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第二章 核酸2Word格式.docx

1、一是由Chargaff发现的DNA中碱基的等价性,提示A=T、GC间碱基互补的可能性;二是DNA纤维的X-射线衍射分析资料,提示了双螺旋结构的可能性。DNA是由两条反向直线型多核苷酸组成的双螺旋分子。单链多核苷酸中两个核苷酸之间的唯一连键是3,5-磷酸二酯键。按Watson-Crick模型,DNA的结构特点有:两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕;碱基位于结构的内侧,而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架;碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋;双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm,两核酸之间的夹角是36,每对螺旋由10对碱基组

2、成;碱基按A=T,GC配对互补,彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力;双螺旋结构表面有两条螺形凹沟,一大一小。DNA能够以几种不同的结构形式存在。从B型DNA转变而来的两种结构A型和Z型结构巳在结晶研究中得到证实。在顺序相同的情况下A型螺旋较B型更短,具有稍大的直径。DNA中的一些特殊顺序能引起DNA弯曲。带有同一条链自身互补的颠倒重复能形成发卡或十字架结构,以镜影排列的多嘧啶序列可以通过分子内折叠形成三股螺旋,被称为H -DNA的三链螺旋结构。由于它存在于基因调控区,因而有重要的生物学意义。不同类型的RNA分子可自身回折形成发卡、局部双螺旋区,形成二级结构,并折叠产生三

3、级结构,RNA与蛋白质复合物则是四级结构。tRNA的二级结构为三叶草形,三级结构为倒L形。mRNA则是把遗传信息从DNA转移到核糖体以进行蛋白质合成的载体。核酸的糖苷键和磷酸二酯键可被酸、碱和酶水解,产生碱基、核苷、核苷酸和寡核苷酸。酸水解时,糖苷键比磷酸酯键易于水解;嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键易于水解;嘌呤碱与脱氧核糖的糖苷键最不稳定。RNA易被稀碱水解,产生2-和3-核苷酸,DNA对碱比较稳定。细胞内有各种核酸酶可以分解核酸。其中限制性内切酶是基因工程的重要工具酶。核酸的碱基和磷酸基均能解离,因此核酸具有酸碱性。碱基杂环中的氮具有结合和释放质子的能力。核苷和核苷酸的碱基与游离碱基的解离

4、性质相近,它们是兼性离子。核酸的碱基具有共轭双键,因而有紫外吸收的性质。各种碱基、核苷和核苷酸的吸收光谱略有区别。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于测定核酸。根据260nm与280nm的吸收光度(A260)可判断核酸纯度。变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏,双链解开,但共价键并未断裂。引起变性的因素很多,升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性。核酸变性时,物理化学性质将发生改变,表现出增色效应。热变性一半时的温度称为熔点或变性温度,以Tm来表示。DNA的G+C含量影响Tm值。由于GC比AT碱基对更稳定,因此富含GC的DNA比富含AT的DNA具有更高的熔解温度。根据经验公

5、式xG+C =(Tm - 69.3) 2.44可以由DNA的Tm值计算G+C含量,或由G+C含量计算Tm值。变性DNA在适当条件下可以复性,物化性质得到恢复,具有减色效应。用不同来源的DNA进行退火,可得到杂交分子。也可以由DNA链与互补RNA链得到杂交分子。杂交的程度依赖于序列同源性。分子杂交是用于研究和分离特殊基因和RNA的重要分子生物学技术。染色体中的DNA分子是细胞内最大的大分子。许多较小的DNA分子,如病毒DNA、质粒DNA、线粒体DNA和叶绿体NA也存在于细胞中。许多DNA分子,特别是细菌的染色体DNA和线粒体、叶绿体DNA是环形的。病毒和染色体DNA有一个共同的特点,就是它们比包

6、装它们的病毒颗粒和细胞器要长得多,真核细胞所含的DNA要比细菌细胞多得多。真核细胞染色质组织的基本单位是核小体,它由DNA和8个组蛋白分子构成的蛋白质核心颗粒组成。其中H2A,H2B,H3,H4各占两个分子,有一段DNA(约146bp)围绕着组蛋白核心形成左手性的线圈型超螺旋。细菌染色体也被高度折叠,压缩成拟核结构,但它们比真核细胞染色体更富动态和不规则,这反映了原核生物细胞周期短和极活跃的细胞代谢。二、习 题(一)名词解释1单核苷酸(mononucleotide)2磷酸二酯键(phosphodiester bonds)3不对称比率(dissymmetry ratio)4碱基互补规律(comp

7、lementary base pairing)5反密码子(anticodon)6顺反子(cistron)7核酸的变性与复性(denaturation、renaturation)8退火(annealing)9增色效应(hyper chromic effect)10减色效应(hypo chromic effect)11噬菌体(phage)12发夹结构(hairpin structure)13DNA的熔解温度(melting temperature Tm)14分子杂交(molecular hybridization)15环化核苷酸(cyclic nucleotide)(二)填空题1DNA双螺旋结构模

8、型是_于_年提出的。2核酸的基本结构单位是_。3脱氧核糖核酸在糖环_位置不带羟基。4两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于_中,RNA主要位于_中。5核酸分子中的糖苷键均为_型糖苷键。糖环与碱基之间的连键为_键。核苷与核苷之间通过_键连接成多聚体。6核酸的特征元素_。7碱基与戊糖间是C-C连接的是_核苷。8DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。9DNA中的_嘧啶碱与RNA中的_嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。 10DNA双螺旋的两股链的顺序是_关系。11给动物食用3H标记的_,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。12B型DNA双螺旋的螺距为_,每匝螺旋有_对碱基

9、,每对碱基的转角是_。13在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重_,Tm(熔解温度)则_,分子比较稳定。14在_ _条件下,互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。15_RNA分子指导蛋白质合成,_RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。16DNA分子的沉降系数决定于_、_。17DNA变性后,紫外吸收_ _,粘度_ _、浮力密度_ _,生物活性将_ _。18因为核酸分子具有_ _、_ _,所以在_nm处有吸收峰,可用紫外分光光度计测定。19双链DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD260_,同样条件下,单链DNA的OD260_。20DNA样品的均一性愈高,其熔解过程

10、的温度范围愈_。21DNA所在介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围愈_,熔解温度愈_,所以DNA应保存在较_浓度的盐溶液中,通常为_mol/L的NaCI溶液。22mRNA在细胞内的种类_,但只占RNA总量的_,它是以_为模板合成的,又是_合成的模板。23变性DNA 的复性与许多因素有关,包括_,_,_,_,_,等。24维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如_,_和_也起一定作用。25mRNA的二级结构呈_形,三级结构呈_形,其3末端有一共同碱基序列_其功能是_。26常见的环化核苷酸有_和_。其作用是_,他们核糖上的_位与_位磷酸-OH环化。27真核

11、细胞的mRNA帽子由_组成,其尾部由_组成,他们的功能分别是_,_。28DNA在水溶解中热变性之后,如果将溶液迅速冷却,则DNA保持_状态;若使溶液缓慢冷却,则DNA重新形成_。(三)选择题1ATP分子中各组分的连接方式是:AR-A-P-P-P BA-R-P-P-P CP-A-R-P-P DP-R-A-P-P2hnRNA是下列哪种RNA的前体?AtRNA BrRNA CmRNA DSnRNA3决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是:AXCCA3末端BTC环; CDHU环D额外环 E反密码子环4根据Watson-Crick模型,求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸对的平均数为::A25400 B2

12、540 C29411 D2941 E35055构成多核苷酸链骨架的关键是:A23-磷酸二酯键 B 24-磷酸二酯键C25-磷酸二酯键 D 34-磷酸二酯键 E35-磷酸二酯键6与片段TAGAp互补的片段为:AAGATp BATCTp CTCTAp DUAUAp7含有稀有碱基比例较多的核酸是:A胞核DNA B线粒体DNA CtRNA D mRNA8真核细胞mRNA帽子结构最多见的是:Am7APPPNmPNmPB m7GPPPNmPNmP Cm7UPPPNmPNmP Dm7CPPPNmPNmP E m7TPPPNmPNmP9 DNA变性后理化性质有下述改变:A对260nm紫外吸收减少 B溶液粘度下降 C磷酸二酯键断裂 D核苷酸断裂10双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:AA+G BC+T CA+T DG+C EA+C11密码子GA,所识别的密码子是:ACAU BUGC CCGU DUAC E都不对12真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接,连接方式是:A2-5 B3-5 C3-3 D5-5 E3-313在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是:AAMP BGMP CCMPDUMP14下列对于环核苷酸的叙述,哪一项是错误的?AcAMP与cGMP的生物学作用相反 B 重要的环核苷酸有cAMP与cGMPCcAMP是一种第二信使

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