仪器分析实验文档格式.docx

1、乙酸正丁酯，色谱纯，作内标用。2%溶液（用60%乙醇水溶液 配制）；四、实验步骤1.仪器的准备，色谱条件的确定检测器温度：260；进样口温度：240；柱温程序：60C保持1分钟，以3C/分钟的速率升到90C,然后 以40C/分钟升到220。2.校正因子（f）的测定吸取2%乙酸乙酯标准溶液，移入100mL容量瓶中，然后加入2%内标 液，用60%乙醇溶液稀释至刻度。上述溶液中乙酸乙酯和内标的浓度均 为先 （体积分数）。进行GC检测，记录乙酸乙酯和内标峰的保留值及其 峰面积（或峰高），其比值计算出乙酸乙酯的相对校正因子（f）。f= A/ d:/ A:* d:C= f* A3* cx*io_7 A：其

2、中：C-试样中乙酸乙酯的质量浓度，g/L;f-一乙酸乙酯的相对校正因子；A一标样f值测定时内标的峰面积（或峰高）；A2-标样f值测定时乙酸乙酯的峰面积（或峰高）A一试样中乙酸乙酯的峰面积（或峰高）Al一添加于酒样中内标的峰面积（或峰高）C：一一添加在酒样中）内标的质量浓度，mg/Lo心-内标物的相对密度；&-乙酸乙酯的相对密度。五、试样的测定吸取酒样于10mL容量瓶中，加入2%内标液，混匀后，在与f值测 定相同的条件性进样，根据保留时间测定乙酸乙酯峰的位置，并测定乙酸乙酯与内标峰面积，求出峰面积之比，计算出酒样中乙酸乙酯的含量。六、思考题1.简述程序升温的优点。2.白酒分析采用内标法定量，为什

3、么实验准备：仪器2台：气相色谱仪，备用氢火焰离子化检测器（FID）；色谱柱：SE-54色谱柱（50m*0.25mm）,微量注射器：60%乙醇水溶液配制：吸取60mL无水乙醇至100mL量筒，加纯净水至100mL即得；2%乙酸乙酯标样：吸取1mL色谱纯乙酸乙酯至50mL量筒，加上述60%乙醇水溶液至50mL即得；2%乙酸正丁酯内标：吸取1mL色谱纯乙酸正丁酯至50mL量筒，加上述60%乙醇水溶液至50mL即得；实验二HPLC法测定饮料中人工色素的含量一、目的与要求1.理解反相色谱的原理和应用。2.掌握外标定量方法。二、基本原理食品着色剂是以给食品着色为主要目的的，也称食用色素。食品着 色剂使食品

4、具有悦目的色泽，对增加食品的嗜好性及刺激食欲有重要意 义。大量的研究报告指出，过多的食用合成色素不仅不能向人体提供营 养物质，某些合成色素甚至会危害人体健康，导致生育力下降、畸胎等 等，有些色素在人体内可能转换成致癌物质。危害包括一般毒性、致泻 性、致突性（基因突变）与致癌作用。高效液相色谱分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定 相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其 中的两相间进行反复多次的分配（吸附一脱附一放出），由于固定相对 各种组分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各组份在色谱柱中 的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱 进入

5、检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的 色谱峰。三、仪器与试剂LC100高效液相色谱仪（MV检测器;二元梯度泵），上海五丰。样品:前处理后的“美年达”色素浓缩样品液、日落黄色素标准溶液。甲醇（HPLC纯），重蒸镭水、乙酸铉。四、实验内容与步骤1.色谱条件色谱柱Agilent XDB-C18 色谱柱 X250 mm, 5 U m）;流动相：（A） L 乙酸筱溶液，（B）甲醇；柱温：30 ；梯度洗脱程序为0 min min,20 %B35 %B； min min, 35 %B； min, 35 % B 98 % B；min min, 98 % B； min min, 98 %B

6、 20 %B； min min,20 %B20 %B；检测波长484nm。2.标准液制备及标准曲线制备准确称取制备好的落黄色素标准样品5mg,加蒸镭水溶解后移人 10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇晃使其浓度均匀，制得hng/ml 日落黄色素标准液，分别取该标溶液2 uL, 4 uL, 6 uL, 8uL, 10uL进 样，分别测出峰面积，不强制过原点，以浓度对峰面积进行回归，得标准 曲线和回归方程。数据处理机给出峰面积值，以标准品进样量（ug）为纵 坐标（Y）,峰面积为横坐标（X）,得标准曲线。3.样品液制备取商品“美年达” 50ml于100ml烧杯中，80 C加热10分钟驱除二氧 化碳

7、，间歇搅拌。用水定容至100ml。4.色谱测定用微量注射器分别吸取10 UL标品、试样溶液注入色谱仪，取得色 谱图，以保留时间对照定性，确定落日黄色谱峰，并记录锋面积。五、实验数据及处理1.以色谱峰面积为纵坐标。落口黄标准系列溶液的浓度为横坐标， 绘制标准曲线。2.根据试样溶液色谱图中落口黄峰面积，查出试样溶液中落口黄 的含量，并计算样品中落口黄的含量（Ug/mL）。六、问题与讨论1.正相、反相色谱分离系统是如何定义的，它们分别适用于什么情况2.为什么可以利用色谱峰的保留时间进行色谱定性分析实验三 紫外吸收光谱法测定食品中苯甲酸的含量 一、实验目的1.了解紫外光谱法原理及苯甲酸的紫外吸收特征。

8、2.了解紫外可见分光光度计的使用。3.学习利用吸收光谱曲线进行化合物鉴定和含量分析。许多有机化合物或其衍生物，在可见光或紫外光区有吸收光谱，各 种物质分子有其特征的吸收光谱。吸收光谱的形状和物质的特性有关， 可作为定型鉴定的依据，而在某选定的波长下，测量其吸收光度即可对 物质进行定量分析工紫外吸收光谱用于定量分析时，符合朗伯比尔定 律。据朗伯比尔定律：当一定波长的单色光通过某物质的溶液时，入 射光强10与透过光强It之比的对数与该物质的浓度及液层厚度成正 比，数学表达式为：A=iog=k=kbc, A为吸光度，b为溶液层厚度，单位 cm； c为被测物质浓度，当浓度单位为mol/L； k为摩尔吸

9、光系数。在比 色皿及入射光强度一定时，吸光度正比于被测物质浓度，这便是定量分 析的依据。苯甲酸别名安息香酸，白色单斜晶系片状或针状结晶体，略带安息香 或苯甲醛气味。熔点,在100C时迅速升华，它的蒸气有很强的刺激 性，吸入后易引起咳嗽。苯甲酸在常温下微溶于水，石油酸，但溶于热 水，水溶液呈酸性；易溶于醇、酸、丙酮等有机溶剂，也溶于非挥发性 油。对霉菌，酵母和细菌等有较好的抑制作用，因而对微生物有强烈毒 性，但对人体毒害不明显。苯甲酸及其钠盐可用作乳胶、牙膏、果酱或 其他食品的抑菌剂和防腐剂，也可作染色和印色的媒染剂。在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其 吸收光谱的最大吸收

10、波长在225nmo可采用紫外分光光度计测定物质在紫 外光区的吸收光谱并进行定量分析。三、仪器和试剂1、仪器紫外-可见分光光度计，1cm石英比色皿，移液管，容量瓶。2、试剂苯甲酸（AR） , L氢氧化钠溶液。1.苯甲酸标准储备液的制备精确称取苯甲酸lOOmg,用L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸储 水稀释1000ml。此溶液1ml含苯甲酸。2.苯甲酸吸收曲线的绘制吸取苯甲酸贮备液，放入50ml容量瓶中，用L氢氧化钠溶液定容, 摇匀。将装有参比溶液和标准试样的比色皿放入光路中，在紫外分光光 度计上，从波长200-400nm,扫描出苯的吸收曲线。3.苯甲酸标准曲线的绘制分别吸取、的苯甲酸标准溶液

11、于5只10ml容量瓶中，用L氢 氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。用1cm石英比色皿，以L氢氧化钠溶液 做参比溶液，在最大吸收波长处分别测定其吸光度。以吸光度为纵坐 标，苯甲酸的含量为横坐标绘制标准曲线。4.测定试样中苯甲酸的含量用1cm石英比色皿，以L氢氧化钠溶液做参比溶液，在最大吸收波 长处测定试样溶液的吸光度，根据苯甲酸的标准曲线得样品浓度。五、实验结果1.最大吸收波长（请提供紫外吸收光谱图）2.苯甲酸标准曲线浓度 c （mg/ml）吸光度A相关系数厂实验注意事项:（1）正确选择紫外分光光度计的光源灯。石英比色皿价格昂贵，操作时不要离开桌面，谨防打碎。（2）比色皿中溶液达2/3即可，不可过满或

12、过少。（3）切记不可用手接触和擦拭比色皿的透光面，应用擦镜纸拭净。五、数据处理？1.苯甲酸钠紫外-可见吸收光谱的测定，并找出最大吸收峰波长。2. ?苯甲酸钠标准曲线的测定，以及曲线方程、相关系数的测定。？3.样品中苯甲酸钠含量的测定。注：报告数据处理处需将实验数据依依列出。六、注意事项？1.?试样和标准工作曲线的实验条件应完全一致。2.?不同牌号的饮料中苯甲酸钠含量不同，移取时样品量可酌情增减。3.?比色皿中液体装入三分之二即可，外部要擦拭干净。七、思考题？紫外可见分光光度计由哪些部件构成各有什么作用？本实验为什么要用石英比色皿为什么不能用玻璃比色皿？3.苯甲酸的紫外光谱中有哪些吸收峰各自对应

13、哪些吸收带由哪些跃迁引 起实脸四 原子吸收光谱分析法自来水中钙或镁1.学习原子吸收光谱分析法的基本原理。2. 了解原子吸收光谱分析仪的基本结构及使用方法。3.掌握以标准曲线法测定自来水中钙或镁含量的方法。标准曲线法是原子吸收光谱分哲中最常用的方法之一该法是配制已 知浓度的标准溶液系列，在一定的仪器条件下，依次测出它们的吸光 度，以标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲 线。样品经适当处理后，在测量标准曲线吸光度相同的实验条件下测量 其吸光度，根据样品溶液的吸光度，在标准曲线上即可查出样品溶液中 被测元素的含量，再换算成原始样品中被测元素的含量。标准曲线法常用于分析共存的基体成分较为简单的样品。如果样品 中共存的基体成分比较复杂，则应在标准溶液中加入相同类型和浓度的 基体成分，以消除或减少基体效应带来的干扰，必要时应采用标准加入 法进行定量分析。自来水中其他杂质元素对钙和镁的原子吸收光谱法测 定基本上没有干扰，样品经适当稀释后，即可采用标准曲线法进行测 定。原子吸收分光光度计；钙或镁空心阴极灯；无油空气压缩机；乙烘 钢瓶；通风设备；容量瓶、移液管等。金属镁或碳酸镁、无水碳酸钙均 为优级纯；浓盐酸（优级纯），稀盐酸溶液1 mol/ L；纯水，去离子水 或蒸饰水。1. AAS分析条件元 r钙畏元吸收线波长3nm422.7285.2 1燃烧器高