实验一使用高倍显微镜观察几种细胞讲解Word文档格式.docx

1、（4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。3、 动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似） 4、 动物神经细胞永久装片的观察。五、考点提示：1、松针的叶面结构是什么样的？2、动物细胞的结构是什么样的？与植物细胞又什么不同？3、显微镜的物镜倍数愈大，视野的亮度如何？物体的大小如何？4、如何调节焦距？5、如何才能使切片尽量的薄？切片的厚薄对显微镜下观察的效果有什么影响。实验二：检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一、实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质，阐明实验原理颜色反应，识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色，初步掌握

2、鉴定上述化合物的基本方法，学会描述实验现象，掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法。二、实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。1、生物组织中普遍存在的可溶性糖类较多，有葡萄糖、果糖、麦芽糖和蔗糖。前三种糖的分子内都含有游离的具还原性的半缩醛羟基，因此叫做还原糖；蔗糖分子内没有，为非还原糖。实验中所用的斐林试剂，只能鉴定生物组织中可溶性还原糖，而不能鉴定可溶 性非还原糖。O可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色的Cu2 沉淀。如：2+O + H葡萄糖酸 + CuO（砖红色）葡萄糖 + 2Cu + 4OH 加热 2 22+ C

3、uO，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。Cu 即被还原成 2 砖红色沉淀浅蓝色用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液变化过程为：棕色 。或淀粉遇碘变蓝色（直链）紫（红）色（支链）、脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不2溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或 与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染等。脂色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹，苏丹，苏丹黑及油红O肪被染色，实际上是苏丹染料被

4、脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时，对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理，适当提高温度（37 -60）对组织切片染色效果是有好处的。 脂类染色，用冰冻或石蜡切片，以水溶性封固剂封固，如甘油、明胶和阿拉伯糖胶等。脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色或橙红色（或被苏丹染液染成红色），胆脂素呈淡 红色，脂肪酸不着色，细胞核呈蓝色。、蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键，在碱性32+ CuNaOH溶液中能与双缩脲试剂中的作用，产生紫色反应。） 三、实验材料：1、做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜

5、色较浅，易于观察。）经试验比较，颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。2、做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖麻种子）。3、做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。4、淀粉的鉴定：马铃薯匀浆。四、实验用具：双面刀片、试管（最好用刻度试管）、试管夹、试管架、大小烧杯、小量 筒、滴管、酒精灯、三脚架、石棉网、火柴、载玻片、盖玻片、毛笔、吸水纸、显微镜五、实验试剂：1斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为溶液） 2苏丹或苏丹染液 3双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL

6、NaOH溶液和B液：质量浓度为CuSO溶液） 44体积分数为50%的酒精溶液 5碘液 6蒸馏水 六、方法步骤：一、可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。2. 取1支试管，向试管内注 组织样液。2mL入新制的向试管内注入3. 1mL 斐林试剂，振荡。应将组成斐林试剂的甲液、乙液才将甲、使用前储存，配制、分别斐林试剂很不稳定，液混合保存时，生成的0.05g/mLCuS0.01g/mL甲Cu 乙液等量混匀成斐林试剂； 乙液分别加入苹果切勿将甲液、组

7、织样液中进行检测。OH ）（ 成黑色乙液分别加入时可能会甲、与组织样液发生反应，无Cu OH0C4. 试管放在盛有50-65温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝砖红色（沉 色 棕色 淀） 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。二、脂肪的鉴定 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。干种子要浸泡34小时，新花生的浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短，不易切片；浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。在

8、子叶薄片上滴23滴苏丹或苏 1分钟。丹染液，染色染色时间不宜过长。用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 滴蒸馏水，盖上盖玻片。12滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片的最橘黄色薄处，可看到细胞中有染成 圆形小颗粒。或红色装片不宜久放。时间一长，油滴会溶解在乙醇中。三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 黄豆浸泡制备组织样液。磨成浆，也可购新鲜豆浆以 （浸泡、去皮研磨、过滤。）节约实验时间。鉴定。

9、加样液约2ml先加储BA液和液也要分开配制，NaOH于试管白质反应提供一个碱性的环B液后加存。鉴定时，中，加入双缩脲试剂A摇匀；先加A液再加入双缩脲试剂B34B、 液。境。A会导致 滴，摇匀，溶液变紫色。 沉淀，而失效。溶液不能多加 CuSO4否则CuSO应的真实颜色。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋可用蛋清代替豆浆。清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁下分970 Cu和水生成天，容易2与溶液，C液混装或同时加入2Cu （ OH ）变C的蓝色会遮盖 上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。附：淀粉的检测和观察 待测组织样液，2ml用试管取滴碘液，观2向试管内滴加 察颜

10、色变化。碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 七、考点提示： 葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；淀粉、 答：1、常见还原性糖与非还原性糖有哪些？ 蔗糖、纤维素都是非还原性糖。梨、苹果、含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如： 2、还原性糖植物组织取材条件？答： 白色甘蓝叶、白萝卜等。加石英砂是为了使研磨更充答：、研磨中为何要加石英砂？不加石英砂对实验有何影响？ 3 分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。产 答：混合后使用；4、斐林试剂甲、乙两液的使用方法？混合的目的？为何要现混现用？ 生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。 棕色 砖红色。5、还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变

11、化的顺序为？ 答：浅蓝色 只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。6、花生种子切片为何要薄？、转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是7 答：切片的厚薄不均匀。什么？ 洗去浮色。8、脂肪鉴定中乙醇作用？ 9、双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？先加A液的目的怎样通过对比看颜色变化？不能混合；先加A液的目的是使溶液呈碱性；先留出一些大豆组织样液做对比。实验三：观察DNA和RNA在细胞中的分布 一、实验原理：1、真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。2、甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使D

12、NA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。3、盐酸的作用 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输； 盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合 人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞三、实验用具：大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、 石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜四、方法步骤：1、取材 滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液； 刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下； 涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中； 烘：将

13、涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。2、水解 的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解；8%质量分数为30ml解：将烘干的载玻片放入装有 保：将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5分钟。3、冲洗涂片 冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟； 吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。4、染色 染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟；吸去多余染色剂； 盖：盖上盖玻片。5、观察 低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰； 高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。1、取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；2、取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞；3、 冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗；4、用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载 玻片均匀受热，以