核酸分子杂交试题Word下载.docx

1、A.50300bp B. 20200bp 400bp 5007.进行核酸杂交时，一般适宜的复性温度较Tm值低（ ）o）下进行。9.下列哪种试剂能降低核酸杂交的 币值（B ）o10.在凝胶中核酸变性时，为了使DNA片段在合理的时间内从凝胶中移动出来, 必须将最长的DNA片段控制在大约（ ）。11.将RNA或DNA变性后直接点样于硝酸纤维素膜上，用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究，称为（ ）oA.原位杂交 B.核酸酶保护实验C.斑点印迹 D.狭缝印迹12.核酸保持在细胞或组织切片中经适当方法处理细胞或组织后，将标记的核 酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为（ ）oA.原位杂交 B.核

2、酸酶保护实验 C.斑点印迹 D.狭缝印迹13.在将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前，必须将膜上所有能与DNA 结合的位点全部封闭，称为（B ）oA.杂交 B.预杂交C.杂交前处理 D. Nouthern印迹杂交14.进行间期细胞内染色体DNA的原位杂交时，关键是（ ）。A.细胞的培养 B.加固定液C.载波片上的固定 D.细胞染色体的制备15.组织细胞杂交前的预处理的关键是（C ）oA.降解细胞外蛋白 B.降解细胞内蛋白C.降解核酸表面蛋白 D.降解核酸内DNA16.组织细胞杂交前预处理时，降解核酸表面的蛋白质常用的蛋白酶是（ ）oA.蛋白酶C B.蛋白酶KC.蛋白酶A D.蛋白酶I17

3、.在进行原位杂交时，RNA探针杂交的时间最好是（ ）o18.在核酸杂交中，目前应用最为广泛的一种探针是（A ）。A.基因组DNA探针 B.寡核昔酸探针C. cDNA探针 D. RNA探针19.在Southern印迹杂交中用来标记核酸探针最常用的核素是（ ）。A. 32P B. 3H C. 35S D. 125120.在下列非核素标记物中，既属于半抗原，同时也属于配体的是（ ）oA.地高辛 B.生物素 C.亲合素 D.罗丹明21.一些标记物可与某种物质反应产生化学发光现象，通过化学发光可以象核素一样直接使X线胶片上的乳胶颗粒感光。这些标记物称为（ ）。A.半抗原 B.配体 C.荧光素 D.化学发

4、光探针22.Sephadex G50柱析法中，随着流动相流出的是（ ）。A.小分子物质 B. dATPC.大分子探针 D. dGTP23.下列DNA分子的组成中，哪种是核酸变性的最主要的因素（C ）oA. AT B. AG C. GC D. TC24.在探针的纯化时，无水乙醇可以沉淀（ ）。A. DNA片段 B.蛋白质分子C. RNA片段 D.小分子物质25.待测DNA样品的电泳分离中，作为分子量标准的入DNA是用（ ）酶消化的。3.多项选择题:1.导致DNA变性的常用方法有（ ）oA.热变性 B.碱变性 C.酸变性 D.化学试剂变性2.影响核酸杂交的因素有（ ）oA.核酸分子的浓度和长度 B

5、.温度C.离子浓度 D.核酸分子的复杂性3.核酸分子处于何种情况下，核酸的双链可以完全打开成为单链（ ）oA. PH3 B. 3PH5 C. 5104.在杂交液中加入甲酰胺，其目的是（ ）oA.在低温下探针更稳定B.使杂交液为中性C.能更好的保留非共价结合的核酸D.减少核酸杂交的副反应5.为减少非特异性杂交反应，在杂交前将非特异性杂交位点进行封闭，常用的 封闭物有（ ）oB.复性的非特异性RNAC.变性的非特异性DNAD.高分子化合物E.低分子化合物6.下列哪些步骤属于Southern印迹杂交（ ）。A.待测核酸样品的制备B.待测DNA样品的电泳分离C.凝胶中核酸的变性D.Southern 转

6、膜7.Southern转膜时常用的膜是（ ）。A.化学活化膜 B.尼龙膜 C.硝酸纤维素膜 D.滤纸8.常用的Southern转膜方法有哪几种（ ）。A.硝酸纤维素膜法 B.毛细管虹吸印迹法C.电转印法 D.真空转移法9.用于Southern印迹杂交的探针可以是（ ）。A.纯化的DNA片段 B.纯化的RNA片段C.多核昔酸 D.寡核昔酸片段10.原位杂交可以用来检测（ ）oA. DNA B. RNA C. cDNA D. RNA 和 DNA11.原位杂交所用的探针可以是（ ）oA. mRNA B. DNA C. RNA D. cDNA12.Northern印迹杂交中转膜时可采用的方法有（ ）。

7、A.毛细管虹吸印迹法 B.电转印法13.核酸原位杂交包括（ ）oA.组织细胞的固定 B.预杂交 C.杂交 D.冲洗14.下列哪些属于核酸原位杂交的常用固定液（ ）oA. 10%甲醛 B. 4%多聚甲醛C.乙醇：冰醋酸（3: 1） D.戊二醛15.RNA酶保护分析法可用于（ ）oA. mRNA定量 B. mRNA定性C. mRNA末端定位 D.确定内含子在相应基因中16.核酸酶S1能降解（ ）oA. DNA单链 B. DNA双链C. RNA单链 D. DNA/RNA杂交双链17.根据检测方法的不同，非核素标记物可分为以下几类（ ）oA.半抗原B.配体 C.荧光素 D.化学发光探针18.下列物质属

8、于半抗原的是（ ）。A.亲和素 B.罗丹明 C.生物素 D.地高幸19.核酸分子杂交所用探针采用体外标记法的优点是（ ）oA.安全系数高B.需要活体生物或细胞培养系统C.探针，核酸分离和纯化及储存很方便D.体外标记一般比体内标记的比放射活性高20.化学法体外标记核酸探针最常用的是（ ）oA. 1251 B.光敏生物素 C. 3H D. 32P21.DNA探针的酶促标记法包括（ ）oA.缺口平移法 B.随机引物法C. PCR标记法 D.末端标记法22.探针的纯化包括（ ）。A.乙醇沉淀法 B. SephadexG-50C.甲醇沉淀法 D.丝柱离心法23 DNA变性后的理化性质的变化有（ ）oA.

9、粘度降低 B.密度增加C.紫外吸收值增加 D.熔点减小24.Southern杂交结果检测包括（ ）。A.放射自显影 B.比色或化学发光检测C.酶切图谱分析 D.凝胶电泳分离25.Southern杂交在医学中的应用包括（ ）。A.酶切图谱分析 B.特定基因定性和定量C.基因突变分析 D.限制性片段长度多态性的分析4.填空题：1.核酸分子杂交中，杂交的双方分别称为 与 。2.核酸分子杂交中已知的核酸序列称为 。3.适当的电泳缓冲液中，DNA在电场作用下，由负极向正极泳动，分子越大，7永动速度 O4.当促使变性的因素解除后，两条DNA又通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构，称为 O5.在DNA的

10、碱基组成中，AT之间是 氢键，GC之间是 氢键。6.鉴别DNA靶分子的杂交称为 ,鉴别RNA靶分子的杂交称为 。7.根据检测对象的不同，可将原位杂交分为 和 。8.常用的液相杂交有 和 o9RNA 酶保护分析法 （RPA ） 的基本程序包 扌舌： 、 、 、 、 O10. 液相杂交的核酸酶S1保护分析法可用于 、 、和 o11.核酸探针包括： 、 、 和 O12.在用核酸标记的探针，大多数标记方法需要的是Q-32P,末端标记必须使用 O13. 核酸的体外标记法分为 和 o14. 核酸的体外标记法中的酶法最常用的是 和 标记。五、简答题1、DNA变性的常用方法有哪几种2、简述DNA的复性过程。3

11、、一个良好固相支持物应具备哪些特性4、 试比较硝酸纤维素膜、尼龙膜和化学活化膜的优缺点。5、 核酸原位杂交的理想固定液应具备哪些特点6、 一种理想标记物应具备哪些特性7、 随机引物法标记DNA探针有哪些优点六、论述题1、 试述核酸分子杂交的原理。2、 试述影响核酸分子杂交的因素。3、试述Southern印迹杂交的基本步骤。4、试述Southern印迹的常用方法及原理。5、试述核酸原位杂交的基本过程。6、试述探针的种类及其制备。7、试述切口平移法标记DNA探针的原理。名词解释:SiRNA：利用双链小片段RNA高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因 表达，使细胞出现靶基因缺失的表型

12、。Blue/white screen:蓝白斑筛选。即B-半乳糖苗酶基因失活筛选。其原理是：某些质粒载体带有大 肠杆菌乳糖操纵子的lacZ基因，该基因含一段编码B-半乳糖昔酶氨基末端 145个氨基酸a肽的DNA片断，IPTG可诱导此片断合成，此片断能与宿主细 胞所编码的缺陷型B-半乳糖昔酶实现基因内a 互补，形成完整的B 半乳糖 昔酶。该酶能催化指使剂底物X-gal形成蓝色菌落。当外源基因插入lacZ基 因中MCS（多克隆位点），laca-肽基因阅读框架被破坏，细菌内将无B半乳 糖昔酶活性，结果重组克隆呈白色菌落。Knock down:（基因）敲除。是指对一个结构已知但功能未知的基因，从分子水平

13、上设计实 验，将基因去除，或用其它顺序相近基因取代，然后从整体观察实验动物，推 测相应基因的功能。基因敲除除可以终止某一基因的表达外，还包括引入新基 因及引入定点突变，既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也 可以用正常基因敲除相应的突变基因。G-protein :G蛋白。是三聚体GTP结合调节蛋白的简称，位于质膜内胞浆的一侧，由a, B, 丫三个亚基组成，BY二聚体通过共价结合锚定于膜上起稳定a亚基的作 用，而a亚基本身具有GTP酶活性。G蛋白在信号转导过程中起着分子开关的作 用，当G蛋白a亚基与GDP结合，处于关闭态；当胞外配体与受体结合形成复 合物时，导致受体胞内结构域与a亚基偶连，并促使a亚基结合的GDP被GTP 交换而被活化，即处于开启状态，从而传递信号。DNA-ch i p:DNA芯片。指通过微阵列技术将高密度DNA片断阵列通过高速机器人或原位合成 方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片等固相表面作为探针，荧光 标记的样品DNA/RNA借助碱基互补作用与探针进行杂交，从而进行大量的基因 表达及检测等方面的研究。Off-target effect:脱靶效应。指的是与一个内源性基因某一位点并不完全同源的RNA亦能通过抑 制翻译而导致基因表达的静默。Super gene fam iIy:超基因家族。指一个共同的