高中生物实验知识点总结文档格式.docx

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转动转换器,使低倍镜对准通光孔,选取较大光圈对准通光孔。

左眼注视目镜，同时把反光镜转向光源，直至视野光亮均匀适度.调节视野亮度只可用遮光器与反光镜，光线过强，改用较小光圈或用平面反光镜;

光线过弱，改用较大光圈或用凹面反光镜。

选低倍镜→选较大得光圈→选反光镜（左眼观察）

3。

观察。

将切片或装片放在载物台上,标本正对通光孔中心。

转动粗准焦螺旋（顺时针），俯首侧视镜筒慢慢下降，直到物镜接近切片（约0、5cｍ）,左眼观察目镜,（反时针）旋转粗准焦螺旋,使镜筒慢慢上升，瞧到物像时轻微来回旋转细准焦,直到物像清晰。

（找不到物像时，可重复一次或移动装片使标本移至通光孔中心）。

.观察时两眼都要睁开,便于左眼观察,右眼瞧着画图。

侧面观察降镜筒→左眼观察找物像→细准焦螺旋调清晰

4。

高倍镜得转换。

找到物像后，把要观察得物像移到视野中央，把低倍镜移走，换上高倍镜,只准用细准焦螺旋与反光镜把视野调整清晰，直到物像清楚为止。

顺序:

移装片→转动镜头转换器→调反光镜或光圈→调细准焦螺旋

注:

换高倍物镜时只能移动转换器,换镜后，只准调节细准焦与反光镜（或光圈）。

问1:

低倍镜换为高倍镜后，若瞧不到或瞧不清原来得像，可能原因？

（ABC）

A、物像不在视野中Ｂ、焦距不在同一平面C、载玻片放反，盖玻片在下面D、未换目镜

问２:

放大倍数与视野得关系：

放大倍数越小，视野范围越大，瞧到得细胞数目越多,视野越亮，工作距离越长；

放大倍数越大,视野范围越小，瞧到得细胞数目越少,视野越暗,工作距离越短。

故装片不能反放。

5.装片得制作与移动:

制作：

滴清水→放材料→盖片

移动：

物像在何方,就将载玻片向何处移。

（原因：

物像移动得方向与实际移动玻片得方向相反）

6.污点判断：

1）污点随载玻片得移动而移动,则位于载玻片上；

2）污点不随载玻片移动,换目镜后消失,则位于目镜；

换物镜后消失，则位于物镜;

3）污点不随载玻片移动，换镜后也不消失，则位于反光镜上。

7。

完毕工作.使用完毕后,取下装片，转动镜头转换器，逆时针旋出物镜，旋进镜头盒；

取出目镜，插进镜头盒,盖上。

把显微镜放正。

实验一:

观察DNＡ、RNＡ在细胞中得分布（必修一P26）

一。

实验目得:

初步掌握观察DNA与RNA在细胞中分布得方法

二．实验原理:

１。

甲基绿与吡罗红两种染色剂对DNＡ与ＲNＡ得亲与力不同，甲基绿使ＤNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。

利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示DNA与ＲNA在细胞中得分布.

２。

盐酸能够改变细胞膜得通透性,加速染色剂进入细胞,同时使染色休中得DNA与蛋白质分离,有利于ＤNA与染色剂结合。

三.方法步骤:

操作步骤ﻩ注意问题解释

取口腔上皮细胞制片载玻片要洁净，滴一滴质量分数为0、9%得NaCl溶液

用消毒牙签在自己漱净得口腔内侧壁上轻刮几下取细胞

将载玻片在酒精灯下烘干防止污迹干扰观察效果

保持细胞原有形态

消毒为防止感染,漱口避免取材失败

固定装片

水解ﻩ将烘干得载玻片放入质量分数为8%得盐酸溶液中，用300C水浴保温5ｍin改变细胞膜得通透性，加速染色剂进入细胞，促进染色体得ＤＮA与蛋白质分离而被染色

冲冼涂片ﻩ用蒸馏水得缓水流冲洗载玻片10Sﻩ洗去残留在外得盐酸

染色ﻩ滴２滴吡罗红甲绿染色剂于载玻片上染色5mｉn

观察先低倍镜观察,选择染色均匀、色泽浅得区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察使观察效果最佳

实验二检测生物组织中得糖类、脂肪与蛋白质（必修一P18）

　尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪与蛋白质

二.实验原理：

某些化学试剂能使生物组织中得有关有机化合物，产生特定得颜色反应。

1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）与斐林试剂发生作用，可生成砖红色得Cu2Ｏ沉淀。

如：

葡萄糖+Cu（ＯH　）2　　葡萄糖酸　+Cu2O↓（砖红色）+　Ｈ２Ｏ，即Cu　（OH）２被还原成Ｃu　２O，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸。

2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染液染成红色）.淀粉遇碘变蓝色.

３。

蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。

（蛋白质分子中含有很多肽键,在碱性NaＯH溶液中能与双缩脲试剂中得Ｃｕ2+作用,产生紫色反应。

三．实验材料

做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色得植物组织,如苹果、梨。

（因为组织得颜色较浅,易于观察。

2.做脂肪得鉴定实验。

应选富含脂肪得种子,以花生种子为最好,实验前一般要浸泡3～4小时（也可用蓖麻种子）。

做蛋白质得鉴定实验，可用富含蛋白质得黄豆或鸡蛋清。

四、实验试剂

斐林试剂（包括甲液:

质量浓度为0、1g／　ｍL　NaOH溶液与乙液：

质量浓度为０、05g/mLCuSＯ4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：

质量浓度为0、1g/mＬNaOH溶液与B液:

质量浓度为0、01g/mLCuSＯ4溶液）、体积分数为５０%得酒精溶液，碘液、蒸馏水。

五、方法步骤:

（一）可溶性糖得鉴定

操作方法ﻩ注意　问　题解释

1、制备组织样液。

（去皮、切块、研磨、过滤）ﻩ苹果或梨组织液必须临时制备.ﻩ因苹果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色，将产生得颜色掩盖。

２、　取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。

3、　向试管内注入1ｍL新制得斐林试剂，振荡。

应将组成斐林试剂得甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂;

切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测.ﻩ斐林试剂很不稳定,甲、乙液混合保存时，生成得Cu　（OＨ）2在70~900Ｃ下分解成黑色CｕO与水；

甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应,无Cｕ（ＯH）　2生成.

４、试管放在盛有５０－6５0C温水得大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：

浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）ﻩ最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部,试管口不朝向实验者。

也可用酒精灯对试管直接加热。

防止试管内得溶液冲出试管,造成烫伤;

缩短实验时间。

（二）脂肪得鉴定

操　作方法注意问　题解释

花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片得水滴中，用吸水纸吸去装片中得水。

ﻩ干种子要浸泡３～4小时,新花生得浸泡时间可缩短。

ﻩ因为浸泡时间短,不易切片，浸泡时间过长,组织较软，切下得薄片不易成形。

切片要尽可能薄些,便于观察。

在子叶薄片上滴2～３滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液,染色１分钟。

染色时间不宜过长。

用吸水纸吸去薄片周围染液，用５0％酒精洗去浮色，吸去酒精。

酒精用于洗去浮色,不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴得观察.同时，酒精就是脂溶性溶剂,可将花生细胞中得脂肪颗粒溶解成油滴。

用吸水纸吸去薄片周围酒精,滴上1～2滴蒸馏水,盖上盖玻片.滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。

低倍镜下找到花生子叶薄片得最薄处,可瞧到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒.装片不宜久放。

时间一长,油滴会溶解在乙醇中。

　实验一观察DNA与RNA在细胞中得分布

实验原理：

DNA　绿色，ＲNA红色

分布:

真核生物DNA主要分布在细胞核中,线粒体与叶绿体内也含有少量得DＮA;

ＲNA主要分布在细胞质中。

实验结果:

细胞核呈绿色，细胞质呈红色、

　　实验二物质鉴定

还原糖+斐林试剂～砖红色沉淀

脂　肪+苏丹III　～橘黄色

脂肪+　苏丹IV～　红色

蛋白质＋　双缩脲试剂　~紫色反应

１、还原糖得检测

（1）材料得选取：

还原糖含量高,白色或近于白色,如苹果,梨,白萝卜.

（2）试剂:

斐林试剂（甲液:

０、1g／mL得NaOH溶液，乙液：

0、05g/mＬ得CuSO4溶液）,现配现用。

（３）步骤：

取样液2mL于试管中→加入刚配得斐林试剂1mL（斐林试剂甲液与乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2mｉn左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）

★模拟尿糖得检测

１、取样:

正常人得尿液与糖尿病患者得尿液

２、检测方法:

斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果:

（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀得就是糖尿病患者得尿液,未出现砖红色沉淀得就是正常人得尿液.　

4、分析：

因为糖尿病患者得尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

2、脂肪得检测

含脂肪量越高得组织越好,如花生得子叶.

（2）步骤：

制作切片（切片越薄越好）将最薄得花生切片放在载玻片中央　

　　　　　↓

　　　　　染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2~3mｉn后吸去染液→滴体积分数5０%得酒精洗去浮色→吸去多余得酒精）

　　　↓　

　　　　　制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）　

　　　　↓

　　　镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色得脂肪颗粒）

3、蛋白质得检测

（１）试剂：

双缩脲试剂（Ａ液：

０、1g／mL得NａOH溶液，B液:

0、01g/mL得CｕSO4溶液）

（２）步骤：

试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂Ｂ液4滴，摇匀→观察颜色变化（紫色）

考点提示：

（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些?

葡萄糖、果糖、麦芽糖都就是还原性糖；

淀粉、蔗糖、纤维素都就是非还原性糖。

（2　）还原性糖植物组织取材条件?

含糖量较高、颜色为白色或近于白色,如:

苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（３）研磨中为何要加石英砂?

不加石英砂对实验有何影响?

加石英砂就是为了使研磨更充分。

不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）斐林试剂甲、乙两液得使用方法？

混合得目得?

为何要现混现用？

混合后使用；

产生氢氧化铜；

氢氧化铜不稳定。

（5）还原性糖中加入斐林试剂后,溶液颜色变化得顺序为：

　浅蓝色　棕色砖红色

（6）花生种子切片为何要薄?

只有很薄得切片，才能透光,而用于显微镜得观察。

（７）转动细准焦螺旋时,若花生切片得细胞总有一部分清晰,另一部分模糊，其原因一般就是什么？

切片得厚薄不均匀.

（８）脂肪鉴定中乙醇作用？

洗去浮色。

（9）双缩脲试剂Ａ、B两液就是否混合后用？

先加Ａ液得目得。

怎样通过对比瞧颜色变化?

不能混合;

先加A液得目得就是使溶液呈碱性;

先留出一些大豆组织样液做对比。

实验三观察叶绿体与细胞质流动　

1、材料:

新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶,口腔上皮细胞临时装片

２、原理：

叶绿体在显微镜下观察,绿色，球形或椭球形。

用健那绿染液染色后得口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

知识概要:

取材　制片　低倍观察高倍观察　

（１）为什么可直接