钙的比色法测定人民医院文档格式.docx

1、血清、肝素锂或钠抗凝血浆、定时或随时采集未加防腐剂的酸化尿液。2.3 标本采集与处理：所有用于钙测试的样品，特别要注意一个问题：佩戴用碳酸钙粉制造的防护手套会在样品处理过程中造成污染（例如，吸管滴头，吸管，样品杯和杯盖），而这些被污染的消耗品在加样时又会污染待测样品，从而使测试结果偏高。因此建议在拿这些消耗品时使用不含碳酸钙粉的手套，或者直接用干净的空手去拿，也可以用流水轻轻地冲洗有粉末的手套（不要用肥皂或任何类型的去污剂）然后再将其干燥后使用。说明：标有不含粉末的手套，在手套的里层也可能含有一些污染性粉剂。2.3.1 血清和血浆样品卧床患者的结果会偏低 3%；淤血的钙浓度会偏高 15%。样品

2、采集后 2天内要离心标本，吸出血清。处理样品时要将其当成生物污染品。2.3.2 尿液样品定时或随时采集未加防腐剂的酸化尿液。依照以下程序对测试钙的尿样进行酸化处理。注意：这一程序只用于患者的样品，质控标本不需 如 此 处 理 。 您 可 以 将 24h 尿 液 全 部 或 其 中 一 部 分 进 行 酸 化 。 当 尿 液 还 有 其它不需酸化的测试项目时，可以将部分尿液进行酸化。酸化全部尿液：收集尿 液 前 将 20mL 6N 的 盐 酸 倒 入 收 集 尿 液 的 容 器 内 （ 随 机 收 集 的 尿 液 中 加 1mL6N 的盐酸）。如果收集前没有加盐酸，按照以上步骤酸化后，要将其放置

3、至少 1h 以 后 才 能 测 试 。 酸 化 部 分 尿 液 ： 将 全 部 尿 液 充 分 混 匀 后 ， 吸 出 5mL。 在 5mL 尿 液 中 加 100uL 6N 的 盐 酸 ，然 后 充 分 混 匀 。确 定 样 品 的 PH 值 在 1.5 5.0 之间，必要时进行调节。测试样品。酸化后尿样的 PH值要在 1.55.0 之间，PH 值低于 1.5 会产生一个负偏差。处理样品时要将其当成生物污染品 。3.标本的存放：血清、血浆：如果测试时间拖延超过 4小时，应将样品冷藏在 2-8 ，-18 下冷藏可长期保存。尿标本室温下最多 5天，冷藏最多 5周，-18 以下冷冻可保存 6个月。

4、4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。5.标本拒收的标准：采样管含 EDTA，氟化物，草酸或枸橼酸的样品，因为这些物质会与钙螯合而使结果产生负偏差。此外，接受 EDTA治疗的患者血样也不能测试。6.试验材料：6.1 测 试 Ca 所 需 的 物 品 包 括 ：Vitros 化 学 定 标 物 Kit1 ；Vitros 特 制 质 控 液 ；Vitros 尿液酸化剂 6N的盐酸。强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。6.1.1 试剂组成：干片成分：反应成份是砷 III 染色剂。其它成份有染色物质，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，交叉

5、连接剂和媒染剂。干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。6.1.2 试剂准备：从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态 1828。因此从冰箱中取出的试剂盒至少要在室温下要放置 60 分钟，而冷藏的试剂盒至少要在室温下放置30分钟。去除内包装后立即将干片盒放入仪器的储藏器中。在试剂盒达到室温后的 24 小时之内必须将其装入仪器中。6.1.3 试剂稳定性与贮存未开封的干片盒：存储在 2-8 或低于该范围。在机内干片储藏器中的干片盒：在仪器上放置时间不能超过 4 周，否则要更换新试剂。当仪器关闭时间不超过 2 个小时

6、时，可将干片盒留在储藏器中。出现以下情形要做质控检测：仪器关闭时间超过 2 小时；再次装载从仪器 储 藏 器 中 取 出 的 干 片 盒 。 如 果 储 藏 正 确 ， Vitros Ca 干 片 可 保 质 到 包 装 盒上标明的有效期限。参见 VITROS250 干化学分析仪试剂稳定性及贮存.SOP文 件 。6.1.4 变质指示：超过有效期的试剂干片不能使用。6.1.5 注意事项：为避免干片盒打开以前其内包装受损，不能摔打干片盒；不要让尖利物刺入内包装。6.2 校 准 品 ： 用 Vitros 化 学 定 标 物 Kit1 。 血 清 、 血 浆 用 相 同 的 定 标 液 ， 不过 各

7、自 的 SAVs 值 不 同 。有 关 标 准 液 的 配 制 ，使 用 及 保 存 的 配 制 ，保 存 和 稳 定的详情，可参阅 VITROS250 干化学分析仪校准品和质控品.SOP 文件。6.3 质 控 品 ： 使 用 Vitros 特 制 的 质 控 物 品 ； 若 使 用 其 它 的 一 些 质 控 物 品 ，当 与 别 的 Na 测 试 方 法 比 较 时 就 会 出 现 差 异 。 如 ： 用 人 血 清 / 血 浆 混 合 物 分 离制成的质控物品，含有高浓度防腐剂，稳定剂和其它化学添加剂的质控物品；含有或高或低总蛋白浓度的质控物品；乙烯乙二醇作稳定剂的质控物品不能使用。尿钙

8、有专门的质控，由于不含未分解的钙而不需进行特别酸化处理。有关质控液的配制，保存和稳定的详情，可参阅 VITROS250 干化学分析仪校准品和质控品.SOP 文件。7.仪器：美国强生厂家 VITROS250 全自动干式生化分析仪。具体测试程序请参阅操作手册的介绍。8.操作步骤：将试剂复温后直接放入仪器，样品编程，仪器 5分后自动打印结果。具体测试程序请参阅 VITROS250 操作手册.SOP。具体定标程序：用Vitros 化 学 定 标 物 Kit1, 定 标 液 复 溶 后 必 须 在 1 小 时 以 内 使 用 ，以 免 pH 值发生变化。参阅操作手册的相关章节内容。何时进行定标：在维护和

9、保养时更换了仪器的重要部件。质控结果持续超出线性范围内时，详情参阅操作手册。管理条例上指定的时间，在美国，CLIA 要求至少每 6个月定标一次。进行尿钙定标时，仪器会自动进行尿钾的定标。9.检验结果的判断与分析10.质量控制：操作建议：将质控物质当成生物污染品来处理；将质控液与患者样品同时进行测试；每天至少做一次质控以检测仪器运行状况；选择质控浓度来检查与临床的相关性；其它详情参阅操作手册质控章节的有关内容。有关质控操作的常规性条例可参照国际质控检测（IQCT）的内容。在每一批标本中都应把质控血清做为未知标本进行分析，以 2S 为质控警告限，3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参

10、见生化室室内质控操作规程.SOP 文件。11.计 算 方 法 ：以 用 Vitros化 学 定 标 物 校 准 仪 器 后 ，在 病 人 结 果 可 报 告 范 围内 ， 仪 器 直 接 报 告 可 靠 的 检 测 结 果 ， 以 mmol/L 报 告 。12.参考值范围血 清 / 血 浆 2.10-2.55mmol/L尿 液 ： 无 钙 饮 食 0.13-1.0mmol/ 天低 于 平 均 量 钙 饮 食 1.25-3.75mmol/ 天平 均 量 钙 饮 食 2.50-7.50mmol/ 天参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。1

11、3.临床意义 钙是骨骼中的主要矿物质成分，人体中 99%的钙都存在于骨骼中。钙离子在传送神经冲动，维持正常的肌肉收缩方面起着非常重要的作用。人体中非正常的血钙浓度预示可能患有甲状腺功能失调，骨骼疾病，癌症，营养不良和吸收不良综合症，维生素 D缺乏，过量摄入含钙的抗坏血酸以及肾脏疾病。14.操作性能14.1线 性 范 围 ： 血 清 / 血 浆 ： 0.25-3.49mmol/L； 尿 液 ： 0.25-4.44mmol/L。14.2精 密 度 ： 在 Vitros 250生化仪上用质控液来测精密度。结果反映了该方法的精密度。当仪器维护，周围环境，干片处理和保存，质控液的复溶以及样品处理等方面发

12、生变化都会影响结果的重复性。日间精密度xsCV 室间精密度CV血 清（mmol/L）（%）n=20 天样 品 1 n=782.30.02样 品 10.041.5样 品 2 n=783.0样 品 21.3尿 液n=22 天样 品 1 n=881.40.064.0样 品 2 n=882.00.084.3样 品 3 n=842.80.03样 品 3样 品 4 n=88样 品 42.6*日间精密度是将 2至 3份相同的样品在一天中运行两次，然后对测试结果进行统计计算。*室间精密度是用同一个批号的干片每周定标一次，然后对测试结果进行统计计算。14.3 方法学比较：用 Vitros700 仪 器 和 原

13、子 吸 收 分 析 法 分 别 测 试 相 同 的 血 清 / 尿 液 样 品 ，对比 结 果 显 示 Vitros 方 法 的 准 确 度 良 好 ；用 Vitros250 仪 器 与 Vitros700 仪 器测 试 相 同 的 血 清 / 尿 液 样 品 ，对 比 结 果 显 示 Vitros250 方 法 的 准 确 度 良 好 ，血清 ： Y=0.99X+0.2（ r=0.999 ， N=72 ， 检 测 范 围 0.85-3.49mmol/L）；尿液：Y=1.02X-0.03（ r=0.998 ， N=84 ， 检 测 范 围 0.25-4.17mmol/L）。14.4灵 敏 度 ： 血 清 / 血 浆 和 尿 液 ： 0.25mmol/L 。14.5特 异 性 ： 经 测 试 ， 以 下 物 质 对 Vitros Ca干片法均无干扰（偏差0.2mmol/L阿 司 匹 林 30mg/Dl 、对 氨 基 水 杨 酸 23mg/dL 、胆 红 素20 mg/d