茶叶及相关制品中二氟尼抑等18种化合物的测定Word下载.docx

1、m，有机相。4仪器和设备4.1高效液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源（ESI源）。4.2粉碎机。4.3电子天平：感量分别为0.0001 g和0.01 g。4.4超声波水浴。5试样制备5.1饮料充分混匀，直接取用。5.2茶叶及相关制品取适量有代表性的试样，粉碎机粉碎后过40目筛，装入洁净容器中，密封并标记。6分析步骤6.1样品提取6.1.1饮料准确称取1 g（精确至0.01 g）试样置于50 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2），摇匀（固体饮料需充分溶解），再用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀，经 0.22 m滤膜过滤，取滤液，根据实际浓度适当

2、的稀释至工作曲线线性范围内，供高效液相色谱-串联质谱测定。6.1.2茶叶及相关制品准确称取1 g（精确至0.01 g）试样置于25 mL容量瓶中，加入20 mL甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2），摇匀，超声30 min，冷却至室温后，用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀静置10 min，准确吸取2 mL上清液至10 mL容量瓶中，用甲醇-水溶液（4+1）（3.2.2）定容至刻度，混匀，经 0.22 6.2测定6.2.1仪器参考条件6.2.1.1液相色谱条件a） 色谱柱：C18柱，100 mm 2.1 mm，粒径 2.2 m，或性能相当者。b） 流动相：A为乙腈（3.1.1）

3、，B为含0.05 %甲酸的2 mmol/L乙酸铵溶液（3.2.1），梯度洗脱程序见表1。c） 流速：0.3 mL/min。d） 柱温：35 。e） 进样量：2 L。表1 梯度洗脱程序时间 （min）流动相A（%）流动相B（%）5951111314166.2.1.2质谱条件a） 离子源：电喷雾离子源（ESI源）。b） 检测方式：多反应监测（MRM）。c） 扫描方式：正离子模式和负离子模式。 d） 气帘气（CUR）、雾化气（GS1）、辅助气（GS2）、碰撞气（CAD）均为高纯氮气或其他合适气体，使用前应调节相应参数使质谱灵敏度达到检测要求，电喷雾电压（IS）、去簇电压（DP）、碰撞能量（CE）等参

4、数使用前应优化至最佳灵敏度，监测离子对和定量离子对等信息详见附录B。6.2.2定性测定按照上述条件测定试样和混合标准工作液，如果试样中的质量色谱峰保留时间与混合标准工作液中的某种组分一致（变化范围在2.5%之内）；试样中定性离子对的相对丰度与浓度相当的混合标准工作液的相对丰度一致，相对丰度（k）偏差不超过表2规定的范围，则可判定为试样中存在该组分。表2 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度（%）k50%50%k20%20%k10%k10%允许的相对偏差（%）202530506.2.3定量测定将混合标准系列工作溶液（3.4.4）按仪器参考条件（6.2.1）进行测定。以混合标准系列工作

5、溶液的浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标绘制标准工作曲线。若试样检出与混合标准系列工作溶液一致的化合物，根据标准工作曲线按外标法以峰面积计算得到其含量。二氟尼柳等18种标准物质色谱图见附录 C。7结果计算结果按式（1）计算：（1）式中：X 试样中各待测物的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；c 从标准工作曲线中读出的供试品溶液中各待测组分的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；V 试样溶液最终定容体积，单位为毫升（mL）；m 称样量，单位为克（g）；K 试样制备过程中的稀释倍数。计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。8检测方法的灵敏度、准确度、精密度

6、8.1灵敏度当饮料称样量为1 g，定容体积为50 mL，本方法中各化合物的定量限如下：美洛昔康、舒林酸、吡罗昔康、贝诺酯、依托考昔、奥沙普秦、双氯芬酸钠、依托度酸、非普拉宗定量限为0.2 mg/kg；二氟尼柳、醋氯芬酸、萘普生、芬布芬、尼美舒利、氟比洛芬、吲哚美辛、萘丁美酮、塞来昔布定量限为1.0 mg/kg。当茶叶及相关制品称样量为1 g，定容体积为125 mL，本方法中各化合物的定量限如下：美洛昔康、舒林酸、吡罗昔康、贝诺酯、依托考昔、奥沙普秦、双氯芬酸钠、依托度酸、非普拉宗定量限为0.5 mg/kg；二氟尼柳、醋氯芬酸、萘普生、芬布芬、尼美舒利、氟比洛芬、吲哚美辛、萘丁美酮、塞来昔布定量

7、限为2.5 mg/kg。8.2准确度本方法在0.225 mg/kg添加浓度范围内，回收率为71%116%。8.3精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15 %。附录A二氟尼柳等18种化合物相关信息表A.1 18种化合物的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子质量二氟尼柳Diflunisal22494-42-4C13H8F2O3250.22美洛昔康Meloxicam71125-38-7C14H13N3O4S2351.43舒林酸Sulindac38194-50-2C20H17FO3S356.414吡罗昔

8、康Piroxicam36322-90-4C15H13N3O4S331.35醋氯芬酸Aceclofenac89796-99-6C16H13Cl2NO4354.186贝诺酯Benorilate5003-48-5C17H15NO5313.37依托考昔Etoricoxib202409-33-4C18H15ClN2O2S358.848萘普生Naproxen22204-53-1C14H14O3230.269芬布芬Fenbufen36330-85-5C16H14O3254.2810奥沙普秦Oxaprozin21256-18-8C18H15NO3293.32尼美舒利Nimesulide51803-78-2C1

9、3H12N2O5S308.3112氟比洛芬Flurbiprofen 5104-49-4C15H13FO2244.26双氯芬酸钠Diclofenac sodium15307-79-6C14H10Cl2NNaO2318.13依托度酸Etodolac 41340-25-4C17H21NO3287.3515吲哚美辛Indometacin53-86-1C19H16ClNO4357.79萘丁美酮Nabumetone42924-53-8C15H16O2228.2917非普拉宗Feprazone 30748-29-9C20H20N2O2320.3918塞来昔布Celecoxib 169590-42-5C17H

10、14F3N3O2S381.37A A附录B 参考质谱条件a）离子源：电喷雾离子源（ESI源）；b）检测方式：多反应监测（MRM）；c）扫描方式：正离子模式和负离子模式；d）电喷雾电压（IS）：5500 V（ES+）；-4500 V（ESI-）；e）气帘气（CUR）：35 psi；f）雾化器（GS1）：55 psi；g）辅助气（GS2）：h）离子源温度（TEM）：500 。表B.1 二氟尼柳等18种化合物定性、定量离子和质谱分析参数化合物名称电离母离子子离子去簇电压碰撞能量保留时间方式（m/z）（V）（min）ESI-248.9204.9*60278.19156.945ESI+352115.0*

11、80228.4114126357.1233.1*105668.58340.1332164.0*8.611212835474.9*8.93251.9314.1121.1*688.96272.1359280.1*160429.12252.161229170.0*9.42185255.1181.1*349.62237.1294.1103.1*909.93276.123306.9197.9*3610.15228.924氟比诺芬243198.9*179295.9251.9*10.26213.9286242.0*7010.2821233356296.9*10.42311.9229.1128.1*5510.

12、71171.1321.1265.1*10.95253.1382362.1*1104111.04282.1*定量离子对。注：（1）方法提供的监测离子对等测定条件为推荐条件，各实验室可根据所配置仪器的具体情况作出适当调整；在样品基质有测定干扰的情况下，可选用其他监测离子对。（2）为提高检测灵敏度，可根据保留时间分段监测各化合物。附录C 二氟尼柳等18种标准物质色谱图图C.1 18种标准物质总离子流色谱图1.二氟尼柳 2. 美洛昔康 3. 舒林酸4. 吡罗昔康 5. 醋氯芬酸 6. 贝诺酯7. 依托考昔 8. 萘普生 9. 芬布芬10. 奥沙普秦 11. 尼美舒利 12. 氟比洛芬13. 双氯芬酸钠 14. 依托度酸 15. 吲哚美辛16. 萘丁美酮 17. 非普拉宗 18. 塞来昔布图C.2 18种标准物质提取离子色谱图本方法负责起草单位：湖北省食品质量安全监督检验研究院。验证单位：大连市食品检验所、四川省食品药品检验检测院、辽宁省食品检验检测院、湖南省食品质量监督检验研究院、重庆市食品药品检验检测研究院。主要起草人：张莉、江丰、黎星、刘迪、余婷婷、唐昌云