高中生物实验知识点总结文档格式.docx

1、转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。左眼注视目镜，同时把反光镜转向光源，直至视野光亮均匀适度.调节视野亮度只可用遮光器与反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜;光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。选低倍镜选较大得光圈选反光镜（左眼观察）3。观察。将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近切片（约0、5c）,左眼观察目镜,（反时针）旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升，瞧到物像时轻微来回旋转细准焦,直到物像清晰。（找不到物像时，可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。.观察时两眼都要睁开,便于左眼观察,右眼

2、瞧着画图。侧面观察降镜筒左眼观察找物像细准焦螺旋调清晰4。高倍镜得转换。找到物像后，把要观察得物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜,只准用细准焦螺旋与反光镜把视野调整清晰，直到物像清楚为止。顺序:移装片转动镜头转换器调反光镜或光圈调细准焦螺旋注:换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后，只准调节细准焦与反光镜（或光圈）。问1:低倍镜换为高倍镜后，若瞧不到或瞧不清原来得像，可能原因？（ABC） A、物像不在视野中 、焦距不在同一平面 C、载玻片放反，盖玻片在下面 D、未换目镜问:放大倍数与视野得关系：放大倍数越小，视野范围越大，瞧到得细胞数目越多,视野越亮，工作距离越长；放大倍数越大,视野范围越

3、小，瞧到得细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。故装片不能反放。5.装片得制作与移动:制作：滴清水放材料盖片移动：物像在何方,就将载玻片向何处移。（原因：物像移动得方向与实际移动玻片得方向相反）6.污点判断：1）污点随载玻片得移动而移动,则位于载玻片上；2）污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜；换物镜后消失，则位于物镜;3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。7。完毕工作.使用完毕后,取下装片，转动镜头转换器，逆时针旋出物镜，旋进镜头盒；取出目镜，插进镜头盒,盖上。把显微镜放正。实验一:观察DN、RN在细胞中得分布（必修一P26）一。实验目得:初步掌握观察DNA与RNA

4、在细胞中分布得方法二实验原理:。甲基绿与吡罗红两种染色剂对DN与N得亲与力不同，甲基绿使NA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA与NA在细胞中得分布.。盐酸能够改变细胞膜得通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中得DNA与蛋白质分离,有利于NA与染色剂结合。三.方法步骤:操作步骤注意问题 解释取口腔上皮细胞制片 载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0、9%得NaCl溶液用消毒牙签在自己漱净得口腔内侧壁上轻刮几下取细胞将载玻片在酒精灯下烘干 防止污迹干扰观察效果保持细胞原有形态消毒为防止感染,漱口避免取材失败固定装片水解将烘干得载玻片放入质量分数为

5、8%得盐酸溶液中，用300C水浴保温5in 改变细胞膜得通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体得A与蛋白质分离而被染色冲冼涂片用蒸馏水得缓水流冲洗载玻片10S洗去残留在外得盐酸染色滴滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5mn 观察 先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅得区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察 使观察效果最佳实验二 检测生物组织中得糖类、脂肪与蛋白质（必修一P18） 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪与蛋白质二.实验原理：某些化学试剂能使生物组织中得有关有机化合物，产生特定得颜色反应。1可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色得Cu 2沉淀。

6、如：葡萄糖+ Cu （ H） 2 葡萄糖酸+ Cu 2O（砖红色）+ ，即Cu（ OH ） 被还原成uO，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。2脂肪可以被苏丹染液染成橘黄色（或被苏丹染液染成红色）.淀粉遇碘变蓝色.。蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。（蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaH溶液中能与双缩脲试剂中得2+作用,产生紫色反应。三实验材料做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色得植物组织,如苹果、梨。（因为组织得颜色较浅,易于观察。2.做脂肪得鉴定实验。应选富含脂肪得种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡34小时（也可用蓖麻种子）。做蛋白质得鉴定实验，可用富含蛋白质得黄豆或鸡蛋清

7、。四、实验试剂斐林试剂（包括甲液:质量浓度为0、1gLNaOH溶液与乙液：质量浓度为、05g/ mL CuS4溶液）、苏丹或苏丹染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0、1g/ m NaOH溶液与B液:质量浓度为0、01g/ mL CuS4溶液）、体积分数为%得酒精溶液，碘液、蒸馏水。五、方法步骤:（一）可溶性糖得鉴定操 作 方 法注 意问题 解 释1、 制备组织样液。（去皮、切块、研磨、过滤）苹果或梨组织液必须临时制备.因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色，将产生得颜色掩盖。、取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3、向试管内注入1L新制得斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂得甲

8、液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时，生成得Cu（ O ） 2在70900下分解成黑色CO与水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无C （ H ）2生成.、 试管放在盛有60C温水得大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：浅蓝色 棕色 砖红色（沉淀）最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。也可用酒精灯对试管直接加热。 防止试管内得溶液冲出试管,造成烫伤;缩短实验时间。（二）脂肪得鉴定操作 方 法 注 意 问题 解 释花生种子浸泡、去皮、切下一些

9、子叶薄片，将薄片放在载玻片得水滴中，用吸水纸吸去装片中得水。干种子要浸泡4小时,新花生得浸泡时间可缩短。因为浸泡时间短,不易切片，浸泡时间过长,组织较软，切下得薄片不易成形。切片要尽可能薄些,便于观察。在子叶薄片上滴2滴苏丹或苏丹染液,染色分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用0酒精洗去浮色，吸去酒精。 酒精用于洗去浮色,不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴得观察.同时，酒精就是脂溶性溶剂,可将花生细胞中得脂肪颗粒溶解成油滴。用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上12滴蒸馏水,盖上盖玻片. 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。低倍镜下找到花生子叶薄片得最薄处,可瞧到细胞中有染成橘黄色或红色

10、圆形小颗粒. 装片不宜久放。 时间一长,油滴会溶解在乙醇中。实验一 观察DNA与RNA在细胞中得分布 实验原理：DNA绿色，NA 红色 分布:真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体与叶绿体内也含有少量得DA;NA主要分布在细胞质中。实验结果: 细胞核呈绿色，细胞质呈红色、 实验二 物质鉴定 还原糖 + 斐林试剂砖红色沉淀 脂肪 + 苏丹III橘黄色 脂 肪 +苏丹IV红色 蛋白质 双缩脲试剂紫色反应 、还原糖得检测 （1）材料得选取：还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜. （2）试剂:斐林试剂（甲液:、1gmL得NaOH溶液，乙液：0、05g/m得CuSO4溶液）,现配现用。（）

11、步骤：取样液2mL于试管中加入刚配得斐林试剂1mL（斐林试剂甲液与乙液等量混合均匀后再加入）水浴加热2mn左右观察颜色变化（白色浅蓝色砖红色） 模拟尿糖得检测 、取样:正常人得尿液与糖尿病患者得尿液 、检测方法:斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果:（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀得就是糖尿病患者得尿液,未出现砖红色沉淀得就是正常人得尿液.4、分析：因为糖尿病患者得尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。2、脂肪得检测 含脂肪量越高得组织越好,如花生得子叶. （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄得花生切片放在

12、载玻片中央 染色（滴苏丹染液23滴切片上23mn后吸去染液滴体积分数5%得酒精洗去浮色吸去多余得酒精） 制作装片（滴12滴清水于材料切片上盖上盖玻片） 镜检鉴定（显微镜对光低倍镜观察高倍镜观察染成橘黄色得脂肪颗粒） 3、蛋白质得检测 （）试剂：双缩脲试剂（液：、1gmL得NOH溶液，B液:0、01g/mL得CSO4溶液） （）步骤：试管中加样液2mL加双缩脲试剂A液1mL，摇匀加双缩尿试剂液4滴，摇匀观察颜色变化（紫色） 考点提示：（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些?葡萄糖、果糖、麦芽糖都就是还原性糖；淀粉、蔗糖、纤维素都就是非还原性糖。（2）还原性糖植物组织取材条件?含糖量较高、颜色为白色

13、或近于白色,如:苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。（）研磨中为何要加石英砂?不加石英砂对实验有何影响?加石英砂就是为了使研磨更充分。不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。（4）斐林试剂甲、乙两液得使用方法？混合得目得?为何要现混现用？混合后使用；产生氢氧化铜；氢氧化铜不稳定。（5）还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化得顺序为：浅蓝色棕色 砖红色 （6）花生种子切片为何要薄? 只有很薄得切片，才能透光,而用于显微镜得观察。（）转动细准焦螺旋时,若花生切片得细胞总有一部分清晰,另一部分模糊，其原因一般就是什么？切片得厚薄不均匀. （）脂肪鉴定中乙醇作用？ 洗去浮色。（9）双缩脲试剂、B两液就是否混合后用？先加液得目得。怎样通过对比瞧颜色变化?不能混合;先加A液得目得就是使溶液呈碱性;先留出一些大豆组织样液做对比。 实验三 观察叶绿体与细胞质流动1、材料:新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片 、原理：叶绿体在显微镜下观察,绿色，球形或椭球形。用健那绿染液染色后得口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。知识概要:取材制片低倍观察 高倍观察（）为什么可直接