病理技术专业知识1.docx

1、病理技术专业知识1（一）单纯固定液甲醛：1 浓度：40%，气体2 渗透力强，固定均匀，组织收缩小，3 不能使白蛋白和核蛋白沉淀4 保存脂类，必须用冷冻切片。是糖的保护剂5 可固定高尔基体，线粒体重铬酸钾1. 浓度：1%-3%水溶液，有毒，橘红色结晶2. 穿透速度快，几乎不收缩，经乙醇脱水后明显收缩，3. 未酸化的重铬酸钾不能使蛋白质沉淀，但可使蛋白质变为脂溶剂。酸化后可使蛋白质沉淀，此时染色体可被保存，但线粒体破坏。4. 固定高尔基体和线粒体有良好效果。5. 酸性染料着色好，碱性染料着色差6. 固定的组织需经流水冲洗12-24h，或用亚硫酸盐洗涤。苦味酸1. 黄色结晶体，是一种强酸，易燃易爆，

2、配成饱和溶液储藏2. 穿透慢，组织收缩明显，无明显硬化。3. 能沉淀一切蛋白质4对脂肪和类脂无固定作用。5. 可软化皮肤和火棉胶，不宜用火棉胶包埋6. 固定时间不宜超过24h，7. 固定的组织应尽快放入70%乙醇，滴加饱和碳酸锂或浓氨水，有助于除去苦味酸固定产生的黄色。升汞1. 浓度为5%-7%的水溶液，针状结晶2穿透力低，只宜固定薄片组织，单独应用组织收缩明显3, 对蛋白质有固定作用，4. 对类脂和糖类无固定作用5. 临用时加冰醋酸醋酸1. 刺激性气味的无色液体，低于15为冰醋酸5%的醋酸PH为2-8，可抑制细菌和酶的活性，可防止自溶。2. 穿透力强3 不能沉淀白蛋白，球蛋白，但能沉淀核蛋白

3、4 不能固定脂肪和酯，不能保存糖5 .固定线粒体和高尔基复合体不能用高浓度的醋酸，可较好的保存染色体6, 缺点是组织膨胀明显，尤其对于胶原纤维和纤维蛋白铬酸1. 为三氧化铬的水溶液，浓度0.5%-1%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混合 2 穿透力弱，一般组织需固定12-24h，固定的组织有收缩，3 能沉淀蛋白质，核蛋白固定良好。4 对脂肪无固定作用5 固定线粒体和高尔基复合体6. 宜避光保存，以防蛋白质溶解。7. 必须彻底流水冲洗（24h）。锇酸（四氧化锇）1.淡黄色结晶，剧毒，浓度1%-2%，强氧化剂，不能与乙醇，甲醛等混合2. 渗透力极弱，易使组织变硬，延长固定时间，组织的脆性增加，对染色

4、不利。3. 固定均匀，不沉淀蛋白质。4为脂类固定剂5. 适用于线粒体和质网的固定6. 为电镜研究的必须固定剂。7. 固定目的不同，配方和浓度根据需要改变8. 固定后对碱性染料亲和力强，细胞核的染色效果好9. 应在临用前前几天配制以保证充分溶解。丙酮1易挥发，易燃的无色液体，可与水，醇，氯仿，醚混合2. 渗透力强，对核的固定差3. 可使蛋白质沉淀4. 作用基本与乙醇相同，但对糖原无固定作用5广泛用于酶组织化学中各种酶的固定乙醇1. 无色液体，还原剂，可与水无限相溶，有固定兼脱水作用 用于固定的浓度为80%-95%2渗透力弱，固定速度较慢，易使组织变脆，无水乙醇固定时，穿透速度快，渗透力差，使组织

5、收缩3.，能沉淀白蛋白，球蛋白，核蛋白4. 用于糖原的固定5. 50%以上乙醇可溶解脂肪和类脂体，并可溶解血红蛋白，对其他色素也有破坏。三氯醋酸 1. 为无色易潮解的结晶体，水溶液为强酸性，易溶于醇和醚，应密封保存 2. 也是一种良好的脱钙剂 （二）混合固定液 B-5固定液（醋酸钠-升汞-甲醛） 1多用于固定淋巴组织， 2. 染色前应进行脱汞处理 3. 配方：无水醋酸钠1.25g，升汞6g，甲醛10ml，蒸馏水90ml.Bouin液1. 有一定毒性，应避免吸入或与皮肤接触2. 固定液偏酸，对抗原有一定损害，使组织收缩，不适宜标本的长期保存3. 固定效果好，组织细胞结构完整。细胞核着色鲜明，细胞

6、质着色较差。4. 对脂肪固定效果好，尤适用于含脂肪的淋巴结，乳腺组织和脂肪瘤标本5. 适用于结缔组织染色，尤其是三色染色更为理想。6. 配方：饱和苦味酸水溶液：甲醛水溶液：冰醋酸=15：5:：1Carnoy液1有防止乙醇的硬化和收缩作用，增加渗透力，外膜致密的组织可用其固定2. 固定速度快，3mm厚组织块1h即可固定，大块组织不超过4h。3，固定细胞质和细胞核，对于染色体固定佳，显示DNA，RNA效果好。4. 常用于糖原和尼氏体的固定5不能保存脂类，不适用脂肪染色。6. 配方：冰醋酸10ml，氯仿30ml，无水乙醇60ml Muller液1. 作用缓慢，固定均匀，组织收缩小2. 多用于媒染和硬

7、化神经组织3. 固定过程中，需常更换新鲜的液体4.配方：重铬酸钾2-2.5g，硫酸钠1.0g，蒸馏水100mlOrth液1. 渗透力强，组织收缩小2. 应临时配置，在暗处固定，固定24h左右，固定液变为黑色时不可用，固定后流水冲洗12-24h。3. 固定胚胎组织，神经组织。脂肪组织4. 配方：重铬酸钾2.5g，硫酸钠1.0g，蒸馏水100ml，37%-40%的甲醛10ml（用时加入）PFG液1. 适用于多种肽类抗原的固定，多用于免疫电镜研究2. 对细胞抗原性和结构保存好3. 配方：对苯醌20g，多聚甲醛15g，25%戊二醛40ml，0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液1000ml。PLP和PLPD

8、液1. 均含过碘酸盐2. 对细胞抗原性和结构保存好，适用于富含糖类组织的固定Rossman液1. 对糖原固定好，固定12-24h，用95%的乙醇洗2. 配方：无水乙醇苦味酸饱和液90ml，甲醛10mlZenker液1用于固定多种组织，对于病毒包涵体固定效果也较好2. 使细胞核和细胞质染色清晰，常用于三色染色，对免疫球蛋白染色最好3. 不适用含血量较多的标本，如充血的脾脏和肺梗死等标本4.不能用金属容器盛放，且固定后不能用金属镊夹取。4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液1. 适用于光镜免疫组织化学法，2. 动物先用此液灌注固定，取材后再用该液浸泡固定3. 可用于标本的较长时间的保存4%多聚甲

9、醛-磷酸二钠/氢氧化钠1. 适用于光镜和电镜免疫组织化学法，2. 用于免疫电镜时，应加入新鲜配置的戊二醛。使其终浓度为0.5-1%3. 性质温和，可长期保存组织。 4配置后PH值应调至7.2-7.4, 4保存甲醛-钙液. 适用于固定脂肪组织和组织化学染色乙醇-甲醛液 有脱水作用，对皮下组织中肥大细胞的固定好乙醚-乙醇液 渗透性强，固定效果好，用于细胞涂片的固定。去除甲醛色素：Verocay液脱汞盐结晶： Lugol液脱黑色素： 0.25%高锰酸钾蓝化作用： 稀氨水组织的脱水（一）乙醇 乙醇脱水的浓度：70%80%90%95%100%进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本应直接用无水乙醇固定，更换一次无

10、水乙醇脱水即可。（二）丙酮 与乙醇作用相似，但对组织块的收缩作用比乙醇更严重，快速脱水或固定兼脱水时应用，脱水时间为1-3h.丙酮可作为染色后的脱水剂，用于DNA和RNA染色。（三）异丙醇 是乙醇的良好替代品，不含水，可代替无水乙醇使用，对火棉胶和染料不溶，因此不能用于火棉胶包埋和染料配制。（四）正丁醇和叔丁醇（电镜标本制作时常用作中间脱水剂。） 正丁醇：无色液体，脱水能力较弱，可与水，乙醇和石蜡混合，因此，这种这种脱水的组织块可直接浸蜡包埋，叔丁醇：无毒，可与水，乙醇和二甲苯混合，与正丁醇相比，它不易使组织收缩或变硬，而且脱水后可不经透明直接浸蜡，（五）还氧已环还氧已环能于水和乙醇混合，也能

11、溶解石蜡，可代替乙醇进行脱水，也可代替二甲苯进行透明，不引起组织收缩和硬化，用于制备植物标本较好，易挥发，价格昂贵。（六）四氢呋喃 易于水，乙醇，丙醇和苯类混溶，对组织渗透快，易挥发，无毒，可用作封片溶剂，对染料不溶。（七）环己酮环己酮无毒，与苯，二甲苯，氯仿和石蜡混合，可代替无水乙醇脱水后直接浸蜡，组织块不会变硬。（八）松脂醇 可取代无水乙醇用作脱水剂和随后的浸透与包埋。树脂包埋法适用于：不脱钙骨髓活检组织，肝、肾穿刺活检和淋巴结组织等。常用的特殊染色技术一 结缔组织染色 Mallory三色 Masson三色 胶原纤维，网状纤维 蓝色 绿色 软骨，粘液，淀粉样 淡蓝色 神经胶质纤维，肌纤维

12、红色 红色髓鞘，红细胞 橘红色 橘红色 显示胶原纤维，网状纤维，弹性纤维三联染色胶原纤维：红，网状纤维：黑，弹性纤维：绿色肌肉和红细胞：淡黄色二 胶原纤维染色（一） 显示胶原纤维，细胞，肌肉的染色法1 试剂：Ponceau（丽春红）染色液：丽春红水溶液10-15ml，苦味酸饱和水溶液85-90mlVictoria blue(维多利亚蓝)：维多利亚蓝，70%乙醇2 结果：胶原纤维： 红， 细胞核和血细胞： 绿色肌肉： 黄色3注意事项：Ponceau染色后。不能与水接触，直接用无水乙醇冲洗脱水：胶原纤维切片的厚度需6um,: Victoria blue染色液应盛染色缸，进行染色。（二）天狼星红苦味

13、酸染色法1.试剂：天狼星红饱和苦味酸液： 0.5%天狼星红10ml，苦味酸饱和水溶液,90ml 天青石蓝液：天青石兰，铁明矾，蒸馏水，甘油，浓盐酸 2 结果：胶原纤维： 红， 细胞核和血细胞： 绿色其他： 黄色3注意事项：细胞核复染可以用Harris木精淡染：必须用偏光显微镜观察 三 网状纤维染色（一）Gomori银染色法1.结果：网状纤维： 黑色胶原纤维： 红，背景： 黄色3注意事项： 氨性银溶液：必须器皿洗干净，滴加氨水不能过量，冰箱保存 氧化液存放时间不能过长，以免失去氧化作用 丽春红复染用滴染方便，无水乙醇冲洗要倾斜（二）James染色法1.结果：网状纤维： 黑色胶原纤维： 红，背景：

14、 淡黄色3注意事项： 5%硝酸银使用时不能滴染 二氨银配制时，氨水要一滴一滴的加，以免浓氨水加的太多 甲醛液要新配制四：弹性纤维染色（一）维多利亚蓝染色结果：弹力纤维： 蓝色 细胞核： 红色注意事项：配制的溶液放置2周成熟后使用（二）Gomori醛复红染色法1试剂：醛复红染液：碱性复红0.5g，浓盐酸1ml，70%乙醇100ml，三聚乙醛1ml 室温下静置1-2日，待变为紫色即成熟，于冰箱保存备用。 橘黄G染液：2：对特殊的蛋白质及含硫酸根的粘多糖有很强的亲和力，和弹力纤维结合很紧。 对肥大细胞颗粒，脂褐素，HBsAg,胃主细胞，胰岛的细胞，脑垂体的嗜碱性细胞也能很好着色。3 固定液：以甲醛生理盐水固定的染色效果最佳。结果：弹力纤维 深紫色 粘液 紫色五 显示弹性，胶原纤维的双重组合染色结果：弹力纤维： 蓝绿色 胶原纤维： 红色 背景： 淡黄色注意事项：维多利亚蓝液可每次反复使用，溶液在室温中保存可用数年。 六 肌肉组织染色 （一）横纹肌组织染色Mallory磷钨酸木精染色法（PTAH）1. 结果：横纹肌 蓝色 胶原纤维，网状纤维： 黄色或玫瑰红色 心肌（缺血缺氧）： 紫蓝色或棕黄色2注意事项： 此液经处理数周后至数月才成熟，置冰箱保存可使用多年时间。可加入0.15高锰酸钾，加