现代生物饵料培养学Word文档下载推荐.docx

1、鲍鱼苗（稚鲍）：底栖生活，选用底栖生物饵料。3营养丰富容易被养殖动物消化吸收，具有较高的营养价值，使养殖动物生长迅速。营养价值：（1）测定营养成分：蛋白质（protein ），脂肪（ lipid ）碳水化合物（carbohydrate），维生素（vitamins）脂肪酸（fatty acid）， 特别是高度不饱和脂肪酸 High unsaturated fatty acid（HUFA）气相色谱-质谱仪（GC-MS Gas Chromatography-Mass Spectrometer）：测脂肪酸傅立叶变换红外显微镜（FT-IR spectroscopy - Fourier transform

2、 infrared spectroscopy）：可测蛋白质、脂肪、碳水化合物等的相对含量 （2）投喂效果实验： 体长、体重增加的快慢等。4. 生物饵料及其代谢产物无毒或毒性很小，使养殖动物具有较高的成活率。例如微囊藻和螺旋藻。 5生物饵料的生活史短，生殖力强。例如球等鞭金藻。6对环境的适应性（对温度、盐度、光照强度等）和抗逆性强，易于大量培养（large-scale culture），培养达到的密度大，产量高。例如轮虫。（二）生物饵料的大量培养技术研究生物饵料的基本生物学资料：形态、分类、分布种群的生理生态特证、生殖力、抗逆性大量培养的技术性指标（三）生物饵料的营养价值评价：筛选、定向培养、营

3、养强化第二节 生物饵料在水产养殖中的应用贝类育苗：微藻，常用硅藻类、金藻类和绿藻类鲍鱼（底栖种类）育苗：底栖硅藻甲壳类（虾、蟹等）育苗：微藻、轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类等鱼类育苗：微藻、轮虫、卤虫的无节幼体、桡足类、枝角类、糠虾类等海参育苗：角毛藻、盐藻（杜氏藻）、底栖硅藻等。第三节 生物饵料培养未来发展方向一、生物饵料培养的中长期目标生物饵料规模化、稳定性、高密度培养技术饵料的营养强化新型生物饵料的筛选富含HUFA（High Unsaturated Fatty Acid）微藻品系的筛选生物饵料携带细菌数量的控制生物饵料在自然条件下的人工培养和增殖，人工生态育苗生物饵料的浓缩和保存二、生物饵

4、料培养的终极目标苗种的饵料问题：水产苗种规模化和产业化的主要制约因素微粒饲料的完全取代：全价微粒饲料目前存在的问题：要求的粒径小，加工工艺复杂，微粒饲料的均质性难以保证营养成分在水中的稳定性难以保证微粒饲料在水中的悬浮性难以保证对鱼虾蟹幼体的营养需求了解较少。第一章 微藻培养第一节 概 述一、微藻培养的发展概况微藻（microalgae）: 指那些单细胞或数个细胞组成的微小藻类。16世纪：墨西哥人将螺旋藻晒干制成食品。19世纪末：开始进行微藻的培养，小球藻、栅藻等，作为植物生理学的材料。20世纪初：开始进行作为水产饵料的微藻培养。第二次世界大战后：开展小球藻培养研究，代替粮食和饲料。20世纪8

5、0年代末：开始进行微藻的异养培养（利用工厂的发酵设备）。我国的微藻事业：20世纪50年代后期：开展大规模小球藻培养。70年代后期：将螺旋藻引入我国。目前大规模培养的种类：螺旋藻、盐藻等。微藻产业发展较快的国家：以色列、日本、美国等。培养的主要种类：螺旋藻、盐藻、小球藻等。目前国内外水产养殖中，常用的微藻隶属于7个门，几十个属。2、微藻的应用概述1 作为人类的营养食品和保健食品（螺旋藻、小球藻等）2 作为药源生物资源（抗细菌、抗病毒、抗肿瘤、抗心脑血管疾病）3 作为人类食品添加剂（调色、调味）4 作为水产动物的饵料（鲜活微藻、贮存微藻）5 用富含EPA/DHA的微藻强化轮虫、卤虫6 作为水产动物

6、饵料添加剂和禽、畜饲料添加剂7 利用微藻提取EPA和DHA、色素、甘油等生物活性物质8 废水处理9 植物生长调节剂10 作为生物柴油的原料（高效能源微藻）11 利用微藻减排CO2。12 微藻的危害（微藻毒素、水华、赤潮等）第二节 微藻的培养种类概述 硅藻类：三角褐指藻、小新月菱形藻、牟氏角毛藻、纤细角毛藻、中肋骨条藻 绿藻类：亚心形扁藻、塔胞藻、盐藻、雨生红球藻、小球藻、微绿球藻 金藻类：球等鞭金藻、湛江等鞭藻、绿色巴夫藻 黄藻类：异胶藻 蓝藻类：钝顶螺旋藻一、三角褐指藻 （Phaeodactylum tricornutum）1.分类地位：硅藻门/羽纹硅藻纲/褐指藻目/褐指藻科/褐指藻属2.形

7、态特征： 细胞梭形、三角形、卵形。 梭形细胞:长约20微米。 三出放射形细胞:臂长皆为6-8微米。 卵形细胞较少见，在平板培养基上培养可出现卵形细胞。3.繁殖方式：无性的二分裂繁殖。因无硅质壳，分裂时细胞不会缩小。4.生态条件：温度：生长适温5-25，最适温度10-20，超过25时停止生长，最终大量死亡。盐度：生存盐度9-92，最适盐度25-32。光照强度：适应光照强度范围1000-8000lx，最适范围3000-5000lx，切忌阳光直射。酸碱度：适应的pH范围为7-10，最适pH 7.5-8.5 。目前，三角褐指藻有多个品系（strains），如MACC/B114 MACC/B118 MA

8、CC/B221 MACC/B229 UTEX640 2038 品系不同，细胞的形态及营养成分都有差异，应用时可根据需要选择合适的品系。 MACC: Microalgae Culture Center in Ocean University of China B: Bacillariophyta （硅藻门） UTEX：The Culture Collection of Algae at the University of Texas at Austin （USA）二、小新月菱形藻（Nitzschia closterium f.minutissima）硅藻门/羽纹硅藻纲/管壳缝目/菱形藻科/菱形藻

9、属 小新月菱形藻俗称“小硅藻”。 单细胞,细胞中央膨大,呈纺锤形,两端渐尖。 体长12-23微米，宽2-3微米。 细胞中央具一细胞核。 色素体2片，黄褐色，位于细胞中央细胞核两侧。生长适温528 ，最适温度1520 ，超过28时停止生长，最终大量死亡。生存盐度18-61.5，最适生长盐度25-32。最适范围3000-8000lx，切忌阳光直射。三角褐指藻和小新月菱形藻：培养较早，培养方法比较成熟。具有生长快、浓度高、容易培养、营养丰富的特点，是贝类和虾类幼体的良好饵料。低温种（low temperature-tolerance species）, 25以上生长即受到严重抑制。三、牟氏角毛藻 （

10、Chaetoceros muelleri）硅藻门/中心硅藻纲/盒形藻目/角毛藻科/角毛藻属 细胞：短圆柱形，壳面大都是椭圆形。壳环面呈长方形至四角形。 细胞小型，多数呈单细胞，有时2-3个组成群体。 角毛细长，约20-30微米。 色素体1个，呈片状，黄褐色当环境不良时可形成休眠孢子，此外，也能形成复大胞子。高温种类，生长适温10-40 ，最适温度25-35。半咸水种类，适宜盐度2.56-35，最适盐度22-26。适宜光照强度范围2000-15000lx，最适范围6000-10000lx。适应的pH范围为6.4-9.5，最适pH 8.0-8.9 。四、纤细角毛藻（Chaetoceros grac

11、ilis） 细胞小型，多呈单细胞，有时23个细胞组成链状，大小574微米 （角毛长3037微米）。 本种是1988年从美国Solar Energy Institute引进的，并已在国内育苗场推广应用。一般是无性二分裂繁殖，在不良环境下可形成休眠孢子。同牟氏角毛藻。高温种类。牟氏角毛藻和纤细角毛藻可以作为海参（sea cucumber）、甲壳类（crustaceans） 等幼体的饵料。耐高温种类 （high temperature-tolerance species） ，适合夏季培养。五、中肋骨条藻（Skeletonema costatum）硅藻门/中心硅藻纲/圆筛藻目/骨条藻科/骨条藻属 细胞

12、为透镜形或圆柱形，直径为6-7微米。 壳面圆而鼓起，着生一圈细长的刺，与临细胞的对应刺组成长链。刺的数目为8-30条。 色素体通常2个，位于壳面各向一面弯曲。一般为无性的二分裂繁殖。复大孢子是经过卵配形成的。复大孢子的形成与温度、盐度和光照有关。生长适温1034 ，最适温度2030 。生存盐度7-50，最适生长盐度25-30。适应范围500-10000lx。最适pH 7.5-8.5。中肋骨条藻： 广温广盐种类，是对虾幼体、缢蛏、牡蛎等的优良饵料。六、亚心形扁藻（Platymonas subcordiformis）绿藻门/绿藻纲/团藻目/衣藻科/扁藻属国外多使用另一分类系统，该系统根据细胞前端的

13、凹陷独立为一纲，即：绿枝藻纲 Prasinophyceae四片藻属 Tetraselmis因此扁藻属Platymonas与四片藻属Tetraselmis 为同属异名。扁藻的形态特征： 单细胞，正面观为卵形、椭圆形或心形。 具4条等长的顶生鞭毛（flagella） ，约等于或略短于体长。 色素体大，呈杯状（cup-shaped） ，内有一个蛋白核 （pyrenoid） 。 眼点（eyespot） 1个，细胞核1个。我国作为饵料培养的种类还有青岛大扁藻，比亚心形扁藻大。无性繁殖，细胞纵分裂成两个（少数情况下四个）子细胞。当环境不良时，能形成休眠孢子，椭圆形，一个或两个。生长适温730 ，最适温度2

14、028。对低温的适应能力强，对高温的适应能力差。生存盐度8-80，最适生长盐度30-40。适应范围1000-20000lx，最适范围5000-10000lx。适应的pH范围为6-9，最适pH 7.5-8.5。七、塔胞藻 （Pyramidomonas sp.）绿藻门/绿藻纲/团藻目/盐藻科/塔胞藻属 单细胞，细胞呈倒卵形，少数为半球形。 细胞前端具一圆锥形凹陷，由凹陷中央向前伸出4条鞭毛。 色素体杯状，基部有一个蛋白核。 细胞单核，位于细胞的中央偏前端。 细胞裸露，不具细胞壁 （Cell wall）。主要为纵分裂繁殖。同扁藻。扁藻和塔胞藻适应力较强，生长繁殖迅速，较容易培养，是亲贝和许多贝类后期

15、幼虫的良好饵料。八、盐藻（Dunaliella spp.） 绿藻门/绿藻纲/团藻目/盐藻科/盐藻属（杜氏藻属） 单细胞，无细胞壁 （ no cell wall） ，体形变化大，通常为梨形、椭圆形等。 具两条等长顶生鞭毛 （two equal flagella） ，比藻体约长1/3。 色素体杯状，内有一个蛋白核。 一般细胞长12-21微米，宽约6-13微米。主要为无性纵分裂繁殖。在环境不良时进行有性生殖。最适温度2035 。最适盐度60-70。最适范围4000-8000lx，切忌阳光直射。对pH适应性强，可在高pH的碱性条件下生长，最适pH 7.0-8.5 。盐藻细胞内能储存大量经济价值较高的甘

16、油和-胡萝卜素等有机化合物，可通过大量培养杜氏藻提取-胡萝卜素。九、雨生红球藻 （Haematococcus pluvialis）绿藻门/绿藻纲/团藻目/红球藻科/红球藻属 单细胞，细胞为椭圆形到卵形。 细胞壁与原生质体之间有一定间距，充满胶状物质。 两条等长鞭毛，约等于体长。 环境不良时，产生厚壁孢子，积累大量的虾青素。 淡水种。环境适宜时，游动细胞以无性繁殖方式产生2、4、8个游孢子。经一定时间的生长发育，游孢子突破孢子囊壁释放出来，成为新的游动细胞。生长适温2028 ，超过30时生长受到抑制。淡水种。最适光强1500lx左右，高于2000lx则抑制其生长。最适pH 7.8左右。雨生红球藻

17、：含大量的虾青素（细胞干重的2%）是目前已知的虾青素含量最高的微藻虾青素的用途：虾青素是鲑鳟鱼饲料中必不可少的成分作为天然抗氧化剂应用于食品、医药、化妆品。十、小球藻（Chlorella spp.）绿藻门/绿藻纲/绿球藻目/小球藻科/小球藻属 单细胞，小型，细胞直径2-12m。 细胞球形或椭圆形。 色素体一个，周生，杯状或片状。 大多数淡水生活，少数海水中生活。当细胞分裂时，原生质体分裂为2、4、8、个似亲孢子，等到母细胞壁破裂，似亲孢子就释放出来。生长适温1036 ，最适温度25-30 。适应盐度范围广。经驯化可在淡水及盐度为45的海水中生长繁殖。最适范围3000-10000lx。适应的pH

18、范围为5.5-8.0。小球藻蛋白质含量丰富，可生产保健食品。在水产上，小球藻多用于培养轮虫十一、微绿球藻（Nannochloris oculata）绿藻门/绿藻纲/绿球藻目/绿球藻科/微绿球藻属 细胞球形，直径2-4微米 。 色素体一个，淡绿色，侧生。 眼点一个，圆形，淡橘红色。 无蛋白核，有淀粉粒1-3个，侧生。 细胞壁极薄，幼年细胞看不到，在-分裂之前才变明显。二分裂繁殖，细胞分裂为2个子细胞。生长适温1036 ，最适温度2530。适宜盐度范围4-36。最适光照强度为10000lx左右。最适pH 7.5-8.5 。微绿球藻多用于培养轮虫十二、 球等鞭金藻（Isochrysis galban

19、a）金藻门/金藻纲/等鞭金藻科/等鞭金藻属 单细胞，细胞裸露，椭圆形、卵形、球型等。 具2条等长鞭毛（two equal flagella） 色素体1-2个。 贮藏物为油滴和白糖素，白糖素位于细胞后端。主要为无性的二分裂繁殖。环境不良时形成特殊的孢囊-内生孢子。球等鞭金藻有三个常见的生态品系球等鞭金藻3011（高温品系 high temperature-tolerance species ）球等鞭金藻8701（低温品系 low temperature-tolerance species ）球等鞭金藻塔溪堤品系（Tahitian Isochrysis galbana），简称塔溪堤，最初从塔溪堤（

20、南太平洋的一个岛屿）养殖水体分离筛选而得，属高温品系。十三、 湛江等鞭金藻（Isochrysis zhanjiangensis） 多为卵形或球形，大小为6756微米。 具有两条等长的鞭毛，从细胞前端伸出。 色素体两片，侧生，金黄色。 细胞核位于两片色素体之间。 一个或几个白糖素颗粒, 位于细胞后部。主要为无性二分裂繁殖。生长适温935 ，最适温度2532 。生存盐度10-50，最适生长盐度22.7-35.8。最适范围5000-10000lx。球等鞭金藻和湛江等鞭金藻可以作为扇贝（scallop）、牡蛎（oyster）等多种双壳类（bivalves） 幼虫（larvae）的饵料，效果良好。大多数

21、等鞭藻富含DHA。十四、绿色巴夫藻（Pavlova viridis）金藻门/金藻纲/巴夫藻属 绿色巴夫藻，又称3012，是1982年从山东海阳县的海水样品中分离而得。 无细胞壁（cell wall），正面观呈圆形，侧面观为椭圆形或倒卵形。 细胞大小为6.04.84.0微米。 具2条不等长的鞭毛和1条附鞭。 色素体一个，裂成2大叶围绕着细胞。 绿色巴夫藻的群体细胞呈淡黄绿色至绿色。绿色巴夫藻可用于海湾扇贝（Bay scallop）和中国对虾育苗中，效果良好。生长适温1035 ，最适温度1530 。生存盐度5-80，最适生长盐度10-40。最适范围4000-10000lx。十五、异胶藻（Heter

22、ogloea sp.）黄藻门/黄藻纲/异球藻目/异胶藻属 细胞长圆形或椭圆形。长45.5微米，宽2.54微米 。 色素体1个，片状侧生，占藻体大部分，呈黄绿色。 藻液颜色随着培养时间的延长从绿色变成黄色、土黄色。 可作为牡蛎（oyster）、贻贝（mussel）、菲律宾蛤仔（clam）、泥蚶（mud clam） 等幼体的饵料。生长适温835 ，最适温度1533 。生存盐度13-32。适应范围1000-8000lx。最适pH 7.5-8.2 。十六、钝顶螺旋藻（Spirulina platensis）蓝藻门/蓝藻纲/颤藻目/螺旋藻属 藻体淡蓝绿色，细胞圆柱形。 藻体为单列细胞组成的不分支的丝状体

23、，丝状体外无胶质鞘。 藻丝螺旋状卷曲。 无异形胞和厚壁孢子（No heterocysts and resting spores） 。 海、淡水中均有分布。主要为无性二分裂繁殖，有时也以藻殖段繁殖。 分布广，适应能力强，最初生长于热带高温的碱水湖里，喜高温、高碱和强光。实验室长期培养藻丝易变直。 温度：生长适温1540 ，最适温度3537 。 盐度：可在淡水中培养，也可驯化后在盐度为35的海水中生长。 光照强度：最适范围30000-35000lx。 酸碱度：最适pH 8.5-10.5 。螺旋藻营养丰富、蛋白质含量高（达50%以上）容易消化、采收方便，多作为营养保健品。在水产上，螺旋藻可作为鱼、虾

24、饲料添加剂。第三节 影响微藻生长繁殖的因子一、 光照（Light）1. 光源太阳光（主要）、人工光源（补充光源）常用的人工光源有:日光灯（fluorescent lamp）、白炽灯（incandescent lamp, not recommended）、金属卤素灯（metal halide lamp）2. 光质在植物的光合作用中，光质（light spectrum）和光量（light intensity）都是重要的。光质：就是不同波长的光线，在太阳光光谱中，可分为3个主要部分，波长由短到长分别为紫外线、可见光（400-700nm）和红外线。光合有效辐射（photosynthetically a

25、ctive radiation PAR） ：400-700nm3. 光在藻细胞悬浮液中的穿透光线进入藻液中，由于藻细胞的吸收和散射，随着深度的增加，光照强度迅速降低。 Light intensity plays an important role, but the requirements vary greatly with the culture depth and the density of the algal culture. At higher depths and cell concentrations the light intensity must be increased to penetrate through the culture （e.g. 1000lx is suitable for small flasks, 5000-10000lx is required for larger volumes）. 4.光强光量：是指光线总强度而言，称光照强度。光照强度用照度计（lx light meter）测定，其单位是勒克司（lx）。在植物生理研究领域及国外：光照强度常用mol photons.m-2.s-1