水质五日生化需氧量BOD5的测定.docx

1、水质五日生化需氧量BOD5的测定水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定中华人民共和国国家环境保护标准HJ 5052009代替GB/T 7488-1987水质 五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限

2、为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质 溶解氧的测定 碘量法GB/T 11913 水质 溶解氧的测定 电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（201）的暗处培养5d4h 或(2+5)d4h(先在04的暗处培养2d，接着在(20

3、1)的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在0.25g 六水合氯化铁（FeCl36H2O）溶于水中，稀释至1000ml，此溶液在04可稳定保存6 个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。4.4 稀释水：在520L 的玻璃

4、瓶中加入一定量的水，控制水温在(201)，用曝气装置（5.9）至少曝气1 小时，使稀释水中的溶解氧达到8mg/L 以上。使用前每升水中加入上述四种盐溶液（4.3）各1.0ml，混匀，20保存。在曝气的过程中防止污染，特别是防止带入有机物、金属、氧化物或还原物。2稀释水中氧的浓度不能过饱和，使用前需开口放置1 小时，且应在24 小时内使用。剩余的稀释水应弃去。4.5 接种稀释水：根据接种液的来源不同，每升稀释水（4.4）中加入适量接种液（4.2）：城市生活污水和污水处理厂出水加110 ml，河水或湖水加10100 ml，将接种稀释水存放在（201）的环境中，当天配制当天使用。接种的稀释水pH 值

5、为7.2，BOD5 应小于1.5mg/L。4.6 盐酸溶液，c(HCl)=0.5mol/L：将40ml 浓盐酸（HCl）溶于水中，稀释至1000ml。4.7 氢氧化钠溶液，c(NaOH)=0.5mol/L：将20g 氢氧化钠溶于水中，稀释至1000ml。4.8 亚硫酸钠溶液，c(Na2SO3)=0.025mol/L：将1.575g 亚硫酸钠（Na2SO3）溶于水中，稀释至1000ml。此溶液不稳定，需现用现配。4.9 葡萄糖- 谷氨酸标准溶液： 将葡萄糖（ C6H12O6 ， 优级纯） 和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH，优级纯）在130干燥1 小时，各称取150mg 溶

6、于水中，在1000ml 容量瓶中稀释至标线。此溶液的BOD5 为21020 mg/L，现用现配。该溶液也可少量冷冻保存，融化后立刻使用。4.10 丙烯基硫脲硝化抑制剂，(C4H8N2S)= 1.0g/L：溶解0.20g 丙烯基硫脲（C4H8N2S）于200ml水中混合，4保存，此溶液可稳定保存14d。4.11 乙酸溶液, 1+1。4.12 碘化钾溶液,(KI)=100 g/L：将10g 碘化钾(KI)溶于水中，稀释至100ml。4.13 淀粉溶液,=5 g/L：将0.50g 淀粉溶于水中，稀释至100ml。5 仪器和设备本标准除非另有说明，分析时均使用符合国家A 级标准的玻璃量器。本标准使用的

7、玻璃仪器须清洁、无毒性和可生化降解的物质。5.1 滤膜：孔径为1.6m。5.2 溶解氧瓶：带水封装置，容积250300 ml。5.3 稀释容器：10002000 ml 的量筒或容量瓶。5.4 虹吸管：供分取水样或添加稀释水。5.5 溶解氧测定仪。5.6 冷藏箱：04。5.7 冰箱：有冷冻和冷藏功能。5.8 带风扇的恒温培养箱：（201）。6 样品6.1 采集与保存样品采集按照地表水和污水监测技术规范（HJ/T 91）的相关规定执行。采集的样品应充满并密封于棕色玻璃瓶中，样品量不小于1000 ml，在04的暗处运输和保存，并于24 h 内尽快分析。24 h 内不能分析，可冷冻保存（冷冻保存时避免

8、样品瓶破裂），冷冻样品分析前需解冻、均质化和接种。6.2 样品的前处理6.2.1 pH 值调节若样品或稀释后样品pH 值不在68 范围内，应用盐酸溶液（4.6）或氢氧化钠溶液（4.7）调节其pH 值至68。6.2.2 余氯和结合氯的去除若样品中含有少量余氯，一般在采样后放置12h，游离氯即可消失。对在短时间内不能消失的余氯，可加入适量亚硫酸钠溶液去除样品中存在的余氯和结合氯，加入的亚硫酸钠溶液的量由下述方法确定。取已中和好的水样100ml，加入乙酸溶液（4.11）10ml、碘化钾溶液（4.12）1ml，混匀，暗处静置5min。用亚硫酸钠溶液滴定析出的碘至淡黄色，加入1ml 淀粉溶液（4.13）

9、呈蓝色。再继续滴定至蓝色刚刚褪去，即为终点，记录所用亚硫酸钠溶液体积，由亚硫酸钠溶液消耗的体积，计算出水样中应加亚硫酸钠溶液的体积。6.2.3 样品均质化含有大量颗粒物、需要较大稀释倍数的样品或经冷冻保存的样品，测定前均需将样品搅拌均匀。6.2.4 样品中有藻类若样品中有大量藻类存在，BOD5 的测定结果会偏高。当分析结果精度要求较高时，测定前应用滤孔为1.6m 的滤膜（5.1）过滤，检测报告中注明滤膜滤孔的大小。6.2.5 含盐量低的样品4若样品含盐量低，非稀释样品的电导率小于125S /cm 时，需加入适量相同体积的四种盐溶液（4.3），使样品的电导率大于125S/cm。每升样品中至少需加

10、入各种盐的体积V 按公式（1）计算：V = (K 12.8) /113.6 （1）式中：V 需加入各种盐的体积，ml；K 样品需要提高的电导率值，S/cm。7 分析步骤7.1 非稀释法非稀释法分为二种情况：非稀释法和非稀释接种法。如样品中的有机物含量较少，BOD5 的质量浓度不大于6mg/L，且样品中有足够的微生物，用非稀释法测定。若样品中的有机物含量较少， BOD5 的质量浓度不大于6mg/L，但样品中无足够的微生物，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，采用非稀释接种法测定。7.1.1 试样的准备7.1.1.1 待测试样测定前待测试样的温度达到（202），若

11、样品中溶解氧浓度低，需要用曝气装置（5.9）曝气15min，充分振摇赶走样品中残留的空气泡；若样品中氧过饱和，将容器2/3 体积充满样品，用力振荡赶出过饱和氧，然后根据试样中微生物含量情况确定测定方法。非稀释法可直接取样测定；非稀释接种法，每升试样中加入适量的接种液(4.2)，待测定。若试样中含有硝化细菌，有可能发生硝化反应，需在每升试样中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂（4.10）。7.1.1.2 空白试样非稀释接种法，每升稀释水中加入与试样中相同量的接种液(4.2)作为空白试样，需要时每升试样中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂（4.10）。7.1.2 试样的测定7.1.2.1 碘量法测

12、定试样中的溶解氧将试样（7.1.1.1）充满二个溶解氧瓶（5.2）中，使试样少量溢出，防止试样中的溶解氧质量浓度改变，使瓶中存在的气泡靠瓶壁排除。将一瓶盖上瓶盖，加上水封，在瓶盖外罩上一个密封5罩，防止培养期间水封水蒸发干，在恒温培养箱（5.8）中培养5d4h 或（2+5）d4h 后测定试样中溶解氧的质量浓度。另一瓶15min 后测定试样在培养前溶解氧的质量浓度。溶解氧的测定按GB/T 7489 进行操作。7.1.2.2 电化学探头法测定试样中的溶解氧将试样（7.1.1.1）充满一个溶解氧瓶（5.2）中，使试样少量溢出，防止试样中的溶解氧质量浓度改变，使瓶中存在的气泡靠瓶壁排除。测定培养前试样

13、中的溶解氧的质量浓度。盖上瓶盖，防止样品中残留气泡，加上水封，在瓶盖外罩上一个密封罩，防止培养期间水封水蒸发干。将试样瓶放入恒温培养箱（5.8）中培养5d4h 或（2+5）d4h。测定培养后试样中溶解氧的质量浓度。溶解氧的测定按GB/T 11913 进行操作。空白试样的测定方法同7.1.2.1 或7.1.2.2。7.2 稀释与接种法稀释与接种法分为二种情况：稀释法和稀释接种法。若试样中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，且样品中有足够的微生物，采用稀释法测定；若试样中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，但试样中无足够的微生物，采用稀释接种法测定。7.2.1

14、试样的准备7.2.1.1 待测试样待测试样的温度达到（202），若试样中溶解氧浓度低，需要用曝气装置（5.9）曝气15min，充分振摇赶走样品中残留的气泡；若样品中氧过饱和，将容器的2/3 体积充满样品，用力振荡赶出过饱和氧，然后根据试样中微生物含量情况确定测定方法。稀释法测定，稀释倍数按表1 和表2 方法确定，然后用稀释水（4.4）稀释。稀释接种法测定，用接种稀释水（4.5）稀释样品。若样品中含有硝化细菌，有可能发生硝化反应，需在每升试样培养液中加入2 ml 丙烯基硫脲硝化抑制剂（4.10）。稀释倍数的确定：样品稀释的程度应使消耗的溶解氧质量浓度不小于2mg/L，培养后样品中剩余溶解氧质量浓

15、度不小于2mg/L，且试样中剩余的溶解氧的质量浓度为开始浓度的1/32/3 为最佳。稀释倍数可根据样品的总有机碳（TOC）、高锰酸盐指数（IMn）或化学需氧量（CODCr）的测定值，按照表1 列出的BOD5 与总有机碳（TOC）、高锰酸盐指数（IMn）或化学需氧量（CODcr）的比值R 估计BOD5 的期望值（R 与样品的类型有关），再根据表2 确定稀释因子。按照确定的稀释倍数，将一定体积的试样或处理后的试样用虹吸管（5.4）加入已加部分稀释水或接种稀释水的稀释容器中（5.3），加稀释水或接种稀释水至刻度，轻轻混合避免残留气泡，待测定。若稀释倍数超过100 倍，可进行两步或多步稀释。若试样中有微生物毒性物质，应配制几个不同稀释倍数的试样，选择与稀释倍数无关的结果，并取其平均值。试样测定结果与稀释倍数的关系确定如下：当分析结果精度要求较高或存在微生物毒性物质时，一个试样要做2 个以上不同的稀释倍数，每个试样每个稀释倍数做平行双样同时进行培养。