整理保健食品中大豆异黄酮的检验方法Word格式文档下载.docx

1、名称 次数123456平均值RSD（%）大豆苷13.37713.35013.33213.37413.37313.30013.350.23黄豆苷14.27114.24214.23714.27514.27714.20114.250.21染料木苷19.90119.82319.80119.89019.79619.850.26大豆黄素32.02131.95131.93232.07232.08231.02231.851.28黄豆黄素33.33633.30333.29233.36233.38233.27533.330.13染料木素43.73943.52443.50743.81543.82243.49743.

2、650.364.1.2检测波长的选择：3）迁移。对以大豆苷、黄豆苷、染料木苷、大豆黄素、黄豆黄素和染料木素进行波长扫描，波长范围：220nm450nm，光谱图见附页1。5.建设项目环境影响评价文件的重新报批和重新审核 通过光谱图比较，这六种物质在260nm有最大吸收，因此选定260nm作为检测波长。规划编制单位对可能造成不良环境影响并直接涉及公众环境权益的专项规划，应当在规划草案报送审批前，采取调查问卷、座谈会、论证会、听证会等形式，公开征求有关单位、专家和公众对环境影响报告书的意见。4.1.3 标准工作曲线和线性范围 配制不同浓度的标准使用液在上述色谱条件下进行HPLC测定。线性方程和相关系

3、数（3）总经济价值的组成。我们可以用下式表示环境总经济价值的组成：见表2和附页2。 规划环境影响的跟踪评价应当包括下列内容：（1）资质等级。评价机构的环评资质分为甲、乙两个等级。环评证书在全国范围内使用，有效期为4年。规划审批机关在审批专项规划草案时，应当将环境影响报告书结论以及审查意见作为决策的重要依据。（4）环境保护验收。表格 2 标准曲线数据列表样品名称（2）区域、流域、海域的建设、开发利用规划。 环境影响篇章或说明浓度（g/mL）（2）评价范围。根据评价机构专业特长和工作能力，确定其相应的评价范围。峰面积线性方程相关系数0.20958.6Y=38.20869X+4.010240.999

4、992.095082.910.4750408.041.90001619.783.80003192.0125.70004810.90.19907.5Y=34.74200X+2.313091.990072.99.9500350.939.80001391.879.60002754.0119.40004157.20.207512.2Y=55.50528X+5.775942.0750121.010.3750589.441.50002323.683.00004595.3124.50006922.30.201512.8Y=59.71839X+6.173332.0150123.410.0750619.640.

5、30002428.580.60004799.7120.90007233.20.199510.8Y=43.30426X+8.176451.9950110.49.9750441.539.90001736.379.80003455.3119.70005196.90.202016.6Y=78.92797X+6.069002.0200167.010.1000812.540.40003212.780.80006352.1121.20009586.3由表2可知，本方法的标准工作曲线线性范围较宽，0120g/mL线性良好。4.2 样品处理4.2.1 提取溶剂的选择大豆异黄酮难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、乙

6、酸乙酯等有机溶剂，参照国内外相关资料，选择了80%甲醇提取保健食品中的大豆异黄酮成分，80%的甲醇提取的样品色谱图见附页3。保健食品片剂和粉末一般以淀粉和糊精作为填充剂，80%的甲醇能够使淀粉和糊精沉淀，另外能够有效提取大豆异黄酮成分；软胶囊含油脂，用80%的甲醇作为萃取剂，一方面大大降低了油脂的溶解度，延长色谱柱的使用寿命，也可以有效提取大豆异黄酮。保健饮料中的大豆异黄酮可溶于水，可以直接用80%甲醇提取。4.2.2 超声时间的选择 保健食品中组分复杂，含有淀粉、糊精、油脂、蛋白等各种成分，能够包容大豆异黄酮有效成分，通过超声萃取能够快速有效的提取。本实验选择0min，10min ，20mi

7、n，30min，40min进行超声处理。结果见图1。图1 超声时间对提取效果的影响从上图可以看出，超声时间对软胶囊提取影响较明显，超声波能够使软胶囊中油状物破乳，大豆异黄酮成分能够更加快速被甲醇萃取出来，但是随着超声时间的延长，提取量没有明显增加，选定超声时间为20min。硬胶囊（粉剂），粉剂为粉末状物质，它能够较好的分散于80%的甲醇中，使得其中的大豆异黄酮组分比较容易被提取，所以超声20min已能够完全提取。4.3 本方法的检出限本方法的检出限：进样量为10L时，大豆苷（daidzin）、黄豆苷（glycitin） 和染料木苷（genistin）、大豆黄素（daidein）、黄豆黄素（gl

8、ycitein）和染料木素（genistein）的最低检出浓度均为：0.02g/mL，最低检出量如下: 以大豆异黄酮为主要功能性成分的片剂、胶囊及大豆异黄酮粉末0.005mg/g, 口服液的最低检出量为:0.0002mg/mL，保健饮料最低检出量为:0.0002mg/mL。4.4 本方法的重复性和精密度按照本方法，选择五种代表性的大豆异黄酮保健食品进行日内重复性测定，结果表明本方法精密度好，准确度高，操作简便，适合推广应用。部分结果见下表。表中，以大豆异黄酮总量计mg/g ，饮料的单位为g/ mL 。表格 3 日内重复性单位：mg/g次数 名称胶囊56.2860.3558.9059.2258.

9、6859.7858.872.4粉末104.71105.37105.79107.72103.43106.64105.611.4片剂35.1734.7633.9533.7433.0434.2734.162.2饮料107.58107.31107.90106.38104.92105.91106.671.1表格 4 样品中六种大豆异黄酮成分的重复性 次数名称 32.9932.3833.3433.8933.1432.9233.111.513.7213.4614.0013.4913.7813.707.837.737.918.037.927.817.871.781.711.771.791.761.80.840

10、.820.861.61.831.841.820.3通过表4可以看出，六种大豆异黄酮日内重复性较好，精密度较高。按照本检验方法对样品进行日间重复性测定：间隔两天，共测定三次，部分实验结果见表5表格 5 日间重复性名称33.6932.1833.3633.0813.2313.8913.713.18.017.707.882.01.702.80.851.91.854.5 本方法的准确度按照本检验方法对样品饮料、片剂、胶囊、口服液的加标回收实验，回收率见表6。表格 6 饮料（空白）加标回收实际测定均值（g/mL）加标量（g/mL）平均回收率（%）1.942.049510.1010.209919.7020.

11、40972.122.169810.6010.8021.1021.601.601.551037.967.7515.6015.501012.5910012.7012.9525.7025.901.87969.599.3518.9018.702.072.001049.8010.0020.7020.00表格 7片剂（空白）加标实际测定均值（mg/g）加标量（mg/g）0.2500.2550.9701.0200.2701.0601.0800.2000.1930.7950.7720.3330.3131061.3401.2950.2280.2350.9300.9401.0301.000表格 8 胶囊加标回收实

12、际测定值（mg/g）样品本底值（mg/g）回收率（%）43.2535.657.6548.9312.7566.8830.610222.4314.238.1028.4813.547.5332.4染料木苷14.158.305.7818.209.6332.4323.3大豆黄素2.871.880.974.122.276.354.54黄豆1.560.880.72.471.644.033.27木素2.721.970.753.601.74945.453.48表格 9 口服液加标回收实际测定值（mg/mL）样品本底（mg/mL）加标（mg/mL）0.9340.6160.3061.2220.6121.2240.4560.1190.3240.7700.6481.4401.2960.7750.5330.2330.9920.4661.4900.9320.04270.0240.01820.04870.02590.07720.05190.02670.01320.01310.03120.01870.04840.03740.02430.01080.0140.03020.0200.05150.0398