病理技术理论与操作手册Word文件下载.docx

1、 一、常规石蜡切片制作法（一）组织脱水（二）组织的透明（三）组织浸蜡（四）组织块包埋（五）蜡块的修切（六）石蜡切片（七）裱片（八）烘烤切片（九）切片的普通染色（十）苏木素的种类及其配制法（十一）伊红染液的配制二、超声波快速石蜡制片法三、快速石蜡制片法第五节 冰冻切片（一）冷冻切片的种类（二）冷冻切片的目的（三）冷冻切片的制作方法（四）冷冻切片的快速染色法（一）MW固定组织（二）MW快速石蜡制作法（三）MW技术的特殊染色法（四）MW技术的免疫组化染色法第二篇各种组织特殊染色法一、胶原纤维染色法1、Van Gieson染色法2、Masson氏三色染色法二、网状纤维染色法1、Gomoris氨银法2、

2、Godon和Swet氏法3、Wilder氏法4、Foot氏法三、弹性纤维染色法1、Weigert氏雷锁辛品红法2、Gomori醛品红法3、Unna地衣红技术4、Verhoff氏酒精苏木素技术四、横纹肌染色法1、磷钨酸苏木素染色法（PTAH）2、Masson氏法染色法3、Van Gieson氏法五、基底膜的显示1、六氨银显示法2、PAS显示法3、Masson氏三色染色法4、AFOG法5、六氨银AFOG联合染色法六、纤维素染色法1、MSB的改良法2、PTAH法七、细菌染色法1、Warthin-Satamy氏法显示幽门螺杆菌2、甲苯胺蓝染色法3、Wade-Fite氏抗酸菌染色法4、Grocott-G

3、omori氏六氨银改良法显示真菌5、六氨银改良法显示组织胞浆菌八、病毒包涵体染色法1、Macchiaello氏改良法显示SARS病毒包涵体2、Giemsa法显示多种病毒涵体3、伊红和甲基蓝显示合胞和巨细胞病毒包涵体九、淀粉样物的染色法1、甲基紫法2、改良的刚果红甲醇法十、神经系统染色技术（一）苏木素VG法染中枢神经（二）神经细胞尼氏体染色（三）改良的Masland、Glees方法（四）改良的Palmgren氏法染神经纤维（五）改良的Egers氏法染变性轴索（六）改良的Loyez氏法染神经髓鞘第三篇组织化学及其显示法一、色素显示法1、硫酸亚铁法2、Masson Fontana氨银法二、含铁血黄素

4、显示法1、Perls亚铁氰化钾法三、脂褐素显示法1、PAS法2、Schmorl氏法四、钙盐显示法1、硝酸银法五、脂类染色法1、苏丹IIIIV联合法2、油红法3、苏丹黑B法4、Schultz法显示胆固醇与胆固醇酯六、糖类1、PAS显示法2、AB法3、ABPAS七、核酸1、Feulgen显示DNA法2、核仁组成区和糖多糖复合显示法3、粘多糖和核仁组成区双染法八、酶组织化学1、改良的Gomori氏硝酸铅法2、改良的Gomori氏硝酸铅法3、Gomoris钙钴法4、-磷酸萘脂法5、磷酸奈酯AS-TR（或AS-BJ）法6、酸、碱性磷酸酶双染色法第四篇免疫组织化学技术一、免疫组织化学的意义二、免疫组织化学

5、技术的发展概况（一）免疫荧光细胞化学技术（二）免疫酶细胞化学技术（三）非标记抗体酶法（四）亲和细胞化学法（五）碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（六）免疫金银法（七）LSAB法（八）EnVisionTM Systems法（九）真空负压LSAB法三、常用免疫组织化学染色方法（一）ABC法（二）LSAB法（三）真空负压LSAB法（四）EnvisionTM Systems法（五）免疫组化双染色法（I）（六）免疫组化双染色法（II）（七）细胞培养片免疫荧光染色法（八）真空负压、免疫荧光染色法染细胞培养片四、抗原修复（一）为什么要进行抗原修复（二）用什么方法进行抗原修复1、真空负压抗原修复法2、微波辐射抗原修复法

6、3、高压抗原修复法4、隔水热抗原修复法5、电炉加热抗原修复法（三）抗原修复必须注意的问题五、作好免疫组化染色必须注意的问题六、免疫组化阳性病例的评判及相关问题七、常用抗体的应用范围及选用（一）常用上皮细胞及肿瘤标记物（二）常用的时间叶源性组织及其肿瘤的检测抗体（三）肌组织及其相关肿瘤的常用抗体（四）淋巴组织及相关肿瘤检测的常用抗体（五）神经和神经内分泌及其相关肿瘤抗体（六）其它八、免疫组织化学在乳腺癌中的应用第一篇 常规标本制作程序第一节 组织标本收集取材固定一，标本收集和查验程序。对于所有送检的标本，必须认真执行查验程序，方能进入下一程序，其主要程序是：1，收集标本时：要仔细查对申请单上的姓

7、名与标本上的姓名，序号是否一致；标本的件数与申请单是否相符；标本是否用固定液固定过。2，标本经上述验收后，进行编号登记，以防错乱。编号按年份和流水号两种方法，如果为了今后的查找较为方便，按年份编号为较好。二，活检组织取材：在外科送检的诸多材料中，对于每一例病例的材料，大小都不一样，但对于较大的标本，不可能都对其进行制作切片，因此，选择适合于病理技术制作，适合于病理诊断且有利于回顾性研究等各方面的材料，是病理活检的关键，通常把这过程称为取材。（一）取材时必须注意以下问题： 取出所有送检的标本，量其大小，称其重量，描写其色泽，质地，形状和肉眼所见表面情况。当标本切开后，应详细描写其切面的颜色，硬度

8、，病变部位等，必要时绘图说明。 对于细小标本如肺支气管穿刺物标本胃肠镜活检标本1等，应将其染上伊红颜色后，用擦镜纸或特别脱水袋将其包上或装上，以防漏出脱水盒的小孔。 对于有传染性的标本，让标本彻底固定后再取材。如结核瘤标本等。 对于罕见特殊的标本，应小心保存好，在不影响诊断的情况下，尽量保存好大体标本。以利于教学标本，陈列标本的收集。 边取材边固定，组织标本较多的单位，取材经常要花上几个小时，如果从下午2：30开始取材，至5：30完成，那么先取的材料就可以多固定几个小时，如此可以防止固定时间不足，同时也可防止组织发生自溶。 对于骨髓穿刺的组织，可先用10%硝酸浸泡30分钟左右，然后再与其它组织

9、进行处理。 骨组织和钙化组织，应彻底脱钙后，方能进行制作。具体用大头针能顺利扎入骨组织则可。 活检组织取材，不能太厚，以不超过2mm为宜。以防脱水不彻底，不利于制片。 每取完一例标本后，所有的工具如刀，剪，盘镊，切板等，必须用水冲洗干净，以免污染，混淆于其它病例。 组织取完即刻放入打印好号码的盒内，放入固定液中固定。（二） 各种器官及其肿瘤取材的方法1、乳腺： 纤维腺瘤：肉眼观察其形状、体积、包膜是否完整，切面是否均匀，有无坏死，取材：肿瘤连包膜1-3块（即周边组织1块，包膜与周边组织1块，如果肿瘤不大，上述几种即周边包膜和肿瘤可取1块）。乳腺癌：体积，皮肤颜色，有无水肿或变硬，肿大淋巴结，数

10、量，组别，硬度，及切面情况。沿乳腺的最长径经过乳头切开，观察肿瘤的面积，颜色，硬度及浸润情况等。取材：乳头及其下组织，肿瘤及肿瘤交界处，肿瘤下胸肌，全部淋巴结（注明组别），根据各种病变的情况，确定取材的块数，如切缘、包膜、肿瘤等均应取到各组淋巴结分别全部切材。2、食管癌： 切除的食管长度及周径，管壁有无水肿或粘连，肿大淋巴结的位置，大小，硬度及数目。沿肿瘤对侧纵形切开，肿瘤大小及形状。肿瘤上下交界处各取一块。或沿长轴通过肿瘤全径取出大切片或分成数段，全部淋巴结，分别切块包埋3、胃溃疡及胃癌：全胃或部分切除，大弯及小弯长度，肿大淋巴结的部位、大小，硬度及数目，病变处相应浆膜面有何变化。一般沿大弯

11、剪开，观察病变大小，深度，边缘及周围变化，如为癌瘤，属何种类型，与大小切端的距离。病变及与其交界处胃壁全层的胃组织（尽量侧重于小弯，并注意沿长轴切取组织块），上下切端组织，肿大的淋巴结（注明组别）4、阑尾：一般于近、中、远三段各取一组织块，远端一块尽量靠近尖端，以免遗漏尖癌。已被剖开者，沿纵轴取组织块，如检查时不能发现病变所在，需多做断面，以寻觅病变部位和取组织块。5、肠癌：切除肠管的长度，肿瘤 生长部位、大小、局部浆膜等情况。如为十二指肠癌，则应注意与特氏壶腹的关系。肿瘤 及交界处肠壁全层组织，上下切端，肿大的淋巴结。6、肠梗阻：梗阻部位、长度、直径及表面变化（颜色、水肿、充血、出血）；检查

12、肠系膜 的变化，沿病变血管解剖，作多数横断面，观察血管壁是否变厚，寻找栓塞的起止部位；肠粘膜有无溃疡。病变最显著处及肠的两端各切一块，病变血管（带些系膜）各切一块。7、肠套叠：注意套叠部位及套叠 关系，寻找阑尾，肠壁是否增厚及变硬，以手指放入小肠为引导，沿肠系膜 剪开，寻找有无原发病变（在套入部位的最前端寻找有无肿瘤、溃疡等到变化）。切面观察各层肠壁的厚度、水肿、充血、出血、坏死及硬变等到情况。原发病变（如肿块，溃疡等）。有变化的肠壁厚度，阑尾，肿大淋巴结。8、肠结核：外部有无粘连，白色斑块、结节、狭窄，病变上下的肠段有何改变，有无淋巴结肿大。沿病变对侧切开，观察病变情况（溃疡、突起、体积、有

13、无息肉样改变，肠道是否变为狭窄或增厚）。病变部，上下切缘，肿大的淋巴结。9、肝活体组织：大小、形状、颜色、表面及切面有无结节状或纤维组织增生，有无灰白色结节等。包含各病变的组织，如标本较小，全部切取。10、阴茎癌：肿瘤生长的部位，大小，溃烂及向阴茎浸润情况，切端与肿瘤明显浸润处的距离。纵切（通过尿管）观察切面情况。肿瘤切面一块，阴茎截除端一块。11、肾结核：注入福尔马林固定一周再切，体积，表面是否光滑，有无粘连、灰白色小结节，输尿管长度，直径，及硬度。沿输尿管及肾盂切开，肾盂是否扩张，切面破坏情况，粘膜变化，主质变化，乳头情况，（注明哪一个）；输尿管厚度，有否梗塞，粘膜情况。肾主质包括病变及交

14、界处，输尿管及切端。12、肾盂积水：先抽去积液，再注入固定液后再检查。肾体积、表面性状（色泽、平滑否、结节、粘连）。沿肾、肾盂及输尿管切开，注意阻塞部位及原因。观察肾盏、肾盂及输尿管扩张情况，肾实质厚度。肾实质厚处及薄处各取一块，输尿管各取一块。13、肾癌：肾及肿瘤之体积及重量，肿瘤部位及与肾的关系，表面有无水肿或粘连，有无肿大淋巴结。切面：肿瘤位置、形状、大小、颜色、包膜、坏死、出血、囊性变，肾盂与输尿管中有无蔓延。肿瘤包括其旁的正常组织，肿瘤 以外的肾组织、输尿管。14、膀胱癌：全部或部代分膀胱切除，除非癌瘤位于前侧，一般沿前侧切开，肿瘤位置，与输尿管中及膀胱的关系、体积、生长情况及浸润情况，有无淋巴结（大小，硬度，切面变化）。沿纵轴方向取材。肿瘤及膀胱壁全层组织；乳头状瘤应包括蒂部组织，三角区组织。15