仪器分析实验文档格式.docx

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乙酸正丁酯，色谱纯，作内标用。

2%溶液（用60%乙醇水溶液配制）；

四、实验步骤

1.仪器的准备，色谱条件的确定

检测器温度：

260℃；

进样口温度：

240℃；

柱温程序：

60C保持1分钟，以3C/分钟的速率升到90C,然后以40C/分钟升到220℃。

2.校正因子（f）的测定

吸取2%乙酸乙酯标准溶液，移入100mL容量瓶中，然后加入2%内标液，用60%乙醇溶液稀释至刻度。

上述溶液中乙酸乙酯和内标的浓度均为先（体积分数）。

进行GC检测，记录乙酸乙酯和内标峰的保留值及其峰面积（或峰高），其比值计算出乙酸乙酯的相对校正因子（f）。

f=A/d:

/A:

*d:

C=f*A3*cx*io_7A：

其中：

C--试样中乙酸乙酯的质量浓度，g/L;

f-一乙酸乙酯的相对校正因子；

A「一标样f值测定时内标的峰面积（或峰高）；

A2--标样f值测定时乙酸乙酯的峰面积（或峰高）

A「一试样中乙酸乙酯的峰面积（或峰高）

Al一添加于酒样中内标的峰面积（或峰高）

C：

一一添加在酒样中）内标的质量浓度，mg/Lo

心--内标物的相对密度；

--乙酸乙酯的相对密度。

五、试样的测定

吸取酒样于10mL容量瓶中，加入2%内标液，混匀后，在与f值测定相同的条件性进样，根据保留时间测定乙酸乙酯峰的位置，并测定乙

酸乙酯与内标峰面积，求出峰面积之比，计算出酒样中乙酸乙酯的含

量。

六、思考题

1.简述程序升温的优点。

2.白酒分析采用内标法定量，为什么

实验准备：

仪器2台：

气相色谱仪，备用氢火焰离子化检测器（FID）；

色谱

柱：

SE-54色谱柱（50m**0..25mm）,微量注射器：

60%乙醇水溶液配制：

吸取60mL无水乙醇至100mL量筒，加纯净水

至100mL即得；

2%乙酸乙酯标样：

吸取1mL色谱纯乙酸乙酯至50mL量筒，加上述

60%乙醇水溶液至50mL即得；

2%乙酸正丁酯内标：

吸取1mL色谱纯乙酸正丁酯至50mL量筒，加

上述60%乙醇水溶液至50mL即得；

实验二HPLC法测定饮料中人工色素的含量

一、目的与要求

1.理解反相色谱的原理和应用。

2.掌握外标定量方法。

二、基本原理

食品着色剂是以给食品着色为主要目的的，也称食用色素。

食品着色剂使食品具有悦目的色泽，对增加食品的嗜好性及刺激食欲有重要意义。

大量的研究报告指出，过多的食用合成色素不仅不能向人体提供营养物质，某些合成色素甚至会危害人体健康，导致生育力下降、畸胎等等，有些色素在人体内可能转换成致癌物质。

危害包括一般毒性、致泻性、致突性（基因突变）与致癌作用。

高效液相色谱分离是利用试样中各组分在色谱柱中的淋洗液和固定相间的分配系数不同，当试样随着流动相进入色谱柱中后，组分就在其中的两相间进行反复多次的分配（吸附一脱附一放出），由于固定相对各种组分的吸附能力不同（即保存作用不同），因此各组份在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定的柱长后，便彼此分离，顺序离开色谱柱进入检测器，产生的离子流信号经放大后，在记录器上描绘出各组分的色谱峰。

三、仪器与试剂

LC100高效液相色谱仪（MV检测器;

二元梯度泵），上海五丰。

样品:

前处理后的“美年达”色素浓缩样品液、日落黄色素标准溶

液。

甲醇（HPLC纯），重蒸镭水、乙酸铉。

四、实验内容与步骤

1.色谱条件

色谱柱AgilentXDB-C18色谱柱X250mm,5Um）;

流动相：

（A）L乙酸筱溶液，（B）甲醇；

柱温：

30℃；

梯度洗脱程序为0min"

min,

20%B"

35%B；

min"

min,35%B；

min,35%B~98%B；

minmin,98%B；

minmin,98%B20%B；

minmin,

20%B~20%B；

检测波长484nm。

2.标准液制备及标准曲线制备

准确称取制备好的□落黄色素标准样品5mg,加蒸镭水溶解后移人10mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇晃使其浓度均匀，制得hng/ml日落黄色素标准液，分别取该标溶液2uL,4uL,6uL,8uL,10uL进样，分别测出峰面积，不强制过原点，以浓度对峰面积进行回归，得标准曲线和回归方程。

数据处理机给出峰面积值，以标准品进样量（ug）为纵坐标（Y）,峰面积为横坐标（X）,得标准曲线。

3.样品液制备

取商品“美年达”50ml于100ml烧杯中，80°

C加热10分钟驱除二氧化碳，间歇搅拌。

用水定容至100ml。

4.色谱测定

用微量注射器分别吸取10UL标品、试样溶液注入色谱仪，取得色谱图，以保留时间对照定性，确定落日黄色谱峰，并记录锋面积。

五、实验数据及处理

1.以色谱峰面积为纵坐标。

落口黄标准系列溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线。

2.根据试样溶液色谱图中落口黄峰面积，查出试样溶液中落口黄的含量，并计算样品中落口黄的含量（Ug/mL）。

六、问题与讨论

1.正相、反相色谱分离系统是如何定义的，它们分别适用于什么情况

2.为什么可以利用色谱峰的保留时间进行色谱定性分析

实验三紫外吸收光谱法测定食品中苯甲酸的含量一、实验目的

1.了解紫外光谱法原理及苯甲酸的紫外吸收特征。

2.了解紫外可见分光光度计的使用。

3.学习利用吸收光谱曲线进行化合物鉴定和含量分析。

许多有机化合物或其衍生物，在可见光或紫外光区有吸收光谱，各种物质分子有其特征的吸收光谱。

吸收光谱的形状和物质的特性有关，可作为定型鉴定的依据，而在某选定的波长下，测量其吸收光度即可对物质进行定量分析工紫外吸收光谱用于定量分析时，符合朗伯比尔定律。

据朗伯―比尔定律：

当一定波长的单色光通过某物质的溶液时，入射光强10与透过光强It之比的对数与该物质的浓度及液层厚度成正比，数学表达式为：

A=iog=k=kbc,A为吸光度，b为溶液层厚度，单位cm；

c为被测物质浓度，当浓度单位为mol/L；

k为摩尔吸光系数。

在比色皿及入射光强度一定时，吸光度正比于被测物质浓度，这便是定量分析的依据。

苯甲酸别名安息香酸，白色单斜晶系片状或针状结晶体，略带安息香或苯甲醛气味。

熔点℃,在100C时迅速升华，它的蒸气有很强的刺激性，吸入后易引起咳嗽。

苯甲酸在常温下微溶于水，石油酸，但溶于热水，水溶液呈酸性；

易溶于醇、酸、丙酮等有机溶剂，也溶于非挥发性油。

对霉菌，酵母和细菌等有较好的抑制作用，因而对微生物有强烈毒性，但对人体毒害不明显。

苯甲酸及其钠盐可用作乳胶、牙膏、果酱或其他食品的抑菌剂和防腐剂，也可作染色和印色的媒染剂。

在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nmo可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。

三、仪器和试剂

1、仪器

紫外-可见分光光度计，1cm石英比色皿，移液管，容量瓶。

2、试剂

苯甲酸（AR）,L氢氧化钠溶液。

1.苯甲酸标准储备液的制备

精确称取苯甲酸lOOmg,用L氢氧化钠溶液100ml溶解后，再用蒸储水稀释1000ml。

此溶液1ml含苯甲酸。

2.苯甲酸吸收曲线的绘制

吸取苯甲酸贮备液，放入50ml容量瓶中，用L氢氧化钠溶液定容,摇匀。

将装有参比溶液和标准试样的比色皿放入光路中，在紫外分光光度计上，从波长200-400nm,扫描出苯的吸收曲线。

3.苯甲酸标准曲线的绘制

分别吸取、、、、的苯甲酸标准溶液于5只10ml容量瓶中，用L氢氧化钠溶液稀释至刻度，摇匀。

用1cm石英比色皿，以L氢氧化钠溶液做参比溶液，在最大吸收波长处分别测定其吸光度。

以吸光度为纵坐标，苯甲酸的含量为横坐标绘制标准曲线。

4.测定试样中苯甲酸的含量

用1cm石英比色皿，以L氢氧化钠溶液做参比溶液，在最大吸收波长处测定试样溶液的吸光度，根据苯甲酸的标准曲线得样品浓度。

五、实验结果

1.最大吸收波长（请提供紫外吸收光谱图）

2.苯甲酸标准曲线

浓度c（mg/ml）

吸光度A