1、(1)能耐高温的、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。 (4)通常乙醇消毒是75%的酒精,有气味,影响水质,不适宜消毒自来水;高锰酸钾本身有颜色,消毒后溶液呈紫红色,无法使用;因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。(5)采用高压蒸汽灭菌时,锅内的水加热煮沸,将其中原有的冷空气彻底排除后才能将锅密闭。如果未将锅内冷空气排尽,则会出现压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度的现象。【点睛】(1)消毒与灭菌的区别:比较项目消毒灭菌条件使用较为温和的理化方法使用强烈的理化因素结果杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)
2、 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 适用实验操作的空间、操作者的衣服和手 微生物的培养器皿、接种用具和培养基等 常用方法煮沸消毒法(如在100,煮沸56 min)、巴氏消毒法(如在80,煮15 min);使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 (2)三种常用灭菌方法的比较:灭菌方法灭菌条件灭菌时间适用材料或用具灼烧灭菌酒精灯火焰的充分燃烧层直至烧红接种环、接种针或其他金属工具干热灭菌干热灭菌箱内,16017012 h玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等高压蒸汽灭菌100kPa,1211530 min培养基等3.(2018全国3卷)回答下列与酵母菌有关
3、的问题:(1)分离培养酵母菌通常使用_(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”)培养基,该培养基应采用_灭菌法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后会观察到菌落,菌落的含义是_。(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,可促进_(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”);若进行厌氧培养,可促进_(填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”)。(3)制作面包时,为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松软的原因是_。【答案】 (1). 麦芽汁琼脂 (2). 高压蒸汽 (3). 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体 (4). 菌体快速增殖 (5). 乙醇
4、产生 (6). 酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软【解析】【分析】本题主要考查酵母菌培养和分离的有关知识。酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌,在有氧条件下,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,细胞增殖快;在无氧条件下,进行无氧呼吸,产生酒精和CO2,释放能量少,细胞增殖慢;常用的灭菌方法有:灼烧灭菌(主要用于接种工具灭菌)、干热灭菌(用于待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品)、高压蒸汽灭菌(适用于培养基灭菌);平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后,就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是
5、菌落;牛肉膏蛋白胨培养基属于细菌培养基,麦芽汁琼脂培养基适合培养真菌,MS培养基是植物组织培养使用的培养基。(1)麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高,而且含糖量高,更适合酵母菌;该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌;若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落;(2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,进行有氧呼吸产生H2O和CO2,释放能量多,细胞增殖快;若进行无氧培养,进行无氧呼吸,产生酒精和CO2,释放能量少,增殖慢;(3)制作面包时,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,产生二氧化碳,二氧化碳是气体,遇热膨胀而形成小孔,使
6、得面包松软多孔。【点睛】要注意区别三种培养基的用途;要知道酵母菌的无氧呼吸产生酒精和CO2,不是乳酸。4.(2018江苏卷)31. 酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。下图所示为操作流程,请回答下列问题:(1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的 ,及时对培养基进行分装,并进行 灭菌。(2)取步骤中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤中将温度约 (在25 、50 或80 中选择)的培养基倒入培养
7、皿混匀,冷凝后倒置培养。(3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤所示进行划线。下列叙述合理的有 。a为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌b划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落c挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量d可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株(4)步骤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和 供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1 000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用2516型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上 色细胞的个数应不少于 ,才能达到每毫升3109个活细胞的预期密度。【答案】(8分)(1)
8、pH 高压蒸汽(湿热)(2)50 (3)a、b、d(4)氧气 无 30【解析】【分析】配制培养基的操作步骤为称量溶化定容调pH培养基的分装包扎灭菌。据图分析,从土壤样品中分离该类酵母菌的实验流程为:称量土壤梯度稀释平板浇注分离划线纯化扩大培养。(1)配制培养基的操作步骤为称量溶化定容调pH培养基的分装包扎灭菌,因此微生物的培养基配制好后应该先调节pH,再分装。常见的灭菌方法有:干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌。培养基适宜用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(2)在步骤中,待培养基冷却至50左右时进行倒平板。(3)在划线过程中,接种针、接种环使用前都必须灭菌,以防止杂菌污染,a正确;划线时应避免划破培养基
9、表面,否则将不能形成正常菌落,b正确;该实验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌,不需要测定酵母菌中的甲醇含量,c错误;培养基中的甲醇浓度越高,此种培养基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越强,因此可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株,d正确。(4)酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖,因此为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和氧气供应;台盼蓝是大分子物质,不能将活细胞染色,再根据2516型的血球计数板:1毫升悬液中待测标本(菌体)总数=80小方格内菌体数/80400104稀释倍数。而台盼蓝与菌液等体积加入,因此要达到每毫升3109个活细胞的预期密度,理论上无色细胞数应该
10、不少于(3109)(1000240080)=30个。【点睛】解答本题的关键是掌握微生物的培养基配制过程、灭菌、接种等,并能够利用公式计算血细胞计数板中活菌的数目。5.(2018海南卷)葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。(1)试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定,与乙装置相比,用甲装置酿制葡萄酒的优点是(答出两点即可)。(2)葡萄汁装入甲装置时,要留有约1/3的空间,这种做法的目的是(答出两点即可)。(3)某同学若用乙装置进行发酵,并设置两个不同处理组(乙A和乙B),乙A装置中保留一定量的氧气,乙B装置中没有氧气。在其他条件相同且适宜的情况下,测得一
11、段时间内乙A和乙B中酒精含量的变化趋势及乙A中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。图中曲线、依次表示、含量的变化趋势。(4)从细胞呼吸类型看,酵母菌属于生物;从同化作用的类型看,酵母菌属于(填“自养”或“异养”)生物。答案:(1)不需要开盖放气;避免了因开盖引起的杂菌污染(2)为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气;防止发酵旺盛时汁液溢出(3)乙A中的氧气乙B中的酒精乙A中的酒精(4)兼性厌氧异养2017-2010年一、选择题1(2017江苏)下列关于“腐乳的制作”实验,叙述正确的是A控制发酵温度的主要目的是腐乳调味B腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D成品腐乳表面的粘
12、性物质主要由细菌产生2(2017江苏)固定化单宁酶应用于茶饮料加工,可消除其中的苦涩味。下列有关叙述正确的是A在单宁酶纯化时可采用透析法去除杂蛋白B化学结合法比吸附法对单宁酶活性影响更小C温度、pH 和重金属离子都可能影响固定化单宁酶活性D酶的高效性决定固定化单宁酶不会降解茶饮料中的有益成分3(2017江苏)下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述,正确的是A活化酵母时,将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状B配制CaCl2溶液时,需要边小火加热边搅拌C将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时,凝胶珠成形后应即刻取出D海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色,过低时凝胶珠易呈蝌蚪状4(2017江苏)下图
13、是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。下列相关叙述正确的是A改变通入气体种类,可以研究呼吸作用类型对发酵的影响B果酒发酵中期通入氮气,酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸C果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关D气体入口与气体出口可以交换使用5(2016江苏)下列关于中学“腐乳的制作”实验,叙述正确的是A加盐主要是为了调节水分,利于毛霉生长B加料酒主要是为了灭菌,避免腐败变质C发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌D实验室制作的腐乳不宜直接食用6(2016四川)下列有关实验操作或方法所导致结果的描述,不正确的是A用纸层析法分离色素时,若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠B用葡萄制作果醋时,若先通入空气
14、再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质C提取胡萝卜素时,若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低D调查人群中色盲发病率时,若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高7(2015江苏)关于“腐乳的制作”实验,下列叙述错误的是A将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高,影响毛霉生长B腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会出现黏性物C勤向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长D装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染8(2015江苏)如图为苹果酒的发酵装置示意图,下列叙述错误的是 A发酵过程中酒精的产生速率越来越快B集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的C发酵过程中酵母种群呈“J”冶型增长D若发酵液表面出现菌膜,最
15、可能原因是发酵瓶漏气9(2015江苏)图1、2 分别为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是A图1、2 中加入蒸馏水稀释的目的相同B图1 中完成过滤之后保留滤液C图2 中完成过滤之后弃去滤液D在图1 鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质10(2014江苏)(多选)某同学设计了下图所示的发酵装置,下列有关叙述正确的是A该装置可阻止空气进入,用于果酒发酵B该装置便于果酒发酵中产生的气体排出C去除弯管中的水,该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸D去除弯管中的水后,该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似11(2014江苏)下列关于“DNA的粗提取与鉴定”冶实验叙
16、述,错误的是A酵母和菜花均可作为提取DNA的材料BDNA 既溶于2 mol/ L NaCl溶液也溶于蒸馏水C向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物DDNA 溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝12(2014广东)下列叙述错误的是A醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸B酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精C泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵D腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶13(2014江苏)下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是A高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好B洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用C在pH 低于7. 0 的自来水中,碱性蛋白酶依
17、然能起作用D洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用14(2013江苏)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是A培养基分装到培养皿后进行灭菌B转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线C接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养D培养过程中每隔一周观察一次15(2013江苏)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是A加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热16(2013四川)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中,下列生命活动不会同时发生的是:A细胞的增殖和分化 B光能的吸
18、收与转化CATP的合成与分解 D基因的突变与重组17(2013江苏)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。下列相关叙述正确的是A酵母菌是嗜温菌,所以果酒发酵所需的最适温度较高B先供氧进行果醋发酵,然后隔绝空气进行果酒发酵C与人工接种的发酵相比,自然发酵获得的产品品质更好D适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖18(2013北京)关于高中生物学实验的基本原理,叙述不正确的是A噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统B提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异C成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透(过)性DPCR呈指数扩增DNA片段
19、是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应的模板19(2013江苏)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是A可用包埋法制备固定化酵母细胞B反应产物对固定化酶的活性没有影响C葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应20(2013重庆)某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉,其技术路线为“取材愈伤组织培养出芽生根移栽”。下列有关叙述,错误的是 A消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害 B在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂,可获得染色体加倍的细胞 C出芽是细胞再分化的结果,受基因选择性表达的调控 D生根时,培养基通常应含-萘乙酸等生长素类调
20、节剂 21(2012江苏)下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述,合理的是A先用热水溶解洗衣粉,再将水温调节到最适温度B实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度C相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果22(2012北京)高中生物学实验中,在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上23(2012江苏)(多选)下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述,合理的是A在果酒发酵后期拧开瓶盖的
21、间隔时间可延长B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小D将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时,底层和近瓶口处需加大用盐量24(2012江苏)下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述,错误的是A从酶的固定方式看,吸附法比化学结合法对酶活性影响小B作为消化酶使用时,蛋白酶制剂以口服方式给药C尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶,可以反复使用D将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗,目的是洗去CaCl2 和杂菌25(2011广东)以下关于猪血红蛋白提纯的描述,不正确的是A洗涤红细胞时,使用生理盐水可防止红细胞破裂B猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少C血红蛋
22、白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D在凝胶色谱法分离过程中,血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢26(2010广东)(双选)小李尝试制作果酒,他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验(如图),恰当的做法是A加入适量的酵母菌B一直打开阀b通气C一直关紧阀a,偶尔打开阀b几秒钟D把发酵装置放到4冰箱中进行试验27(2011江苏)下列有关植物组织培养的叙述,正确的是A愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选二获得28(2011重庆)下列有
23、关细菌培养的叙述,正确的是A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动29(2011江苏)下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是A腐乳制作所需要的适宜温度最高B果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵C使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌D使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA30(2011江苏)下列有关酶的制备和应用的叙述,正确的是A酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离和纯化C棉织物不能使用添加纤维素酶
24、的洗衣粉进行洗涤D多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层31(2010北京)有家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是A让发酵装置接受光照 B给发酵装置适时排气C向发酵装置通入空气 D将发酵装置放在45处32(2010江苏)下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程,下列叙述正确的是A过程和都只能发生在缺氧条件下B过程和都只发生在酵母细胞的线粒体中C过程和都需要氧气的参与D过程所需的最适温度基本相同33(2010江苏)(多选)如图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作,图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图下列叙述正确的是图1 图2A刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液-B图1中X溶液为溶液,其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中二、非选择题34(2017全国1)某些土壤细菌可将尿素分解成和NH3
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