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1、形态，承受细胞内高渗透压2、参与菌体内外的物质交换 3、带有多种抗原表位，可以诱发机体的免疫应答 4、细胞壁的某些成分与细菌致病性有关细胞壁缺陷菌（L型菌）细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。形态大小不一，G临床意义：慢性和反复感染常规细菌检查阴性。（二）细胞膜 组成：脂质双层，蛋白质（无胆固醇） 功能：物质转运、呼吸作用、合成作用、参与细菌分裂。（三）细胞质 成分：无色透明胶状物，由水、蛋白质、脂类、核酸及少量无机盐组成 细菌新陈代谢的场所1.质粒.细菌染色体外的双链环状DNA带有遗传信息，能自我复制

2、控制细菌某些 特定的遗传性状。质粒可以自我复制，其编码的细菌性性状有菌毛、细菌素、毒素和耐药性的产生等，赋予细菌致病性和耐药性的特征。2.胞质颗粒.功能：细菌储存营养物质。如白喉杆菌的异染颗粒，成分为RNA，多偏磷酸盐 。3.核质. 细菌的遗传物质称为核质或拟核，集中于细胞质的某一区域，多在菌体中央，无核膜、核仁和有丝分裂器。4. 核糖体.蛋白质合成场所、某些抗生素作用部位。二、细菌的特殊结构1.荚膜 某些细菌细胞壁外包绕一层粘液样物质；普通染色不易着色，光镜下可见透明环。 化学组成：多数细菌：多糖 ；少数细菌：多肽（炭疽杆菌）、透明质酸（链球菌）。荚膜的形成：营养丰富的培养基（含糖、血清）

3、有荚膜菌形成粘液型（M）、光滑型（S）菌落 失去荚膜后菌落变为粗糙型（R）荚膜功能1、抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子 2、抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体 3、粘附作用：与致病性有关；形成生物膜 4、抗干燥2.鞭毛 伸出菌体外的细长而弯曲的丝状物。与运动有关 染色特性：鞭毛染色法鞭毛种类 单鞭毛 双鞭毛 丛鞭毛 周鞭毛鞭毛功能1、细菌的运动器官2、某些细菌鞭毛与致病有关3、鞭毛蛋白有抗原性：H抗原3.菌毛 许多G菌和少数G菌菌体表面存在着一种直的比鞭毛更细、更短的丝状物 与运动无关菌毛的种类和功能 普通菌毛:遍布细胞表面，每菌可达数百根，短而直，粘附结构。性菌毛:每菌14根，比普通菌毛长而粗

4、，传递质粒。4.芽胞 某些细菌在一定环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内部形成一个圆形或卵圆形的小体，是细菌的休眠形式，称为芽胞。芽胞的形态 芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异，有重要的鉴别价值 芽胞特点 1、保存有细菌全部生命活性。2、是细菌的休眠状态，具有很强的抗高温、抗干燥、抗化学消毒剂和抗射线能力。3、芽胞可发芽，形成新的菌体：一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞发芽也只生成一个菌体，芽胞不是细菌的繁殖方式。4、芽胞是灭菌指标。三、细菌形态与结构检查法革兰染色法 1步骤：涂片固定结晶紫初染碘液媒染 95%酒精脱色复红复染 2结果：菌：紫色 菌：红色 3革兰染色法意义：鉴别细菌、选择药物、研究

5、细菌致病性 细菌的生理 1、细菌的营养物质 水：营养物质必须先溶于水，营养的吸收与代谢均需有水才能进行。 氮源：来源于氨基酸、蛋白质等，合成菌体成分。 碳源：来源于糖类，提供能量。 无机盐：钾、钠、钙、镁、磷、硫等。 生长因子：生长必需但自身不能合成的物质，如维生素、氨基酸等。2、细菌的生长繁殖 细菌个体的生长繁殖 二分裂繁殖（无性繁殖）；繁殖速度一般2030分钟一代 个别较慢 如结核分枝杆菌的代时为1820小时 3、细菌群体的生长繁殖 四期 1迟缓期 14小时，2对数期 研究细菌的生物学性状（形态染色、生化反应、药物敏感试验等）应选用该期的细菌，3稳定期 芽孢、外毒素和抗生素在该期产生，4衰

6、亡期4、细菌的生化反应 细菌对糖、蛋白质的分解能力的不同，因而代谢产物各异，利用生物化学方法鉴别不同细菌称为。 IMViC试验 I：吲哚试验 M：甲基红试验 Vi：VP试验C：枸橼酸盐利用实验，常用于鉴定肠道杆菌，如大肠埃希菌+ + - -，产气杆菌- - + +。5、合成代谢产物 1、热原质 细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。大多数是G-菌的脂多糖。热原质耐高温，高压蒸汽灭菌不能破坏（121，20 min），250 高温干烤才能破坏。 2、毒素和侵袭性酶 a、内毒素 G菌的脂多糖 b、外毒素 G菌和少数G菌产生的蛋白质 c、侵袭性酶 损伤机体组织，促进细菌侵袭和扩散，如卵磷脂酶 （

7、产气荚膜梭菌 ）、透明质酸酶（链球菌）。 3、色素：金黄色葡萄球菌金黄色色素（脂溶性） 铜绿假单胞菌-绿色色素（水溶性）可用于细菌鉴别 4、抗生素：多粘菌素、杆菌肽。 5、细菌素：只能杀伤有亲缘关系的细菌，如大肠菌素。无治疗意义，有助于细菌分型。 6、维生素：某些肠道菌合成，如B族维生素、VK。6、细菌在培养基中的生长现象 液体培养基中生长现象 1、混浊（）：大多数细菌2、沉淀：链状生长的细菌3、菌膜（表面生长）：专性需氧菌，如结核杆菌、枯草杆菌。半固体培养基中生长情况 1、有鞭毛细菌：扩散生长，周围浑浊 2、无鞭毛细菌：沿穿刺线生长，周围透明。 消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全一、消毒灭菌

8、常用术语 1、灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微生物的方法。2、消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中的病原微生物的方法。3、防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。4、清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。5、无菌（asepsis）和无菌操作：无菌是无活菌的意思，多是灭菌的结果。防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。二、消毒灭菌的方法 1、物理消毒灭菌法 （一）热力灭菌法1.干热灭菌法 焚烧（病理性废弃物品或动物尸体）；烧灼（实验室的接种环、试管口等）；干烤（玻璃器皿、陶瓷、玻璃注

9、射器等的灭菌）；红外线（医疗器械的灭菌） 2.湿热灭菌法 巴氏消毒法（消毒牛乳、酒类）；煮沸法（消毒食具、刀剪、注射器等）；流动蒸汽消毒法（与蒸笼有相同的原理）；间歇蒸汽灭菌法（不耐高热的含糖、牛奶等的培养基）；高压蒸汽灭菌法（灭菌效果最好的方法 常用于一般培养基、生理盐水、手术敷料等耐高温、耐湿物品的灭菌） （二）辐射杀菌法 1.紫外线（用于手术室、传染病房、无菌实验室的空气消毒，或不耐热物品的表面消毒） 2.电离辐射（食品、药品和生物制品的消毒灭菌，而不破坏其营养成分） 3.微波（食品、非金属器械、实验室用品、食品用品、药杯等的消毒） （三）滤过除菌法 1.滤菌器（液体除菌 不耐高热的血清

10、、毒素、抗生素的除菌） 2.空气除菌（采用生物洁净技术 滤过空气中的尘埃 清除细菌等微生物） （四）干燥与低温抑菌法 冷冻真空干燥法 是目前保存菌种的最好方法2、化学消毒灭菌法 （一）高效消毒剂1.含氯消毒剂；2.过氧化物消毒剂；3.醛类消毒剂；4.环氧乙烷 （二）中效消毒剂1.含碘消毒剂；2.醇类消毒剂 （三）低效消毒剂1.季铵盐类；2.氯已定；3.高锰酸钾 细菌的遗传变异 BCG：牛型结核杆菌（有毒株）胆汁-甘油-马铃薯培养13年，230次传代 减毒株（BCG） 基因型变异：BCG 表型变异：细菌L型1、细菌的遗传物质 1、细菌染色体：dsDNA，3.25106 bp 复制快：105 bp

11、/min 无组蛋白，无内含子，为连续基因 单倍体：突变后更易表现2、质粒 复制能力、转移能力、整合能力、相容性、丢失或消除 F质粒转移；Vi质粒毒力 R质粒耐药；Col质粒细菌素 3、转位因子：IS: 7501550 bp两端重复序列，与插入有关 中心序列有转位酶基因4、整合子（integron，In）：定位于细菌染色体、质粒或转座子上 基本结构：两端为保守末端，中间为可变区，含一个或多个基因盒 整合子含有3个功能元件：重组位点；整合酶基因；启动子 通过转座子或接合性质粒，使多种耐药基因在细菌中进行水平传播5、噬菌体 分布广: 有菌就有噬菌体、 宿主特异性：流行病调查；分型 、 参与细菌变异：

12、转导, 溶原性转换。2、基因的转移和重组1、转化：是共菌裂解释放的DNA片段被受菌直接摄取，使受菌获得新的性状。2、接合：细菌通过性菌毛互相接连沟通，将遗传物质从共菌转给受菌的方式。 F质粒（fertility factor, 致育因子）；R质粒 耐药传递因子：编码性菌毛决定因子：耐药 3、转导 由噬菌体介导,将供菌的DNA片段转入受菌，使受菌获得供菌的部分遗传性状。转导可分为普通性转导和局限性转导。普遍性转导 毒性噬菌体，温和噬菌体 包装错误：任何部位细菌DNA片段 转导性噬菌体：宿主菌DNA，无噬菌体DNA 受菌接受转导噬菌体（供菌）DNA 受菌获得供菌性状 局限性转导：温和性噬菌体 脱落

13、错误：前噬菌体及两边的细菌DNA转导性噬菌体：噬菌体DNA及细菌DNA4、溶原性转换和原生质体融合 *三、细菌的变异现象 1、形态结构变异 细菌L型 H O 变异2、菌落变异 S R 变异3、毒力变异 白喉棒状杆菌4、耐药性变异 痢疾杆菌 细菌的感染与免疫一、正常菌群与条件致病菌正常菌群：当人体免疫功能正常时，这些微生物对宿主无害，有些对人还有利是为正常微生物群，通称。正常菌群对宿主的生理学作用：1、生物拮抗2、营养作用3、免疫作用4、抗衰老作用条件致病菌 产生的原因有 1、正常菌群的的寄居部位改变 2、宿主免疫功能低下 3、菌群失调 往往可引起二重感染和重叠感染2、细菌的致病作用 细菌对宿主

14、的感染致病能力又称为致病性。毒力则表示细菌致病性的强弱程度。一般常用半数致死量或半数感染量作为测定毒力的指标。细菌的毒力（一）侵袭力1.粘附素（adhensin）菌毛粘附素；非菌毛粘附素 2.荚膜 3.侵袭性物质 侵袭素（invasin）侵袭性酶类 血浆凝固酶 透明质酸酶 IgA蛋白酶 4.细菌生物被膜（bacterial biofilm）（二）毒素 1.外毒素（exotoxin）主要由G和少数G菌合成及分泌 主要特点：1、大多数为蛋白质 2、毒性强3、绝大多数不耐热4、抗原性强，可脱毒为类毒素 分类：1、神经毒素（破伤风杆菌的痉挛毒素、肉毒梭菌的肉毒毒素）2、细胞毒素（白喉棒状杆菌的白喉毒素

15、、金黄色葡萄球菌的表皮剥脱毒素、A群链球菌的致热外毒素）3、肠毒素（霍乱弧菌、产毒素型大肠埃希菌、产气荚膜梭菌、金黄色葡萄球菌） 2.内毒素（endotoxin G菌细胞壁脂多糖（LPS） 组成：O特异多糖 非特异核心多糖 脂质A 特点：1、毒性弱2、耐热3、不能脱毒为类毒素4、致发热反应5、化学性质为LPS 感染的发生与发展感染的类型（一）隐性感染:当机体的抗感染免疫力较强，或侵入的病菌数量不多、毒力较弱。感染后对机体损害较轻，不出现或出现不明显的临床症状，为。 （二）显性感染：当机体的抗感染免疫力较弱 ，或侵入的病菌数量较多、毒力较强。以致机体的组织细胞受到不同程度的损害，生理功能也发生改

16、变，并出现一系列的临床症状和体征，是为。按病情缓急：1.急性感染2.慢性感染按感染部位不同：1. 局部感染 2. 全身感染1、毒血症：致病菌侵入宿主机体后，只在机体局部生长繁殖，病菌不进入血循环，但其产生的外毒素入血。例如白喉杆菌和破伤风杆菌。2、内毒素血症：革兰阳性菌侵入血流，并在其中大量大量繁殖，崩解后释放大量内毒素；也可由病灶内大量的革兰阳性菌死亡、释放的内毒素入血所致。3、菌血症：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生长繁殖，只是短暂的一过性通过血循环到达体内适宜部位后在进行繁殖而致病。例如伤寒早期有菌血症。4、败血症：致病菌侵入血流后，在其中大量繁殖并产生毒性物质，引起全身性中毒症状。

17、5、脓毒血症:指化脓性病菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并通过血流扩散指宿主体内的其他组织或器官，产生新的化脓性病灶。例如金黄色葡萄球菌的脓毒血症。 （三）带菌状态 带菌者 伤寒玛丽球菌（coccus）金黄色葡萄球菌（1）生物学性状1.形态与染色 球形，无鞭毛，无芽胞葡萄串状，革兰染色阳性（G）2.培养特性易培养：普通平板 血平板产色素：金黄色 白色 柠檬色有些菌溶血，产生溶血环：致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（溶血）。 3.生化反应 1、 多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖。2、产酸不产气。3、致病性球菌分解甘露醇。4、触酶阳性（与链球菌区分标准）

18、4.抗原构造1）葡萄球菌A蛋白：细胞壁表面蛋白质，完全抗原。 2）荚膜多糖：有利于细菌粘附 （3）多糖抗原：存在于细胞壁，有群特异性。5、分类1、金黄色葡萄球菌2、表皮葡萄球菌（白色）3、腐生葡萄球菌（白色或柠檬色）6、抵抗力对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌 对碱性染料（龙胆紫）敏感易产生耐药性，特别对青霉素（MRSA）耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 （二）致病性与免疫性 葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强，通过在宿主体内增殖、扩散和产生有害的胞外物质（酶和毒素）引起宿主疾病。 葡萄球菌的毒力因子（致病物质）包括：酶；毒素；细菌的一些表面结构蛋白。1.致病物质酶 凝固酶：血浆纤维蛋白原转为纤维蛋白，

19、使血浆凝固 耐热核酸酶：水解DNA 纤维蛋白溶酶：水解纤维素（纤维蛋白溶酶、葡激酶） 透明质酸酶：降解结缔组织（扩散因子） 脂酶：分解脂肪 触酶：分解H2O2 毒素 葡萄球菌溶素、毒性休克综合征毒素-1、杀白细胞素肠毒素、表皮剥脱毒素 表面结构或蛋白 如粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖和SPA等 凝固酶概念：使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类 意义：鉴别有无致病性的重要指标 致病机理：抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏；使感染局限化和形成血栓。1、毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）引起机体发热，增加对内毒素的敏感性；引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征 （TSS）2、表皮剥脱

20、毒素（exfoliative toxin）引起金黄色烫伤样皮肤综合征3、肠毒素约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生 引起急性胃肠炎（即食物中毒） 耐热，抗胃肠液中蛋白酶 作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒 还具有超抗原（superantigen）作用 4、葡萄球菌溶素溶素 损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）5、杀白细胞素细胞毒素 攻击中性粒细胞和巨噬细胞抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力所致疾病1、侵袭性疾病（化脓性疾病）皮肤化脓性感染（浓汁金黄而粘稠，病灶界限清楚多位局限性）各种器官的化脓性感染全身感染（败血症、脓毒血症） 2、毒素性疾病 由外毒素引起的中毒性疾病食物中毒（常引起夏

21、秋季节的胃肠道疾病）烫伤样皮肤综合征（）多见于婴幼儿和免疫力低下的成人毒素休克综合征肠杆菌科埃希菌属 埃希菌属（Escherichia）有6个种，只有大肠埃希菌（E.coli）是临床最常见、最重要的一个菌种。大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群；在宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织器官后即可成为机会致病菌，引起肠道外感染；一些血清型的大肠埃希菌具有致病性，能导致人类胃肠炎； 在环境卫生和食品卫生学中常被用作粪便污染的卫生学检测指标。一、生物学性状 G杆菌。多数菌株有周身鞭毛，有菌毛，无芽胞。兼性厌氧。 能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸并产气。绝大多数菌株发酵乳糖。IMViC试验结果为“”。 有O、H和K

22、三种抗原。能产生大肠菌素（colicine）。二、致病性与免疫性一）致病物质 1.黏附素（adhesine）包括定植因子抗原（CFA）、集聚黏附菌毛（AAF）、束形成菌毛（bundle forming pili, Bfp）、紧密粘附素（intimin）、P菌毛、I型菌毛和侵袭质粒抗原（invasion plasmid antigen, Ipa）蛋白等。 2.外毒素 志贺毒素（Stx）、耐热肠毒素（ST）、不耐热肠毒素（LT）；还有内毒素、荚膜、载铁蛋白和III型分泌系统（type III secretion systems）等。二、所致疾病1.肠道外感染 肠道外感染以化脓性感染和泌尿道感染最为

23、常见。2.胃肠炎 某些血清型可引起人类胃肠炎，与食入污染的食品和饮水有关，为外源性感染。 引起胃肠炎的大肠埃希菌三、微生物学检查法（一）标本 肠外感染采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等；胃肠炎则取粪便。 （二）分离培养与鉴定1.肠道外感染 2.肠道内感染 （三）卫生细菌学检查四、防治原则 疫苗接种预防已在畜牧业领域中开展了广泛研究。 预防人类ETEC感染、O157感染的疫苗正在研究中。抗生素治疗应在药物敏感试验的指导下进行。 尿道插管和膀胱镜检查应严格无菌操作。对腹泻病人应进行隔离治疗。污染的水和食品是ETEC最重要的传染媒介，EHEC则常由污染的肉类和未消毒的牛奶引起，充分的烹饪可减少感染的危

24、险。肠杆菌科志贺菌属一、生物学性状 G短小杆菌。无芽胞，无鞭毛，无荚膜，有菌毛。分解葡萄糖，产酸不产气。除宋内志贺菌个别菌株外，均不发酵乳糖。动力阴性。2、致病性与免疫性（一）致病物质 侵袭力和内毒素，有的菌株能产生外毒素。（二）所致疾病细菌性痢疾。我国主要为B群和D群。传染源：病人和带菌者 传播途径：粪-口途径 感染几乎只局限于肠道，一般不侵入血液。 典型的急性细菌性痢疾：潜伏期13天，突然发病，常有发热、腹痛、脓血黏液便，伴有里急后重（tenesmus）。（二）所致疾病 急性中毒性痢疾多见于小儿。 急性细菌性痢疾有1020的病人可转为慢性。（三）免疫性 抗感染免疫主要是消化道粘膜表面的分泌

25、型IgA（sIgA）。病后免疫期短暂，也不巩固。肠杆菌科沙门菌属沙门菌属（Salmonella）分两个种，即肠道沙门菌（S. enterica）和邦戈沙门菌（S. bongori）。 血清型现已达2500多种。 沙门菌血清型的正确命名方法：肠道沙门菌肠道亚种伤寒血清型（Salmonella, enterica subspecies, enterica serotype, Typhi）,并可缩写为伤寒血清型沙门菌（Salmonella Typhi）。 沙门菌属中少数血清型是人的病原菌，引起肠热症。绝大多数血清型宿主范围广泛，家畜、家禽、野生脊椎动物及冷血动物、软体动物、环形动物、节肢动物（包括苍

26、蝇）等均可带菌，其中部分沙门菌是人畜共患病的病原菌，可引起人类食物中毒或败血症。1、生物学性状1.G杆菌，有菌毛。除个别例外，都有周身鞭毛。一般无荚膜。均无芽孢。 2.兼性厌氧，不发酵乳糖。对葡萄糖、除伤寒沙门菌产酸不产气外，其它沙门菌均产酸产气。3.主要有O和H两种抗原，少数菌中尚有Vi抗原。 4.沙门菌对理化因素的抵抗力较差。（一）致病物质 1.侵袭力 有毒株能侵袭小肠粘膜。通过种特异性菌毛先与M细胞结合，接着SPI-I分泌系统向M细胞中输入沙门菌分泌侵袭蛋白，引发宿主细胞内肌动纤维重排，诱导细胞膜凹陷，导致细菌内吞。沙门菌在吞噬小泡内生长繁殖，使宿主细胞死亡，细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组

27、织。 2.内毒素 3.肠毒素 个别沙门菌如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素。（二）所致疾病 传染源为病人和带菌者，其次为带菌动物及其动物产品。人类沙门菌感染有4种类型： 1.肠热症（enteric fever, typhoid fever） 包括伤寒沙门菌引起的伤寒，甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌（原称乙型副伤寒沙门菌）和希氏沙门菌引起的副伤寒。 2.胃肠炎（食物中毒）常见食物主要为肉类食品、蛋类、奶和奶制品，系动物生前感染或加工处理过程污染所致。多见于老人、婴儿和体弱者。 3.败血症 多见于儿童和免疫力低下成人。经口感染后，病菌即侵入血循环。败血症症状严重，但肠道症状较少见。 4.无症状带菌者 约15

28、伤寒或副伤寒患者，在症状消失后一年仍可在其粪便中检出沙门菌，转变为无症状（健康）带菌者。（三）免疫性 特异性细胞免疫是主要防御机制。胃肠炎的恢复与肠道局部生成sIgA有关。肥达试验（Widal test） 定义：用已知伤寒沙门菌菌体O抗原和H鞭毛抗原、副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H鞭毛抗原的诊断菌液与受检血清做试管或微孔板定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。肥达试验结果的解释： 1.正常值 一般是伤寒沙门菌O凝集效价1:80，H凝集效价160，引起副伤寒沙门菌H凝集效价80。 2.动态观察 若效价逐次递增或恢复期效价比初次效价4倍者即有诊断意义。 3.O与H抗体的诊断意义 O、H凝集效价均超过正常值，则肠热症的可能性大；如两者均低，患病可能性小；若