮乙酸镉检出物：氨基酸及杂环胺类。溶液：茚三酮1g及乙酸镉2.5g溶于l0ml冰醋酸中，用乙醇稀释至500ml。方法：喷后于120oC加热20min。1，2-萘醌-4-磺酸钠检出物：氨基酸。溶液：临用前将本品O.0

14、2g溶于5%碳酸钠l00ml中。方法：喷后室温干燥。结果：不同氨基酸呈不同色点。靛红乙酸锌检出物：氨基酸与某些肽类。溶液：靛红1g与乙酸锌1g溶于95异丙醇l00ml中，加热至80oC，冷却后加乙酸1ml，冰箱保存。方法：喷后于8085C加热30min。 茚三酮冰醋酸检出物：二肽及三肽。 溶液：1茚三酮吡啶溶液与冰醋酸按5：1混合。方法：喷后于l00oC加热5min。香草醛检出物：氨基酸及胺类。溶液：I本品1g溶于丙醇50ml中; 1molL氢氧化钾溶液lml，用乙醇稀释至lOOml。方法：先喷溶液I后于110oC干燥l0min，再喷溶液，于110oC再干燥l0min，于紫外光(365nm)下观察。(10)甾类香草醛硫酸检出物：甾体激素