第二章 核酸2Word格式.docx

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第二章 核酸2Word格式.docx

一是由Chargaff发现的DNA中碱基的等价性,提示A=T、G≡C间碱基互补的可能性;

二是DNA纤维的X-射线衍射分析资料,提示了双螺旋结构的可能性。

DNA是由两条反向直线型多核苷酸组成的双螺旋分子。

单链多核苷酸中两个核苷酸之间的唯一连键是3′,5′-磷酸二酯键。

按Watson-Crick模型,DNA的结构特点有:

两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕;

碱基位于结构的内侧,而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架;

碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行。

两条链皆为右手螺旋;

双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm,两核酸之间的夹角是36°

,每对螺旋由10对碱基组成;

碱基按A=T,G≡C配对互补,彼此以氢键相连系。

维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力;

双螺旋结构表面有两条螺形凹沟,一大一小。

DNA能够以几种不同的结构形式存在。

从B型DNA转变而来的两种结构A型和Z型结构巳在结晶研究中得到证实。

在顺序相同的情况下A型螺旋较B型更短,具有稍大的直径。

DNA中的一些特殊顺序能引起DNA弯曲。

带有同一条链自身互补的颠倒重复能形成发卡或十字架结构,以镜影排列的多嘧啶序列可以通过分子内折叠形成三股螺旋,被称为H-DNA的三链螺旋结构。

由于它存在于基因调控区,因而有重要的生物学意义。

不同类型的RNA分子可自身回折形成发卡、局部双螺旋区,形成二级结构,并折叠产生三级结构,RNA与蛋白质复合物则是四级结构。

tRNA的二级结构为三叶草形,三级结构为倒L形。

mRNA则是把遗传信息从DNA转移到核糖体以进行蛋白质合成的载体。

核酸的糖苷键和磷酸二酯键可被酸、碱和酶水解,产生碱基、核苷、核苷酸和寡核苷酸。

酸水解时,糖苷键比磷酸酯键易于水解;

嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键易于水解;

嘌呤碱与脱氧核糖的糖苷键最不稳定。

RNA易被稀碱水解,产生2’-和3’-核苷酸,DNA对碱比较稳定。

细胞内有各种核酸酶可以分解核酸。

其中限制性内切酶是基因工程的重要工具酶。

核酸的碱基和磷酸基均能解离,因此核酸具有酸碱性。

碱基杂环中的氮具有结合和释放质子的能力。

核苷和核苷酸的碱基与游离碱基的解离性质相近,它们是兼性离子。

核酸的碱基具有共轭双键,因而有紫外吸收的性质。

各种碱基、核苷和核苷酸的吸收光谱略有区别。

核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于测定核酸。

根据260nm与280nm的吸收光度(A260)可判断核酸纯度。

变性作用是指核酸双螺旋结构被破坏,双链解开,但共价键并未断裂。

引起变性的因素很多,升高温度、过酸、过碱、纯水以及加入变性剂等都能造成核酸变性。

核酸变性时,物理化学性质将发生改变,表现出增色效应。

热变性一半时的温度称为熔点或变性温度,以Tm来表示。

DNA的G+C含量影响Tm值。

由于G≡C比A=T碱基对更稳定,因此富含G≡C的DNA比富含A=T的DNA具有更高的熔解温度。

根据经验公式xG+C=(Tm-69.3)×

2.44可以由DNA的Tm值计算G+C含量,或由G+C含量计算Tm值。

变性DNA在适当条件下可以复性,物化性质得到恢复,具有减色效应。

用不同来源的DNA进行退火,可得到杂交分子。

也可以由DNA链与互补RNA链得到杂交分子。

杂交的程度依赖于序列同源性。

分子杂交是用于研究和分离特殊基因和RNA的重要分子生物学技术。

染色体中的DNA分子是细胞内最大的大分子。

许多较小的DNA分子,如病毒DNA、质粒DNA、线粒体DNA和叶绿体[]NA也存在于细胞中。

许多DNA分子,特别是细菌的染色体DNA和线粒体、叶绿体DNA是环形的。

病毒和染色体DNA有一个共同的特点,就是它们比包装它们的病毒颗粒和细胞器要长得多,真核细胞所含的DNA要比细菌细胞多得多。

真核细胞染色质组织的基本单位是核小体,它由DNA和8个组蛋白分子构成的蛋白质核心颗粒组成。

其中H2A,H2B,H3,H4各占两个分子,有一段DNA(约146bp)围绕着组蛋白核心形成左手性的线圈型超螺旋。

细菌染色体也被高度折叠,压缩成拟核结构,但它们比真核细胞染色体更富动态和不规则,这反映了原核生物细胞周期短和极活跃的细胞代谢。

二、习 

 

(一)名词解释

1.单核苷酸(mononucleotide)2.磷酸二酯键(phosphodiesterbonds)

3.不对称比率(dissymmetryratio)4.碱基互补规律(complementarybasepairing)

5.反密码子(anticodon)6.顺反子(cistron)

7.核酸的变性与复性(denaturation、renaturation)8.退火(annealing)

9.增色效应(hyperchromiceffect)10.减色效应(hypochromiceffect)

11.噬菌体(phage)12.发夹结构(hairpinstructure)

13.DNA的熔解温度(meltingtemperatureTm)14.分子杂交(molecularhybridization)

15.环化核苷酸(cyclicnucleotide)

(二)填空题

1.DNA双螺旋结构模型是_________于____年提出的。

2.核酸的基本结构单位是_____。

3.脱氧核糖核酸在糖环______位置不带羟基。

4.两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于____中,RNA主要位于____中。

5.核酸分子中的糖苷键均为_____型糖苷键。

糖环与碱基之间的连键为_____键。

核苷与核苷之间通过_____键连接成多聚体。

6.核酸的特征元素____。

7.碱基与戊糖间是C-C连接的是______核苷。

8.DNA中的____嘧啶碱与RNA中的_____嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。

9.DNA中的____嘧啶碱与RNA中的_____嘧啶碱的氢键结合性质是相似的。

10.DNA双螺旋的两股链的顺序是______关系。

11.给动物食用3H标记的_______,可使DNA带有放射性,而RNA不带放射性。

12.B型DNA双螺旋的螺距为___,每匝螺旋有___对碱基,每对碱基的转角是___。

13.在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重___,Tm(熔解温度)则___,分子比较稳定。

14.在_ 

__条件下,互补的单股核苷酸序列将缔结成双链分子。

15.____RNA分子指导蛋白质合成,_____RNA分子用作蛋白质合成中活化氨基酸的载体。

16.DNA分子的沉降系数决定于_____、_____。

17.DNA变性后,紫外吸收__ 

_,粘度_ 

__、浮力密度_ 

__,生物活性将__ 

_。

18.因为核酸分子具有_ 

__、__ 

_,所以在___nm处有吸收峰,可用紫外分光光度计测定。

19.双链DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD260______,同样条件下,单链DNA的OD260______。

20.DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈______。

21.DNA所在介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围愈___,熔解温度愈___,所以DNA应保存在较_____浓度的盐溶液中,通常为_____mol/L的NaCI溶液。

22.mRNA在细胞内的种类___,但只占RNA总量的____,它是以_____为模板合成的,又是_______合成的模板。

23.变性DNA的复性与许多因素有关,包括____,____,____,____,_____,等。

24.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_____,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如_____,______和_____也起一定作用。

25.mRNA的二级结构呈___形,三级结构呈___形,其3'末端有一共同碱基序列___其功能是___。

26.常见的环化核苷酸有___和___。

其作用是___,他们核糖上的___位与___位磷酸-OH环化。

27.真核细胞的mRNA帽子由___组成,其尾部由___组成,他们的功能分别是______,_______。

28.DNA在水溶解中热变性之后,如果将溶液迅速冷却,则DNA保持____状态;

若使溶液缓慢冷却,则DNA重新形成___。

(三)选择题

1.ATP分子中各组分的连接方式是:

A.R-A-P-P-P 

B.A-R-P-P-P 

C.P-A-R-P-P 

D.P-R-A-P-P

2.hnRNA是下列哪种RNA的前体?

A.tRNA 

B.rRNA 

C.mRNA 

D.SnRNA

3.决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是:

A.–XCCA3`末端 

B.TψC环;

C.DHU环 

D.额外环 

E.反密码子环

4.根据Watson-Crick模型,求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸对的平均数为:

:

A.25400  

B.2540 

C.29411 

D.2941 

E.3505

5.构成多核苷酸链骨架的关键是:

A.2′3′-磷酸二酯键 

B.2′4′-磷酸二酯键 

C.2′5′-磷酸二酯键 

D.3′4′-磷酸二酯键 

E.3′5′-磷酸二酯键

6.与片段TAGAp互补的片段为:

A.AGATp 

B.ATCTp 

C.TCTAp 

D.UAUAp

7.含有稀有碱基比例较多的核酸是:

A.胞核DNA 

B.线粒体DNA 

C.tRNA 

D.mRNA

8.真核细胞mRNA帽子结构最多见的是:

A.m7APPPNmPNmP 

B.m7GPPPNmPNmP 

C.m7UPPPNmPNmP 

D.m7CPPPNmPNmPE.m7TPPPNmPNmP

9. 

DNA变性后理化性质有下述改变:

A.对260nm紫外吸收减少 

B.溶液粘度下降

C.磷酸二酯键断裂 

D.核苷酸断裂

10.双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:

A.A+G 

B.C+T 

C.A+T 

D.G+C 

E.A+C

11.密码子GψA,所识别的密码子是:

A.CAU 

B.UGC 

C.CGU 

 

D.UAC 

E.都不对

12.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接,连接方式是:

A.2′-5′ 

B.3′-5′ 

C.3′-3′ 

D.5′-5′ 

E.3′-3′

13.在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是:

A.AMP 

B.GMP 

C.CMP 

D.UMP

14.下列对于环核苷酸的叙述,哪一项是错误的?

A.cAMP与cGMP的生物学作用相反 

B.重要的环核苷酸有cAMP与cGMP

C.cAMP是一种第二信使

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