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中学生实验设计的原始理会米格版Word下载.docx

1、实验步骤(1)取镜和安放:显微镜平时存放在柜或箱中,用时从柜中取出,右手紧握镜臂,左一手托住镜座,将显微镜放在自己左前方的实验台上。 (2)对光:用拇指和中指移动转换器(切忌手持物镜移动),使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时,说明物镜光轴已对准镜筒中心)。打开光圈,并将反光镜转向光源,以左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时用手来回调节反光镜方向,直到视野内的光线均匀明亮为止。(3)低倍镜观察把所要观察的玻片标本放在载物台上,一定使有盖玻片的一面朝上,切不可放反,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(此时实验者的眼睛应当看物镜镜头

2、与标本之间,以免物镜与标本相撞)。左眼看目镜内,同时反向缓缓转动粗准焦螺旋,使镜筒上升,直到看到物像为止,再稍稍转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。如果物象不在视野中心,可将其调到中心(注意移动玻片的方向与物像移动的方向是相反的) (4) 高倍镜观察 移动装片,在低倍镜下使需要放大观察的部分 移动 到视野中央。 转动转换器,移走低倍物镜,换上高倍物镜。 缓缓调节细准焦螺旋,使物像清晰。 调节光圈,使视野亮度适宜。(5)复位使用完毕后,必须复原才能放回镜箱内,其步骤是:取下标本片,转动旋转器使镜头离开通光孔,下降镜筒至最低处,盖上绸布和外罩,放回实验台柜内。最后填写使用登记表。(5) 临时装片

3、的制作1.擦 用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净2.滴 用滴管在载玻片的中央滴一滴清水3.取 用镊子取一小块实验材料4.放 将实验材料浸入载玻片的水滴中,用镊子将其展平5.盖 用镊子夹起盖玻片,然后轻轻地盖在实验材料上实验结果及分析(实验方法的改进或变通、注意事项、结果分析、反思)二:细胞的观察和测量 实验目的和意义1 熟悉显微镜的结构和各部分的功能;2 掌握正确使用显微镜的方法,正确熟练地使用高倍显微镜。3 低倍镜观察蚕豆叶下表皮细胞的形态结构。4 高倍镜观察保卫细胞和气孔并画图。5 测量保卫细胞的大小,记录测量结果。高倍镜可用来放大视野倍数,利用显微测微尺,可测量视野中细胞的大小。蚕豆叶

4、下表皮永久装片、显微镜、擦镜纸、纱布、显微镜目镜测微尺、物镜测微尺(一)蚕豆叶下表皮细胞形态结构观察1低倍镜观察在低倍镜下观察蚕豆叶下表皮,调节粗调节器,使物像达到最清晰,观察不规则形的蚕豆叶表皮细胞、肾形的保卫细胞及成对保卫细胞围成的气孔。2高倍镜的使用在低倍镜视野中,将需要进一步放大观察的物像部位移至视野正中心,然后转动转换器,使高倍镜到位。转动时,两眼须从显微镜侧面注视,若发现镜头有可能与玻片相碰、应检查其原因井排除之。然后,注视目镜观察视野并微微上下转动细调节器,直到物像清晰。如光线较暗,可调节聚光器和光圈,使视野明亮。3绘制保卫细胞和气孔图(二)保卫细胞大小的测量1显微测微尺的使用显

5、微测微尺有目镜测微尺和物镜测微尺两种。目镜测微尺用以标定目镜测微尺每小格的长度。目镜测微尺使用时先卸下目镜上部的透镜,平稳地将目镜测微尺安放在目镜镜筒的光阑上,再把卸下的透镜按原样装好。2保卫细胞大小的测量放置蚕豆叶下表皮装片,在低倍镜下将欲测量的一个保卫细胞移至视野中央,换高信物镜,用目镜测微尺精确地测量该细胞的长度和宽度。实验时可先测得它所占目镜测微尺的格数,再乘以目镜测微尺每小格长度,即得出保卫细胞的实际长度和宽度。显微镜的使用;细胞的观察和测量; 颤藻和水绵细胞的比较观察;DNA和RNA的观察;死活细胞的鉴定(选);小麦胚芽鞘的向光弯曲(选);植物细胞的分化(选) 三:颤藻和水绵细胞的

6、比较观察1 观察颤藻和水绵一般形态结构2 了解原核细胞和真核细胞的不同点。原核细胞和真核细胞共同点:有细胞结构、有细胞膜、细胞质、核糖体 不同点:最主要的差别是原核细胞没有细胞核,真核细胞有细胞核 大小不同,原核比真核小显微镜、清水滴瓶、载玻片、盖玻片、吸水纸、解剖针、革兰氏碘液、滴管、烧杯、镊子、培养皿。1 制备颤藻和水棉的装片并且观察:1) 取一块干净的载玻片,中央滴一滴清水。2) 用解剖针从培养皿壁上取下一丝颤藻(注意量要少)。3) 将取下的颤藻置于水滴中(左边),用解剖针轻轻拨动,使颤藻散开。4) 用镊子取23条水绵,用解剖针分开水绵细丝。放在载玻片上的水滴中(右边)。5) 盖上盖玻片

7、。制成装片。6) 找到并列在一起的颤藻和水棉后,低倍镜镜检。观察细胞的大小和色素。7) 高倍镜镜检。可观察到颤藻的藻丝是由一列蓝绿色的细胞组成。2 染色和比较观察:1) 将临时装片从显微镜的载物台上取下来。2) 用滴管在盖玻片的一侧滴加革兰氏碘液,在盖玻片的另一侧用吸水纸引流。重复23次。3) 低倍镜镜检。4) 高倍镜镜检。可观察到哪种细胞内有颜色较深、形状固定的结构。(这个结构就是细胞核)四:DNA和RNA的观察尝试使用吡罗红、甲基绿混合染色剂显示细胞中DNA和RNA分布方法。说出DNA主要分布在细胞核中,RNA主要分布在细胞质中。真核细胞的DNA主要分布在细胞核内,RNA主要分布在细胞质中

8、。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿对DNA亲和力强,使DNA显现出绿色,而吡罗红对RNA的亲和力强,使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。盐酸的作用: 盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输; 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合。材料:人的口腔上皮细胞,洋葱表皮细胞用具:大小烧杯,温度计,滴管,消毒牙签,载玻片,盖玻片,铁架台,石棉网,火柴,酒精灯,吸水纸,显微镜。试剂:吡罗红,甲基绿染色剂1.取口腔上皮细胞(1)在洁净的载玻片上,滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。

9、(2)用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻地刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在载玻片的液滴中涂抹几下。取人的口腔上皮细胞时,用牙签的钝头稍稍用力刮取,既可避免划伤黏膜,又可刮取到形态完整、自然脱落之前的细胞(3)点燃酒精灯,将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。烘干时要注意观察,当涂片将要干时即可。2.水解(1)在小烧杯中加入30 mL质量分数为8%的盐酸,将烘干的载玻片放入小烧杯中。往小烧杯中倒入盐酸时,动作要轻要慢,防止盐酸溅在皮肤上。(2)在大烧杯中加入30 温水。(3)将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5 min。(如下图所示)3.冲洗涂片用滴管吸取蒸馏水,让蒸馏水从倾斜的载玻片

10、上缓缓流过涂层,反复冲两三次,约10秒左右。4.染色(1)用吸水纸吸去载玻片上的水分。(2)将吡罗红甲基绿染色剂滴2滴在载玻片上,染色5 min。(3)吸去多余染色剂,盖上盖玻片。5.观察(1)先在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,观察细胞结构,观察清晰后移至视野中央。(2)转动转换器,换用高倍物镜,并调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。五:死活细胞的鉴定了解质壁分离法和用活体染色法学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活活细胞的原生质层具有选择透过性;而死细胞则为全透性。选择透过性是质壁分离的先决条件。因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的细胞则说明是死的

11、。死活细胞间不仅通透性不同,而pH值等情况也不同,它们对某些染料的反应明显不同。某些染料能在活细胞的细胞液中积累,但不能染活的原生质;另一方面,这些染料可使死细胞的结构染色,但不积累于液泡。所以可根据某些染料活体染色的情况来鉴定细胞死活。 3:洋葱及其它植物材料、酒精灯、显微镜、刀片、镊子、载玻片、盖玻片、1M蔗糖溶液、0.01%中性红溶液等。用质壁分离的方法鉴定细胞的死活。撕洋葱表皮细胞滴加1M蔗糖溶液,在显微镜下观察。细胞很快发生质壁分离,这就是细胞活着的证据。另把制取的同样制片,用冷冻、加热、干燥、酒精浸泡等方法将它们的细胞杀死,然后取代上述活材料,做质壁分离实验,结果看到已死的细胞不能

12、发生质壁分离现象。用尿素、硝酸钾、氯化钙溶液等来代替蔗糖溶液,能快速鉴定细胞的死活。用活体染色的方法的鉴定细胞的死活。取洋葱或其它材料,用镊子撕下表皮(如表皮不易撕下,也可在水中用锋利的刀片轻轻刮去多余部分),或用刀片做成切片若干,将表皮或切片浸入中性红溶液中,放置5-10分钟最后用清水浸洗后置于载玻片上,加盖玻片,在显微镜下观察。活细胞的液泡内染成红色至紫色,原生质不染色,死细胞常呈橙红色,原生质和细胞核被染色。撕破的细胞,只剩细胞壁时,呈淡红色或淡紫色。为进一步鉴别细胞的死活,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴1M蔗糖溶液,便可观察到活细胞能发生质壁分离,死细胞及只剩细胞壁的空细胞都有没有这种

13、现象。六:小麦胚芽鞘的向光弯曲观察植物的向光性和根的向地性现象并记录分析,验证植物生长具有向光性;学会合作、交流、培养动手能力、科研意识、创新精神互相学习;植物的向性运动是植物受到单向外界因素的刺激而引起的定向运动。它的运动方向随刺激方向而定。在单侧光刺激下,植物表现出向光性运动。在地心引力(重力)的影响下,植物的根表现出向重力性运动。豌豆种子若干锡纸、不透光的纸盒二个,培养皿、剪刀、胶带。1.实验前,取若干绿豆种子放温水中浸泡一天,使它充分吸水膨胀。待绿豆种子发芽,进行实验。2.取两只纸杯装上适量土和稻草,各播种发芽的种子10粒左右,在一只硬纸杯的一面,割开一个开口(小洞要与绿豆幼苗的顶端基

14、本平齐),盖上用不透光的胶布包裹密封好的杯盖。 3. 让有孔一侧朝向光源,使光能从小孔射入,每天适量浇水并观查幼苗生长方向。七:植物细胞的分化 了解植物组织培养的基本原理;熟悉组织培养的操作过程;初步掌握组织培养的无菌操作技术;3: 探究细胞分裂素和生长素的不同配比对组培的影响。植物组织培养是细胞生物学研究最常用的方法之一,是指从生物体中取出组织或细胞,在离体的条件下模拟体内的生理环境,使其生存、生长、繁殖或传代,借以观察、研究细胞的生长发育等生命活动现象。植物组织培养以其条件可控、便于观察的优点,在快速繁殖、育种、保护珍贵苗木等工作中应用广泛。植物细胞具有全能性, 即生物体的细胞具有使后代细

15、胞形成完整个体的潜能。离体的植物组织或细胞(也称外植体),在培养了一段时间以后会通过细胞分裂形成愈伤组织(愈伤组织的细胞排列疏松而无规则, 是一种高度液泡化呈无定形状态的薄壁细胞)。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物组织的脱分化,或者叫作去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成根或芽等器官,这个过程叫作再分化。再分化产生的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。:实验材料:烟草叶片(不是很嫩)。:实验器具:容量瓶,锥形瓶,烧杯,玻璃棒,电子天平,微量移液器,高压蒸汽灭菌锅,无菌操作台,灭菌锅,镊子,解剖刀,酒精灯,刀片等。:实验试剂:MS培养基,6-B

16、A,2,4-D,蔗糖,琼脂,1mol/L的NaOH/HCL ,70%酒精,升汞溶液。取烟草叶,用水冲洗干净,吸去水分在无菌室中,点燃酒精灯,用75%的酒精浸泡叶片45s后迅速倒掉,用无菌水冲洗3-4次,再用升汞浸泡3-4分钟,将升汞回收,用无菌水冲洗6-7次,将叶片置于之前制备好的培养皿纸片上,让它吸干水分用解剖刀和镊子将叶片分成1cm*1cm大小,注意尽量不要用镊子划伤表面,切口尽量平整,镊子和解剖刀每次使用前都要用酒精灯烧一烧。取下培养瓶的塞子,用火灼烧瓶口2 cm处,手持培养瓶呈45角,用消毒镊子把3-4块烟草叶片转到琼脂培养基的表面,正反面各放两片,轻轻用镊子按压一下,使叶片贴合表面,但又要留一些空隙。然后立即封住瓶口。每两次转移之间都要用酒精灯灼烧镊子,防止交叉污染。将已接好植物组织的锥形瓶放在光下上,按时检查,剔除材料被杂菌污染的锥形瓶,观察生长情况并拍照记录。

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