9年高考生物试题分类汇编带答案解析专题19 生物技术实践Word文档下载推荐.docx
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（1）能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。
（4）通常乙醇消毒是75%的酒精，有气味，影响水质，不适宜消毒自来水；
高锰酸钾本身有颜色，消毒后溶液呈紫红色，无法使用；
因此水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。
（5）采用高压蒸汽灭菌时，锅内的水加热煮沸，将其中原有的冷空气彻底排除后才能将锅密闭。
如果未将锅内冷空气排尽，则会出现压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度的现象。
【点睛】
（1）消毒与灭菌的区别：
比较项目
消毒
灭菌
条件
使用较为温和的理化方法
使用强烈的理化因素
结果
杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）
杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子
适用
实验操作的空间、操作者的衣服和手
微生物的培养器皿、接种用具和培养基等
常用方法
煮沸消毒法（如在100℃，煮沸5～6min）、巴氏消毒法（如在80℃，煮15min）；
使用酒精、氯气、石炭酸等化学药剂进行消毒
灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌
（2）三种常用灭菌方法的比较：
灭菌方法
灭菌条件
灭菌时间
适用材料或用具
灼烧灭菌
酒精灯火焰的充分燃烧层
直至烧红
接种环、接种针或其他金属工具
干热灭菌
干热灭菌箱内，160～170℃
1～2h
玻璃器皿（吸管、培养皿）
和金属用具等
高压蒸汽灭菌
100kPa，121℃
15～30min
培养基等
3.（2018全国3卷）回答下列与酵母菌有关的问题：
（1）分离培养酵母菌通常使用____________（填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麦芽汁琼脂”）培养基，该培养基应采用________灭菌法灭菌。
若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_______________。
（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进______________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；
若进行厌氧培养，可促进_________（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。
（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是______________________。
【答案】
（1）.麦芽汁琼脂
（2）.高压蒸汽（3）.由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体（4）.菌体快速增殖（5）.乙醇产生（6）.酵母菌分解葡萄糖会产生CO2，CO2使面包松软
【解析】【分析】本题主要考查酵母菌培养和分离的有关知识。
酵母菌是兼性厌氧型的单细胞真菌，在有氧条件下，进行有氧呼吸产生H2O和CO2，释放能量多，细胞增殖快；
在无氧条件下，进行无氧呼吸，产生酒精和CO2，释放能量少，细胞增殖慢；
常用的灭菌方法有：
灼烧灭菌（主要用于接种工具灭菌）、干热灭菌（用于待检灭菌的物品如金属、玻璃、陶瓷制品）、高压蒸汽灭菌（适用于培养基灭菌）；
平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
在数次划线后，就可以得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落；
牛肉膏蛋白胨培养基属于细菌培养基，麦芽汁琼脂培养基适合培养真菌，MS培养基是植物组织培养使用的培养基。
（1）麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高，而且含糖量高，更适合酵母菌；
该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌；
若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落；
（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，进行有氧呼吸产生H2O和CO2，释放能量多，细胞增殖快；
若进行无氧培养，进行无氧呼吸，产生酒精和CO2，释放能量少，增殖慢；
（3）制作面包时，在面粉中添加一定量的酵母菌，因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖，产生二氧化碳，二氧化碳是气体，遇热膨胀而形成小孔，使得面包松软多孔。
【点睛】要注意区别三种培养基的用途；
要知道酵母菌的无氧呼吸产生酒精和CO2，不是乳酸。
4.（2018江苏卷）31.酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。
有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。
研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。
下图所示为操作流程，请回答下列问题：
（1）配制培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的，及时对培养基进行分装，并进行灭菌。
（2）取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，在步骤③中将温度约（在25℃、50℃或80℃中选择）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。
（3）挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。
下列叙述合理的有。
a．为保证无菌操作，接种针、接种环使用前都必须灭菌
b．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落
c．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母细胞中甲醇的含量
d．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株
（4）步骤⑤中，为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和供应。
为监测酵母的活细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，经等体积台盼蓝染液染色，用25×
16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数，理论上色细胞的个数应不少于，才能达到每毫升3×
109个活细胞的预期密度。
【答案】
（8分）
（1）pH高压蒸汽（湿热）
（2）50℃
（3）a、b、d
（4）氧气无30
【解析】【分析】配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培养基的分装→包扎→灭菌。
据图分析，从土壤样品中分离该类酵母菌的实验流程为：
称量土壤→梯度稀释→平板浇注分离→划线纯化→扩大培养。
（1）配制培养基的操作步骤为称量→溶化→定容→调pH→培养基的分装→包扎→灭菌，因此微生物的培养基配制好后应该先调节pH，再分装。
常见的灭菌方法有：
干热灭菌、高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌。
培养基适宜用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
（2）在步骤③中，待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板。
（3）在划线过程中，接种针、接种环使用前都必须灭菌，以防止杂菌污染，a正确；
划线时应避免划破培养基表面，否则将不能形成正常菌落，b正确；
该实验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌，不需要测定酵母菌中的甲醇含量，c错误；
培养基中的甲醇浓度越高，此种培养基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越强，因此可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株，d正确。
（4）酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖，因此为使酵母数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和氧气供应；
台盼蓝是大分子物质，不能将活细胞染色，再根据25×
16型的血球计数板：
1毫升悬液中待测标本（菌体）总数=80小方格内菌体数/80×
400×
104×
稀释倍数。
而台盼蓝与菌液等体积加入，因此要达到每毫升3×
109个活细胞的预期密度，理论上无色细胞数应该不少于（3×
109）÷
（1000×
2×
400÷
80）=30个。
【点睛】解答本题的关键是掌握微生物的培养基配制过程、灭菌、接种等，并能够利用公式计算血细胞计数板中活菌的数目。
5.（2018海南卷）葡萄酒是葡萄汁经酵母菌发酵而成的。
酿制葡萄酒的两个简易装置如图所示。
（1）试管中的X溶液有助于维持甲装置的瓶中气压相对稳定，与乙装置相比，用甲装置酿制葡萄酒的优点是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（答出两点即可）。
（2）葡萄汁装入甲装置时，要留有约1/3的空间，这种做法的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿（答出两点即可）。
（3）某同学若用乙装置进行发酵，并设置两个不同处理组（乙A和乙B），乙A装置中保留一定量的氧气，乙B装置中没有氧气。
在其他条件相同且适宜的情况下，测得一段时间内乙A和乙B中酒精含量的变化趋势及乙A中氧气含量的变化趋势如曲线图所示。
图中曲线①、②、③依次表示＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿含量的变化趋势。
（4）从细胞呼吸类型看，酵母菌属于＿＿＿＿生物；
从同化作用的类型看，酵母菌属于＿＿＿＿（填“自养”或“异养”）生物。
答案：
（1）不需要开盖放气；
避免了因开盖引起的杂菌污染
（2）为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气；
防止发酵旺盛时汁液溢出
（3）乙A中的氧气 乙B中的酒精 乙A中的酒精
（4）兼性厌氧 异养
2017-2010年
一、选择题
1．（2017江苏）下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是
A．控制发酵温度的主要目的是腐乳调味
B．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用
C．毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉
D．成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生
2．（2017江苏）固定化单宁酶应用于茶饮料加工，可消除其中的苦涩味。
下列有关叙述正确的是
A．在单宁酶纯化时可采用透析法去除杂蛋白
B．化学结合法比吸附法对单宁酶活性影响更小
C．温度、pH和重金属离子都可能影响固定化单宁酶活性
D．酶的高效性决定固定化单宁酶不会降解茶饮料中的有益成分
3．（2017江苏）下列关于“酵母细胞的固定化技术”实验的叙述，正确的是
A．活化酵母时，将适量干酵母与蒸馏水混合并搅拌成糊状
B．配制CaCl2溶液时，需要边小火加热边搅拌
C．将海藻酸钠溶液滴加到CaCl2溶液时，凝胶珠成形后应即刻取出
D．海藻酸钠溶液浓度过高时凝胶珠呈白色，过低时凝胶珠易呈蝌蚪状
4．（2017江苏）下图是探究果酒与果醋发酵的装置示意图。
下列相关叙述正确的是
A．改变通入气体种类，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
B．果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸
C．果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关
D．气体入口与气体出口可以交换使用
5．（2016江苏）下列关于中学“腐乳的制作”实验，叙述正确的是
A．加盐主要是为了调节水分，利于毛霉生长
B．加料酒主要是为了灭菌，避免腐败变质
C．发酵过程中起主要作用的是乳酸杆菌
D．实验室制作的腐乳不宜直接食用
6．（2016四川）下列有关实验操作或方法所导致结果的描述，不正确的是
A．用纸层析法分离色素时，若滤液细线画得过粗可能会导致色素带出现重叠
B．用葡萄制作果醋时，若先通入空气再密封发酵可以增加醋酸含量提高品质
C．提取胡萝卜素时，若用酒精代替石油醚萃取将会导致胡萝卜素提取率降低
D．调查人群中色盲发病率时，若只在患者家系中调查将会导致所得结果偏高
7．（2015江苏）关于“腐乳的制作”实验，下列叙述错误的是
A．将腐乳坯堆积起来会导致堆内温度升高，影响毛霉生长
B．腐乳坯若被细菌污染，则腐乳坯表面会出现黏性物
C．勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝的生长
D．装坛阶段加入料酒，可有效防止杂菌污染
8．（2015江苏）如图为苹果酒的发酵装置示意图，下列叙述错误的是
A．发酵过程中酒精的产生速率越来越快
B．集气管中的气体是酵母菌无氧呼吸产生的
C．发酵过程中酵母种群呈“J”冶型增长
D．若发酵液表面出现菌膜，最可能原因是发酵瓶漏气
9．（2015江苏）图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示意图，下列叙述正确的是
A．图1、2中加入蒸馏水稀释的目的相同
B．图1中完成过滤之后保留滤液
C．图2中完成过滤之后弃去滤液
D．在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质
10．（2014江苏）（多选）某同学设计了下图所示的发酵装置,下列有关叙述正确的是
A．该装置可阻止空气进入，用于果酒发酵
B．该装置便于果酒发酵中产生的气体排出
C．去除弯管中的水，该装置可满足果醋发酵时底层发酵液中大量醋酸菌的呼吸
D．去除弯管中的水后，该装置与巴斯德的鹅颈瓶作用相似
11．（2014江苏）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”冶实验叙述,错误的是
A．酵母和菜花均可作为提取DNA的材料
B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸馏水
C．向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，可见玻棒上有白色絮状物
D．DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝
12．（2014广东）下列叙述错误的是
A．醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸
B．酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖汁产生酒精
C．泡菜腌制利用了乳酸菌的乳酸发酵
D．腐乳制作利用了毛霉等微生物的蛋白酶和脂肪酶
13．（2014江苏）下列关于加酶洗衣粉的叙述,正确的是
A．高温易使酶失活,因此冷水洗涤去污效果应该比温水好
B．洗衣粉中表面活性剂对碱性蛋白酶活性有一定的促进作用
C．在pH低于7.0的自来水中,碱性蛋白酶依然能起作用
D．洗衣粉中酶主要是通过快速分解溶在水里的污渍发挥作用
14．（2013江苏）某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。
下列叙述正确的是
A．培养基分装到培养皿后进行灭菌
B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线
C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养
D．培养过程中每隔一周观察一次
15．（2013江苏）某同学用洋葱进行DNA
粗提取和鉴定实验，操作错误的是
A．
加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨
B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的
DNA
C．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌
D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热
16．（2013四川）在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，下列生命活动不会同时发生的是：
A．细胞的增殖和分化B．光能的吸收与转化
C．ATP的合成与分解D．基因的突变与重组
17．（2013江苏）某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵实验。
下列相关叙述正确的是
A．酵母菌是嗜温菌，所以果酒发酵所需的最适温度较高
B．先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵
C．与人工接种的发酵相比，自然发酵获得的产品品质更好
D．适当加大接种量可以提高发酵速率、抑制杂菌生长繁殖
18．（2013北京）关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是
A．噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统
B．提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异
C．成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透（过）性
D．PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应的模板
19．（2013江苏）下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是
A．可用包埋法制备固定化酵母细胞
B．反应产物对固定化酶的活性没有影响
C．葡萄糖异构酶固定前后专一性不同
D．固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应
20．（2013重庆）某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材
愈伤组织培养
出芽
生根
移栽”。
下列有关叙述，错误的是
A．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害
B．在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞
C．出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控
D．生根时，培养基通常应含α-萘乙酸等生长素类调节剂
21．（2012江苏）下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是
A．先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度
B．实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度
C．相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉
D．衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果
22．（2012北京）高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是
A．将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中
B．将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上
C．将转基因植物叶片接种到无菌培养基上
D．将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上
23．（2012江苏）（多选）下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是
A．在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长
B．条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸
C．果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小
D．将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
24．（2012江苏）下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是
A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药
C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌
25．（2011广东）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是
A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂
B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少
C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测
D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢
26．（2010广东）（双选）小李尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行试验（如图），恰当的做法是
A．加入适量的酵母菌
B．一直打开阀b通气
C．一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟
D．把发酵装置放到4℃冰箱中进行试验
27．（2011江苏）下列有关植物组织培养的叙述，正确的是
A．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞
B．二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株
C．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子
D．植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选二获得
28．（2011重庆）下列有关细菌培养的叙述，正确的是
A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长
C．向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长
D．在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动
29．（2011江苏）下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述，正确的是
A．腐乳制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
30．（2011江苏）下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是
A．酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶
B．透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离和纯化
C．棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤
D．多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层
31．（2010北京）有家庭中用鲜葡萄制作果酒时，正确的操作是
A．让发酵装置接受光
照B．给发酵装置适时排气
C．向发酵装置通入空气D．将发酵装置放在45℃处
32．（2010江苏）下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A．过程①和②都只能发生在缺氧条件下
B．过程①和都③只发生在酵母细胞的线粒体中
C．过程③和④都需要氧气的参与
D．过程①~④所需的最适温度基本相同
33．（2010江苏）（多选）如图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是
图1图2
A．刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液-
B．图1中X溶液为
溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
二、非选择题
34．（2017全国1）某些土壤细菌可将尿素分解成
和NH3
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